DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
同型半胱酸（Hcy）測定試劑盒（酶循環(huán)法）  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名：4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式：C16H14O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

鐵蛋白   英文名稱：   human Ferritin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Fe  4-Acetamidophenol  103-90-2  中文名：對乙酰氨基酚  分子式：C8H9NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

鐵測試盒   Iron test case  4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  119018-29-0  中文名：  分子式：C16H21N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

調(diào)節(jié)活化蛋白   英文名稱：   Human Raes   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RAES  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  155405-80-4  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

甜菜堿含量測定試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di  106261-49-8  中文名：甲磺酸伊馬替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
120；7-氨基-4-甲基(AMC)  7-Amino-4-methylcoumarin   質(zhì)量規(guī)格：>97% 大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA檢測試劑盒RatDesmin,DesELISAKit 96T/48T

Duvelisib (IPI-145)  IPI-145 (INK1197)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的PI3K δ/γ抑制劑 人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒 Human MCP-2 ELISA kit

5--4-氯-3吲哚神經(jīng)鈉鹽  X-NeuNAc   質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國進(jìn)口 RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受體(PROGR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾  N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol  質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分 Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)500毫升

TTAC；十四烷基三甲基氯化銨  Tetradecyltrimethylammonium chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISA試劑盒小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DTAC；十二烷基三甲基氯化銨  Dodecyltrimethylammonium chloride(DTAC)  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit

CTAC;十六烷基三甲基氯化銨  CTAC  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA檢測試劑盒RatMyosinELISAKit 96T/48T

十八烷基三甲基氯化銨  Stearyl Trimethyl Ammoium Chloride(STAC)  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 Human MCP-1 ELISA kit

十烷基三甲基氯化銨  Decyltrimethylammonium chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99% RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit大鼠孕同受體(PROGR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

辛基三甲基氯化銨;八烷基三甲基氯化銨  Trimethyloctylammonium chloride   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)不含NaHCO3500毫升
7-AAD細(xì)胞活力染色液細(xì)胞尿激酶（UROKINASE）活性熒光定量檢測試劑盒

?基質(zhì)金屬1抑制劑

0.2摩爾基質(zhì)金屬2/9抑制劑卡托普利（captopril）

基質(zhì)金屬3抑制劑（NNGH）

膠原酶潛酶活化劑（APMA）

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))