狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            上海研生實業(yè)有限公司
            中級會員 | 第10年

            15201736385

            從原培養(yǎng)容器中分離細胞操作流程

            時間:2017/3/9閱讀:732
            分享:

            細胞系從基層迅速分離細胞,且保持細胞完整性的一般步驟。這一步驟并不意味著對于所有細胞系的廣泛應用,每一種系統(tǒng)*條件和施用濃度應該根據(jù)經驗加以確定。

            再次培養(yǎng)時檢測細胞的活性。

            細胞的活率應該超過90%

            對于無血清培養(yǎng)基,降低胰蛋白酶使用量。

            1. 移棄使用過的細胞培養(yǎng)基。

            2. 使用不包含有鈣鎂的平衡鹽溶液或EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid,乙二胺四乙酸.)清洗細胞系(看表確定正確的清洗溶液)。在培養(yǎng)瓶對著細胞的一面加入清洗溶液,通過轉動培養(yǎng)瓶1到2分鐘清洗細胞層,然后去除清洗液。

            3. 以2~3ml/25cm2的量,加選擇的分離液(見表)到培養(yǎng)瓶對著細胞的一面。確保分離液覆蓋細胞層。在37℃孵育培養(yǎng)瓶,輕輕搖動培養(yǎng)瓶。通常,在5到15分鐘內,細胞就會脫落。細胞分離需要的時間因細胞系不同而有所變化。仔細監(jiān)測細胞分離過程,避免細胞受損傷。對難于從培養(yǎng)瓶基層分離的細胞系,可以輕輕敲打,以加速分離過程。

            4. 當細胞*分離時,垂直放置培養(yǎng)瓶,讓細胞流到培養(yǎng)瓶的底部。在培養(yǎng)瓶中加入*培養(yǎng)基,通過移液管在單層細胞表面反復吹打來分散細胞。計數(shù)并再次培養(yǎng)細胞系。

            5. 對于無血清培養(yǎng)基,加入大豆胰蛋白酶抑制劑。通常使用1∶1(v∶v)0.25mg/ml胰蛋白酶抑制劑到胰蛋白酶中將抑制胰蛋白酶活性。

            會員登錄

            ×

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
            撥打電話
            在線留言