乙醇脫氫酶（ADH）是一種氧化還原酶，能夠催化醇類與醛類或酮類之間的相互轉(zhuǎn)化。 在人類和其他生物體中，ADH對(duì)于分解可能具有毒性的醇類物質(zhì)非常重要。在酵母菌和某些細(xì)菌中，ADH催化相反的反應(yīng)，并在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生酒精。BioAssay Systems的非放射性、比色法ADH檢測(cè)基于NADH偶聯(lián)的酶促反應(yīng)，將四氮唑鹽MTT還原為一種在565 nm處具有最大吸收峰的還原型MTT。在565 nm處的吸光度增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品醇脫氫酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 快速且靈敏。線性檢測(cè)范圍（20 ?L樣本）：30分鐘反應(yīng)時(shí)間為0.4至80 U/L，120分鐘反應(yīng)時(shí)間的檢測(cè)限為0.1 U/L。

- 便捷且高通量。均質(zhì)“混合-孵育-測(cè)量"型檢測(cè)?？奢p松在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上自動(dòng)化操作，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

- 生物樣本（如血漿、血清、尿液、組織和培養(yǎng)基）中乙醇脫氫酶活性的測(cè)定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）

- 檢測(cè)緩沖液：10 mL

- 二氫硫辛酸：120 ?L

- NAD溶液：1 mL

- 校準(zhǔn)液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

- 底物：1 mL（10%乙醇）

儲(chǔ)存條件

- 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分存于-20°C。

- 保質(zhì)期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作程序

- 本檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，向樣本中加入工作試劑應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。檢測(cè)可在任何所需溫度（例如25°C或37°C）下進(jìn)行。

樣本準(zhǔn)備

- 血清和血漿可直接檢測(cè)。

- 組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在約200 ?L含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液進(jìn)行檢測(cè)。

- 細(xì)胞裂解液：通過(guò)在4°C下以2,000 x g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在適當(dāng)體積的冷緩沖液中勻漿或超聲細(xì)胞，緩沖液中含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液進(jìn)行檢測(cè)。

- 所有樣本可在-20至-80°C下至少保存一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備

- 將試劑平衡至所需反應(yīng)溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試管。

- 工作試劑（WR）的配制：對(duì)于每次96孔檢測(cè)，將5 ?L底物、14 ?L MTT溶液、9 ?L NAD溶液、1 ?L二氫硫辛酸和55 ?L檢測(cè)緩沖液混合。

- 空白工作試劑（BWR）的配制：對(duì)于每次96孔檢測(cè)，將14 ?L MTT溶液、9 ?L NAD溶液、1 ?L二氫硫辛酸和60 ?L檢測(cè)緩沖液混合（即不加底物）。建議每次檢測(cè)前新鮮配制工作試劑。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如Corning Costar）、離心管和酶標(biāo)儀。

示例：

在室溫下，使用200 uM腺苷檢測(cè)了牛小腸來(lái)源的不同量的腺苷脫氨酶（ADA），檢測(cè)時(shí)間為30分鐘。

文獻(xiàn)參考：

1. Kato, S et. al. (1984). Improved assay for alcohol dehydrogenase activity in serum by centrifugal analysis. Clin. Chem. 30:1817-20.

2. Yoshida, A et. al. (1981). Enzymatic and Structural Differences between Usual and Atypical Human Liver Alcohol Dehydrogenases. J. Biol.Chem. 256: 12430-6.

3. Theorell, H et. al. (1969). On the effects of some heterocyclic compounds on the enzymic activity of liver alcohol dehydrogenase.Acta Chem. Scand. 23: 255-60.

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

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