腺苷脫氨酶（EC 3.5.4.4）是嘌呤代謝中的關(guān)鍵酶，在人類正常免疫功能中發(fā)揮重要作用。 腺苷脫氨酶（ADA）缺乏是重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）的原因之一，而在患有結(jié)核病和免疫相關(guān)疾病的患者中，ADA水平升高已被觀察到。BioAssay Systems的DADA-100試劑盒提供了一種便捷的熒光法檢測生物樣本中腺苷脫氨酶活性的方法。在此檢測中，釋放的氨與試劑發(fā)生反應(yīng)，熒光強度在λex/em = 415/475 nm處的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品腺苷脫氨酶測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

- 快速且安全。檢測可在50分鐘內(nèi)完成。非放射性檢測。

- 靈敏且準確。96孔板檢測的線性檢測范圍為0.3至30 U/L腺苷脫氨酶。

- 便捷且高通量。均質(zhì)“混合-孵育-測量"型檢測。可輕松自動化，每天可檢測數(shù)千個樣本。

應(yīng)用

- 用于定量檢測生物樣本中腺苷脫氨酶的酶活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

- 檢測緩沖液：4 mL 20 mM

- 標準品：50 uL

- 5 mM底物：200 uL

- 檢測試劑：5 mL

儲存條件

- 試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分存于-20°C。

- 保質(zhì)期：收到后6個月。

注意事項

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時應(yīng)遵循實驗室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。

操作程序

- 本檢測基于動力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑（WR）應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡短但充分。建議使用多通道移液器。檢測可在室溫下進行。

試劑準備

- 在檢測前，將所有組分平衡至室溫，并在打開前短暫離心試管。每次檢測運行應(yīng)新鮮配制工作試劑（WR）。

酶準備

- 酶應(yīng)在酶緩沖液中制備，例如200 mM磷酸鉀（pH 7.4）中含0.05%牛血清白蛋白（BSA）。以下協(xié)議針對牛小腸腺苷脫氨酶進行了優(yōu)化。如果使用其他酶，建議您通過實驗確定每孔使用的最佳酶量。

反應(yīng)準備

1. 將每個樣本的10 uL分別移至板的不同孔中。

2. 通過將每孔的2 uL 5 mM底物和40 ?L檢測緩沖液混合，為所有樣本孔準備足夠的工作試劑（WR）。

3. 通過向所有樣本孔中加入40 uL工作試劑（WR）啟動反應(yīng)。在室溫下孵育反應(yīng)30分鐘。

4. 向所有孔中加入50 uL檢測試劑。輕拍板以混合并孵育20分鐘。在λex/em = 415/475 nm處測量熒光強度。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如Corning Costar）、離心管和酶標儀。

示例：

在室溫下，使用200 uM腺苷檢測了牛小腸來源的不同量的腺苷脫氨酶（ADA），檢測時間為30分鐘。

文獻參考：

1. Xu, Z., Geng, L., Guo, L., Song, H., Pan, J., Shen, H., & Wang, S.(2022). Increased serum adenosine deaminase activity in patients with adult-onset Still's disease. BMC immunology, 23(1), 4.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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