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            蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            當(dāng)前位置:蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司>>生化試劑>>試劑盒>> 92-01-348NK細(xì)胞分選試劑盒

            NK細(xì)胞分選試劑盒

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)92-01-348

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地蘇州市

            更新時(shí)間:2025-03-06 13:30:04瀏覽次數(shù):1045次

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            NK細(xì)胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細(xì)胞懸液中分離未經(jīng)標(biāo)記的NK 細(xì)胞。非NK細(xì)胞(T細(xì)胞、DC 細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅系細(xì)胞)被生物素化的抗體和識(shí)別生物素的磁珠標(biāo)記通過去除這些非NK細(xì)胞,從而得到高純度的NK細(xì)胞。

            NK細(xì)胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細(xì)胞懸液中分離未經(jīng)標(biāo)記的NK 細(xì)胞。非NK細(xì)胞(T細(xì)胞、DC 細(xì)胞、B細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅系細(xì)胞)被生物素化的抗體和識(shí)別生物素的磁珠標(biāo)記通過去除這些非NK細(xì)胞,從而得到高純度的NK細(xì)胞。


            其分選原理為:用生物素結(jié)合的單克隆抗體混合物(作為一級(jí)標(biāo)記試劑)和與磁珠結(jié)合的抗生物素單克隆抗體(作為二級(jí)標(biāo)記試劑)對(duì)非靶細(xì)胞進(jìn)行間接磁性標(biāo)記。磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞在分選器的磁場(chǎng)中被保留在分選柱中,而未標(biāo)記的NK 細(xì)胞則通過分選柱流出。


            <strong>NK細(xì)胞分選試劑盒</strong>



            試劑和儀器要求

            緩沖液(pH7.2 PBS,0.5% BSA、2mM EDTA, 2~8℃)

            分選柱和分選器。

            (可選)熒光偶聯(lián)的抗體用于流式分析。

            (可選)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死細(xì)胞。

            (可選)死細(xì)胞清除試劑盒用于死細(xì)胞的清除。

            (可選)預(yù)分離過濾器去除細(xì)胞團(tuán)塊。


            操作步驟

            一、樣本準(zhǔn)備

            使用手動(dòng)方法或組織解離器制備脾臟單細(xì)胞懸液。


            二、磁珠標(biāo)記

            1.細(xì)胞計(jì)數(shù)。

            2.300xg離心10分鐘。去除上清。

            3.每107個(gè)細(xì)胞總量使用 40μL緩沖液重懸。

            4.每107個(gè)細(xì)胞總量添加 10μLNK細(xì)胞生物素抗體混合物。

            5.混勻,2-8℃孵育  5分鐘。

            6.每107個(gè)細(xì)胞加入 2mL緩沖液洗滌細(xì)胞,300xg離心10分鐘,去上清。

            7.每107個(gè)細(xì)胞添加 80μL 緩沖液。

            8.每107個(gè)細(xì)胞添加 20μL抗生物素磁珠。

            9.混勻,2-8℃孵育 10分鐘。

            10.(可選)添加染色抗體。

            11.進(jìn)行細(xì)胞分選步驟。


            三、細(xì)胞分選

            xM或xL分選柱進(jìn)行細(xì)胞分選

            1.將分選柱置于相對(duì)應(yīng)的分選器中。

            2.用適當(dāng)體積的緩沖液潤(rùn)洗分選柱(xM: 500 μL; xL: 3mL)

            3.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至分選柱中。收集含有未標(biāo)記細(xì)胞的流出液,即 NK細(xì)胞。

            4.加適量的緩沖液,收集總流出物,并與步驟 3中的流出液混合,這是NK細(xì)胞。( xM: 500 μL;xL: 3mL)

            5.(可選 )將分選柱從分選器中取出,并將其放在合適的收集管上。加適量的緩沖液到分選柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性標(biāo)記的非NK細(xì)胞。( xM: 1mL;xL: 5mL)

            儲(chǔ)存溫度

            2-8℃避光保存,請(qǐng)勿冷凍。有效期見試劑外標(biāo)簽。


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