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            伊萊博生物科技(上海)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            免疫沉淀實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌

            廠商性質(zhì)代理商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2023-10-30 16:41:01瀏覽次數(shù):790次

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            免疫沉淀法是一種研究蛋白質(zhì)間交互作用的生物技術(shù),這種技術(shù)是將蛋白質(zhì) 視為抗原,并利用抗體與之進(jìn)行特異性結(jié)合的特性,來(lái)進(jìn)行研究。上海伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗(yàn),多年的免疫沉淀實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)的經(jīng)驗(yàn),為廣大藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)提供保障。

            詳細(xì)信息:

            1.  表面標(biāo)記或生物合成標(biāo)記的細(xì)胞在裂解緩沖液中于4℃放置1 h 后,再于4℃3 000 g 離心10 min 除去細(xì)胞核,然后將所得上清在10000 g 離心1 min。

             2.  一次性對(duì)上清進(jìn)行預(yù)處理,每200 μl 上清加入10 μl 活化后被淬滅的瓊脂糖對(duì)照。在旋轉(zhuǎn)揺床中室溫?fù)e蕩2 h 或在4℃過(guò)夜。200 g 離心1 min,保留上清。

             3.  在1.5 ml 的微量離心管中加滿裂解液室溫作用10 min,對(duì)其進(jìn)行預(yù)包被。吸去液體后,加入105~106 cpm 的含抗原的放射性標(biāo)記上清,加稀釋緩沖液使終體積為200 μl。 

            4.  加入10 μl 1:1的抗體-Sepharose偶聯(lián)物膠漿/稀釋緩沖液。4℃在旋轉(zhuǎn)搖床中搖蕩1. 5~3 h,一直保持Sepharose呈混懸狀。

            5.  Sepharose偶聯(lián)物依次用1 ml 下面列出的緩沖液洗滌。毎次洗完后,200 g 離心5 min 或微量離心5 s。以細(xì)頭的巴斯德吸管小心吸去上清,僅在沉淀的上面留10 μl 的液體。在第4次洗滌后,離心甩下管壁所有殘余液滴并將其吸去,沉淀上僅留下約 10 μl。

            6.   加入20~50 μl SDS樣品緩沖液。由于樣品緩沖液比重大于洗滌緩沖液,它可滲透到Sepharose中,不要用旋渦混合器旋起SEpharose,以免使之粘附在緩沖液液面以上的管壁。蓋緊蓋子,于100℃保溫5 min。

            7.  用旋渦混合器混勻,200 g 離心或微量離心5 s。將上清加樣于凝膠以SDS-PAGE分析,使用增感屏進(jìn)行放射自顯影或熒光自顯影或檢測(cè)標(biāo)記蛋白質(zhì)。

            伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實(shí)驗(yàn)操作人員團(tuán)隊(duì),核心成員來(lái)自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國(guó)內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢與服務(wù)。

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