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            北京諾博萊德科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第1年

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            當(dāng)前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>WB整體解決方案>>顯色與信號(hào)檢測(cè)>> P9900West Femto ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色與信號(hào)檢測(cè)

            West Femto ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色與信號(hào)檢測(cè)

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)P9900

            品       牌NobleRyder/諾博萊德

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地北京市

            更新時(shí)間:2025-03-10 11:00:36瀏覽次數(shù):36次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2*12.5mL/2*50mL
            貨號(hào) P9900 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥
            主要用途 用于辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光底物
            WestFemto 最高靈敏度底物是用于辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光底物
            West Femto ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色與信號(hào)檢測(cè)


            West Femto ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色與信號(hào)檢測(cè)

            產(chǎn)品介紹:
            WestFemto 最高靈敏度底物是用于辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光底物
            本產(chǎn)品特點(diǎn):
            1、 靈敏—使用適當(dāng)?shù)囊豢购投箷r(shí),可在硝化纖維膜或 PVDF 膜上檢測(cè)豐度為飛克級(jí)的蛋白條帶
            2、定量—所得信號(hào)的可定量檢測(cè)范圍跨越兩個(gè)數(shù)量級(jí)。 • 明亮信號(hào)—通過(guò)膠片或成像系統(tǒng)進(jìn)行曝光,易于捕獲圖像。
            3、長(zhǎng)信號(hào)持續(xù)時(shí)間—優(yōu)化條件下,可檢測(cè)的光信號(hào)輸出長(zhǎng)達(dá) 8 小時(shí)。
            4、穩(wěn)定試劑—試劑盒組分能夠在 4°C 條件下穩(wěn)定放置一年,在室溫下可穩(wěn)定放置6 個(gè)月。
            5、價(jià)格經(jīng)濟(jì)—配方經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可適用于濃度極低的抗體檢測(cè)。
            6、1ng至0.2μg/mL 一抗(以1μg/mL 儲(chǔ)存液稀釋 1:5,000 至 1:100,000 倍)
            7、 2ng至10ng/mL 二抗(以1μg/mL 儲(chǔ)存液稀釋 1:100,000 至 1:500,000 倍) 當(dāng) West Femto 底物與優(yōu)化的抗體濃度和封閉緩沖液配合使用時(shí),可檢測(cè)到常規(guī) ECL 底物無(wú)法檢 測(cè)的低豐度靶標(biāo)蛋白。
            使用方法:
            注:優(yōu)化抗原和抗體的濃度。必須使用建議的抗體稀釋度,以保證陽(yáng)性結(jié)果。有關(guān)建議的稀釋度范 圍請(qǐng)參考其他所需材料。
            1) 將一抗?jié)舛认♂尩?1ng 至 0.2μg/mL(以 1μg/mL 儲(chǔ)存液稀釋 1:5,000 至 1:100,000 倍) 2) 將二抗?jié)舛认♂尩?2ng 至 10ng/mL(以 1μg/mL 儲(chǔ)存液稀釋 1:100,000 至 1:500,000 倍) 3) 將兩種底物組份按 1:1 比例混合,制備底物工作液。 注:暴漏于日光或任何其他強(qiáng)光可能損害工作液,為獲得優(yōu)良結(jié)果,將此工作液保存在琥珀色瓶中, 并避免長(zhǎng)期暴漏于任何強(qiáng)光。短時(shí)間暴漏于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)照明不會(huì)損害該工作液。
            4) 將印跡膜在 WestFemtoECL 底物工作液中孵育5分鐘。
            5) 吸出多余試劑。用清潔的塑料膜蓋住該印跡膜。
            6) 使印跡膜在 X 光膠片上曝光。
            蛋白印跡法詳細(xì)操作步驟
            1) 將印記膜從蛋白轉(zhuǎn)印設(shè)備中取出,加入合適的封閉液在溫室下孵育 20-60 分鐘,同時(shí)振蕩。以封閉膜上非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)。 請(qǐng)注意:使用在前文建議的抗體稀釋度是非常重要的。
            2) 將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育 1 小時(shí),同時(shí)振蕩;或在 28℃孵育過(guò)夜,不振蕩。
            3) 將足量的洗滌緩沖液加至膜上,保證緩沖液將膜wan全覆蓋。振蕩孵育≥5 分鐘,更換洗滌緩沖液 并重復(fù)該步驟 4-6 次。增加洗滌緩沖液體積,洗滌次數(shù)和洗滌時(shí)間有助于降低背景信號(hào)。 注:孵育前,膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會(huì)提高洗滌效率。 請(qǐng)注意:使用在前文建議的 HRP 標(biāo)記二抗稀釋度是非常重要的。
            4) 將 HRP 標(biāo)記的二抗工作液與膜在溫室孵育1小時(shí),同時(shí)振蕩。
            5) 重復(fù)步驟3,以除去未結(jié)合的HRP 標(biāo)記二抗。 注:膜與HRP標(biāo)記二抗孵育后必須進(jìn)行che底洗滌。
            6) 將A溶液與B液等比例混合,制備成工作液。每cm2膜使用 0.01~0.1ml 工作液。工作液可以 在溫室下穩(wěn)定 8 小時(shí)。 注:暴漏雨日光或任何其他強(qiáng)光下可能損害工作液,為獲得嘴角結(jié)果,將此工作液保存在琥珀色瓶中,并避免長(zhǎng)期暴漏雨任何強(qiáng)光。實(shí)驗(yàn)室的常見(jiàn)照明不會(huì)損害工作液。
            7) 將印記膜在工作液中孵育5分鐘。
            8) 從工作液中取出印記膜,并置于一個(gè)塑料片或清潔的塑料紙(膜)中,用一張吸水紙吸除多余 的液體,并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡。
            9) 將包在塑料紙(膜)中的印記膜置于膠片暗盒中,蛋白質(zhì)面朝上,除適用于膠片曝光的燈(如 紅色安全燈)之外,關(guān)閉所有的燈。
            注意:膠片必須在曝光期間保持干燥,為獲得優(yōu)良效果,采取以下措施:
            * 確保將多余的底物從膜和塑料紙上wan全去除。
            * 在整個(gè)膠片處理期間,使用手套。
            * 切莫將印記膜置于已顯影的膠片上,因?yàn)槟z片上的化學(xué)物質(zhì)會(huì)減弱信號(hào)。
            10) 將X光膠片置于膜的上面。建議第一次曝光 60 秒。之后可調(diào)整曝光時(shí)間以達(dá)到優(yōu)良結(jié)果?;瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前 5-30 分鐘期間是zui強(qiáng)烈的。這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個(gè)小時(shí),但強(qiáng)度會(huì)隨時(shí)間下降,如有底物孵育后較長(zhǎng)時(shí)間后曝光,曝光時(shí)間可能需要延長(zhǎng)以獲得較強(qiáng)信號(hào)。如果使用 磷光存儲(chǔ)成像設(shè)備(如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng))或CCD 照相機(jī)可能需要較長(zhǎng)的曝光時(shí)間。
            注意:膠片與膜之間的任何移動(dòng)可能在膠片上造成人為的非特異信號(hào)。 11) 使用合適的顯影劑和定影劑對(duì)膠片進(jìn)行顯影。如果信號(hào)太強(qiáng),則縮短曝光時(shí)間或?qū)⒂∮浤みM(jìn)行 剝離并降低抗體濃度重新檢測(cè)。
            重要提示:
            1、為獲得優(yōu)良效果,必須優(yōu)化該系統(tǒng)的全部組分,包括樣品量、一抗和二抗?jié)舛纫约澳ず头忾]試劑的類型。
            2、使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色 HRP 底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次 系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析。
            3、沒(méi)有一種封閉試劑對(duì)所有系統(tǒng)而言都是優(yōu)良的,所以為每一個(gè)免疫印跡檢測(cè)系統(tǒng)找到最合適的 封閉緩沖液非常必需。封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性。當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加 的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng)。
            4、使用親和素/生物su檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕D讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物su,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào)。
            5、保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中 印跡膜wan全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的 信號(hào)。
            6、為獲得優(yōu)良效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床。
            7、 將 Tween20(終濃度 0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào)。使用高品質(zhì)的產(chǎn)品,如去污劑。它保存在安瓿中,過(guò)氧化物和其他雜質(zhì)含量很低。
            8、不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑。疊氮鈉是 HRP 的抑制物。
            9、避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子。
            10、所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì)。金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡。銹跡可能導(dǎo) 致斑點(diǎn)形成和高背景。
            11、底物工作液在室溫下可穩(wěn)定8小時(shí)。日光或任何其他強(qiáng)光下可能損害底物,為獲得優(yōu)良結(jié)果,將底物工作液保存在琥珀色瓶中,并避免長(zhǎng)期暴漏在任何強(qiáng)光下,短時(shí)間暴漏于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)照明不會(huì)損害該工作液。

            West Femto ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色與信號(hào)檢測(cè)

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