NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：G9270

產(chǎn)品名稱(chēng)：抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

產(chǎn)品規(guī)格：4*10ml/4*20ml

抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 酶類(lèi)染色

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱(chēng)：抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒

英文名稱(chēng)：Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit

規(guī)格：4*10ml ; 4*20ml

儲(chǔ)存條件：-20℃，避光保存，有效期3個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit產(chǎn)品介紹

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，所以常作為溶酶體標(biāo)志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi)。各種動(dòng)物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5-5.5。存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞和白血病人脾臟的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resist n t acid phosphatase，TRAP)均在細(xì)胞濾泡中，并不是釋放入血液。血液中的TRAP絕大多數(shù)來(lái)源于破骨細(xì)胞，因此可以通過(guò)測(cè)量血液中的TRAP了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中，若細(xì)胞內(nèi)的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽(yáng)性反應(yīng)。該染色液可用于新鮮血涂片、細(xì)胞涂片，亦可用于冰凍切片、石蠟切片。

自備材料：

蒸餾水、恒溫箱、載玻片、光學(xué)顯微鏡

操作步驟：(僅供參考)

(一) 樣本處理：

1、細(xì)胞涂片：取新鮮全血或骨髓制備涂片，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細(xì)胞滴液的正前方， 稍往后移與血液或細(xì)胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng)至均勻鋪 開(kāi)為止，自然晾干。

2、貼壁培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞爬片：吸去培養(yǎng)基，1×PBS清洗3-4次，瀝去多余水分。取出細(xì)胞爬片。

3、冰凍切片：從冰箱取出放置恢復(fù)室溫，浸入蒸餾水清洗1-2min，瀝去多余水分。

4、石蠟切片：石蠟切片脫蠟5-10min，重復(fù)一次。無(wú)水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸餾 水浸洗2min，瀝去多余水分。

(二) 染色孵育：

1、使用2-8℃預(yù)冷的TRAP固定液固定30s-3min，多數(shù)情況下30-60s即可。

2、蒸餾水洗，瀝去多余水分(不宜過(guò)分干燥)。

3、（切片處理）滴加TRAP孵育液覆蓋切片，置于濕盒內(nèi)37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

4、（貼壁細(xì)胞）滴加 TRAP孵育液覆蓋細(xì)胞，置于37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

5、復(fù)染：蘇mu素或甲基綠復(fù)染液染色2-3min。如選用蘇mu素染色液復(fù)染，染色后須自來(lái)水返藍(lán)10min 或1×PBS返藍(lán)3-5min。

(三) 封片觀察：

1、（切片處理）蒸餾水稍洗，瀝去多余水分，滴加水性封片劑封片后鏡檢觀察。

2、（貼壁細(xì)胞）蒸餾水稍洗，可帶水或1×PBS鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

1、該染色試劑盒為酶活原位染色試劑盒，常用于破骨細(xì)胞細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)后細(xì)胞鑒定和組織中特定細(xì)胞定位，反應(yīng)底物和染料易失效，收到產(chǎn)品后建議第一時(shí)間根據(jù)說(shuō)明書(shū)描述溫度妥善保存。

2、試劑B2為偶氮染料儲(chǔ)備液，有顆粒狀懸浮物屬正?，F(xiàn)象不影響染色。如擔(dān)心，預(yù)混合B1和B2可使 顆粒物wan全溶解，但需在2小時(shí)內(nèi)使用完畢。

3、酶活易受多種因素影響導(dǎo)致衰減或消失。建議樣本新鮮取材，使用預(yù)冷固定液在2-8℃冰箱固定，時(shí)間不宜超過(guò)24h。包埋時(shí)推薦使用低熔點(diǎn)蠟（52-56℃），避免熱失活。

4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒 酶類(lèi)染色 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

NobleRyder G9270 抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒，Tartrate-Resistant Acid Phosphatase(TRAP) Stain Kit 4*10ml/4*20ml