輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)定試劑盒(分光光度法）

分光光度法 50 管/24 樣

輔酶ⅡNADP含量測(cè)定試劑盒分光光度法氧化

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。

測(cè)定原理：

DAO 催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺，在 460nm 處有特征吸收峰，通過測(cè)定該波長吸光度增加速率，計(jì)算 DAO 活性。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿、蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml

提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 20min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3、血清等液體：直接測(cè)定。

測(cè)定步驟：

混勻，37℃水浴 30min，1ml 玻璃比色皿，對(duì)照管調(diào)零，測(cè)定 A460

輔酶ⅡNADP含量測(cè)定試劑盒分光光度法氧化