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Gibco胎牛血清價格，物美價廉，量大從優(yōu)，部分gibco胎牛血清*銷售。
GIBCO胎牛血清價格 貨號：10099-141 原裝現(xiàn)貨
上海琛藝實業(yè)有限公司主營品牌：BI品牌，Gibco品牌， Bovogen品牌，hyclone品牌，ATCC品牌，Sigma品牌，abcam品牌，CST品牌，PAA品牌，PAN品牌。
主營：進(jìn)口胎牛血清，gibco10099-141胎牛血清，gibco10091-148胎牛血清，gibco10270-106胎牛血清，小牛血清，胰酶，雙抗，細(xì)胞系，代購ATCC原代細(xì)胞，sigma人AB血清。(需要提供海關(guān)報關(guān)單等相關(guān)事宜，請咨詢本公司)
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Gibco胎牛血清使用方法
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實驗的結(jié)果，我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。
Gibco胎牛血清保存方法
1、需要長期保存的Gibco牛血清，例如Gibco南美胎牛血清，必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)Gibco牛血清有懸浮物,例如Gibco北美胎牛血清中發(fā)現(xiàn)有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
3、瓶裝Gibco胎牛血清南美解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
5、血清中的沉淀物和絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。
GIBCO胎牛血清價格 貨號：10099-141 原裝現(xiàn)貨
Gibco胎牛血清使用中遇到的常見問題總結(jié)
一、血清滅活問題。
1、問：加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎？
答：不是必須的，看做什么實驗了，我在使用Gibco南美血清10270106的時候，都不滅活。
2、問：Gibco胎牛血清新西蘭(Gibco新西蘭血清10091148)滅活是56℃ 30分鐘嗎？
答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞，血清一般是不需要滅活的，例如經(jīng)常使用Gibco新西蘭胎牛血清，是不用熱滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞，血清是需要滅活，一般是56℃，30min。
3、問：我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)，Gibco北美胎牛血清要滅活嗎？
答：一般的細(xì)胞培養(yǎng)中使用到的Gibco胎牛血清，例如Gibco ES胎牛血清是不用滅活的。如果一定需要滅活，可以直接購買Gibco胎牛血清澳洲熱版本，進(jìn)口Gibco澳洲胎牛血清熱滅活的一般都已滅活。滅活的Gibco血清價格一般比未滅活的Gibco血清價格要高很多。
4、問：我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞，培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因為血清中可能有些補體和抗體，是不是會影響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結(jié)合，影響轉(zhuǎn)染，正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞，病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時，目的是什么？
答：血清一定要滅活，可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結(jié)合過程的干擾，一般是2-6小時，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活，滅活的目的是將血清中的補體滅活！這要根據(jù)實際情況而定，如果沒有把握那就滅活吧，也不麻煩56度半個小時。
5、問：(1)我買的是Gibco胎牛血清北美，要滅活嗎？有些說法是需要，有些說直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有關(guān)系嗎？
答：關(guān)于血清的熱滅活，是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數(shù)實驗室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行，因為有兩個作用，是滅活補體，第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響。
我在實驗室處理Gibco胎牛血清新西蘭的時候，有一次水浴箱在滅活過程中出現(xiàn)故障，溫度升高到80℃，血清變成了凝膠狀，我重新處理了另外一份Gibco胎牛血清南美，將兩份血清對比，發(fā)現(xiàn)高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時以上，肯定也會對里面的蛋白起到破壞作用。下次有機(jī)會我做個延長滅活時間的實驗試試，看看到底有多大的影響。熱滅活之后，血清放在四度冰箱久了，就會有沉淀產(chǎn)生，這常常會被認(rèn)為是微生物污染或者是黑膠蟲污染。為了驗證到底有沒有污染，常常又會把血清放置37℃溫育，但是血清中的蛋白會進(jìn)一步析出，后還是要做鏡檢，無菌培養(yǎng)試驗，和革蘭氏染色試驗，非常麻煩。
我看過一份資料，里面提到70%的實驗者認(rèn)為滅活是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時間則從15分鐘到60分鐘不等。其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高，許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立，只有少數(shù)對血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。有人比較過11個不同細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6 個細(xì)胞株(HBAE，MDBK，Vero，成纖維細(xì)胞，MRC-5)的生長帶來負(fù)面影響，三個細(xì)胞株(FOX-NY，MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響，而只有兩個細(xì)胞株(Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid)，在熱滅活之后，細(xì)胞生長有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對細(xì)胞的生長沒有明顯的促進(jìn)作用。
你可以摸索一下，Gibco北美血清16000044從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍，然后混勻分裝成兩份，一份滅活，一份不滅活，比較這兩種Gibco北美血清對細(xì)胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個過程多也就一個星期。同時你還要考慮血清滅活與否對你后續(xù)的實驗有沒有影響。
問：(2)分裝后的Gibco澳洲血清10099141血清從-20℃取出放4℃讓其液化，卻見Gibco澳洲血清10099141血清比較混濁，有沉淀產(chǎn)生，這屬正常嗎？
答：正常。
上海琛藝實業(yè)常備*gibco胎牛血清；以及bi胎牛血清：GIBCO 10099-141;GIBCO16000-044;GIBCO10091-148;gibco10270-106等，Hyclone胎牛血清 HycloneSV30087.01.;Hyclone SV30087.02;HycloneSH30068.03;
HycloneSH30406.01等。。。
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