BI胎牛血清的詳細(xì)制備過(guò)程  BI授權(quán)經(jīng)銷商

Biological Industries（BI）成立于1981年，是的以色列生物科技公司，其產(chǎn)品與服務(wù)在以色列的生命科學(xué)研究與生物技術(shù)市場(chǎng)中占有主導(dǎo)地位，并銷往35個(gè)國(guó)家。BI主要包括：胎牛血清、特殊加工工藝血清、干細(xì)胞血清、干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑、人類核型分析培養(yǎng)基、支原體預(yù)防檢測(cè)及處理試劑、分子生物學(xué)等相關(guān)產(chǎn)品。

一、目的:

為了保障BI胎牛血清產(chǎn)品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性，制定以下操作方法，以規(guī)范胎牛血清生產(chǎn)制備。

二、操作方法：

（一）采血

1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛，經(jīng)剖腹獲取小牛。

2、將小牛清洗干凈后，側(cè)放在萬(wàn)級(jí)潔凈房間內(nèi)的采血臺(tái)上，固定四肢及頭部。

3、用來(lái)蘇水清洗心臟外部，刮去心臟外部牛毛，露出心臟外部一側(cè)皮膚，用2%碘酒擦拭消毒。

4、在心臟部位切開(kāi)一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，用止血鉗夾住血管，切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管，插好管后打開(kāi)血管的止血鉗，讓牛血順采血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的采血瓶中。

5、采血瓶采血前經(jīng)干烤滅菌（180℃ 2小時(shí)）后，按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動(dòng)瓶?jī)?nèi)生理鹽水，使其充分濕潤(rùn)瓶壁后倒出，再進(jìn)行采血并加塞封口。將采血后的采血瓶放37℃ 恒溫室2小時(shí)，再放入4℃冷庫(kù) 4小時(shí)以備離心。

（二）離心

將準(zhǔn)備好的采血瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后，對(duì)稱放入離心機(jī)，按1800轉(zhuǎn)/分鐘 離心50分鐘后，放入4℃冷庫(kù)備用。

（三）抽血清

取出4℃冷庫(kù)離心好的采血瓶，注意輕抬輕放，以免將下層血kuai和血清混層。將經(jīng)過(guò)高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器，再接到壓縮機(jī)抽氣口上。打開(kāi)壓縮機(jī)，用抽血清孔的管子輕輕抽取采血瓶?jī)?nèi)的上清液，注意控制好抽管，避免抽到下層血kuai。將抽好的血清分裝，即為粗制胎牛血清，放入-20℃冷庫(kù)冷藏備用。

• 血清過(guò)濾

1、將-20℃冷庫(kù)內(nèi)的粗制血清取出化凍。

2、將化凍后的粗制血清用經(jīng)過(guò)高壓滅菌的12層醫(yī)用脫脂棉紗布進(jìn)行初濾。

3、把初濾后的血清倒入大罐進(jìn)行混合。

4、將裝好濾芯的濾器做密封性試驗(yàn)和發(fā)泡試驗(yàn)合格后，經(jīng)過(guò)高壓滅菌，在潔凈室內(nèi)用無(wú)菌操作法將濾器按濾柱孔徑由大到小的順序進(jìn)行組裝，并裝上壓力表。把濾器大孔徑一端和蠕動(dòng)泵出口進(jìn)行連接。

5、用蠕動(dòng)泵將大罐內(nèi)的血清送入濾器進(jìn)行過(guò)濾。

6、將濾出的血清在百級(jí)凈化操作臺(tái)上進(jìn)行分裝后，即為精制胎牛血清，送-20℃冷庫(kù)儲(chǔ)存。

三、注意事項(xiàng)：

1、在操作過(guò)程中，要經(jīng)常用75%的酒精對(duì)手部進(jìn)行消毒，同時(shí)避免接觸牛血或血清，特別是有傷口的部位，以免感染。

2、在采血插管過(guò)程中，插管避免接觸到未消毒的部位，盡量深入血管，使牛血能快速流完為好，并固定好插管，避免脫離動(dòng)脈血管。

3、在抽血清的過(guò)程中，控制好壓縮機(jī)的壓力大小，避免壓力過(guò)大，抽到下層的沉淀物。

4、在過(guò)濾過(guò)程中，控制好壓力的大小，避免超過(guò)濾柱工作壓力。

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