ELISA試劑盒能否直接用來檢測血清

只要是ELISA試劑盒就可以用來直接檢測血清，這種說法合理嗎？

據(jù)了解，有些ELISA試劑盒對血清和血漿樣本的檢測效果不好，表現(xiàn)在光值偏低，如RF因子存在的話，光值偏高，需要特別的試劑才能消除影響。

如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，那么只要用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測指標蛋白加入PBS緩沖液中同時檢測對比，即可知道該試劑盒是否可以直接用來測血清血漿樣本。

如廠家提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，ELISA試劑盒可用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣，也可得出結果。

ELISA試劑盒檢測對于實驗要求

方面一：檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。

方面二：使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。

方面三：仔細閱讀說明書嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。

方面四：洗滌*

洗板不*，酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性。

方面五：嚴控反應時間

反應時間過長，酶失活；反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

方面六

注意ELISA試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。

方面七：評估試劑的實用性

試劑的穩(wěn)定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗。

顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少，易ELISA試劑盒出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果。

方面九：加樣要準確、快速

如果加樣不準確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關，所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗，如果加樣遲緩，便出現(xiàn)誤差，而且ELISA試劑盒試劑長時間暴露在外，尤其室溫過高時，保存期會縮短甚至失效。

標簽： elisa試劑盒用多少血清