PAN胎牛血清 ST30-3302暑期*
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上海琛藝生物科技有限公司主營品牌:BI品牌,Gibco品牌,SERANA品牌,Bovogen品牌,hyclone品牌,ATCC品牌,Sigma品牌,abcam品牌,CST品牌,SBI品牌,PAA品牌,PAN品牌。
主營:進口胎牛血清,gibco10099-141胎牛血清,gibco10091-148胎牛血清,小牛血清,胰酶,雙抗,細胞系,代購ATCC原代細胞,gibco羊水培養(yǎng)基(貨號:11269-016),sigma人AB血清。(需要提供海關報關單等相關事宜,請咨詢本公司)
PAN胎牛血清 ST30-3302暑期*
德國PAN公司的優(yōu)級胎牛血清是經(jīng)過嚴格工藝篩選出來的優(yōu)級系列,嚴格的質量控制,批間差異較小,質量穩(wěn)定性好,內(nèi)毒素含量低,無病毒、支原體,具有較高安全性。細胞培養(yǎng)測試顯示多種細胞系更好的生長特性,適用于品種繁多的細胞培養(yǎng)。
德國PAA/PAN胎牛血清詳細描述:
1)內(nèi)毒素含量極低<1UI/ml(規(guī)定:特級胎牛血清<10 UI/ml),極利于細胞的生長和傳代
2)具有歐洲藥品監(jiān)督委員會(EDQM)頒發(fā)的產(chǎn)品證書,符合歐洲藥典第1483條規(guī)定
3)GMP條件下生產(chǎn),具有質量認證體系證書
4)每個批號血清均具有完整的檢驗報告
5)三次0.01 μm無菌過濾處理
6)進行細菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求
7)可按客戶要求用γ射線照射
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6)進行細菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求
7)可按客戶要求用γ射線照射
PAN胎牛血清使用方法
在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,常使用的PAN胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結果,我們在實驗中使用10%的PAN澳洲胎 牛血清培養(yǎng)293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的PAN胎牛血清南美或者20%的PAN胎牛血清,要根據(jù)具體 細胞選擇合適的PAN胎牛血清濃度。
PAN胎牛血清FBS保存方法
1、需要長期保存的PAN牛血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血 清中的有效成分會被破壞,而影響血清質量。如果一次無法用完一瓶,可 將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留 一 定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接 過濾血清。
3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全 部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程 中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度 與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而 出現(xiàn)沉淀。
4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體 成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉 淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體 參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞 發(fā)生化學趨化和活化。
5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身 的質量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下 "小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物 的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑 點不會影響細胞生 長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
PAN胎牛血清使用中遇到的常見問題總結
一、血清滅活問題。
1、問:加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?
答:不是必須的,看做什么實驗了。
2、問:PAN胎牛血清滅活是56℃ 30分鐘嗎?
答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細胞,如內(nèi)皮細胞,血清是 需要滅活,一般是56℃,30min。
3、問:我要做滋養(yǎng)細胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎?
答:進口的一般都已滅活,國產(chǎn)的不一定,還是滅活一下再用較安全。
4、問:我用病毒上清轉染細胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影 響轉染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響 轉染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞, 病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時,目的是什么?
答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主 結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據(jù)細胞的狀態(tài)決定。血清不一定需 要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活 !這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
琛藝實業(yè)常備*BI胎牛血清;PAN胎牛血清ST30-3302以及GIBCO胎牛血清:GIBCO 10099-141;
GIBCO16000-044;GIBCO10091-148
Hyclone胎牛血清 HycloneSV30087.01.;Hyclone SV30087.02;HycloneSH30068.03;
HycloneSH30406.01等。。。
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