人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒使用說明書
人ELISA試劑盒操作如下
我們是國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒上海,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分ELISA試劑盒*,買十送一
上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司涉足新的生物領(lǐng)域ELISA試劑盒,ELISA試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,牛,羊,兔,植物,農(nóng)殘類,魚類等。
可以檢測(cè):血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清,細(xì)胞裂解液,腹腔液,尿液,腦髓液,唾液,糞便等液體
酶標(biāo)板:96孔板和48孔板
試劑盒組成:酶標(biāo)包被板、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等試劑
樣本收集:用普通離心管均可。
檢測(cè)應(yīng)用:人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒使用說明書
操作檢測(cè)樣品的定性定量分析
英文名稱:Human Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
試劑盒用于:實(shí)驗(yàn)室研究使用。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),正常情況下當(dāng)天就能出庫(kù)
人熱休克蛋白ELISA試劑盒操作分多次次用,做幾次標(biāo)曲?
答:可以再設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔;如果設(shè)立雙標(biāo)準(zhǔn),可以做三次;如果設(shè)定單標(biāo)準(zhǔn),可以做6次
用不完的試劑盒如何保存:
答:板條和板架都是可拆卸的,拆下放置錫箔袋或其他無污染的袋子, 放到冰箱 2-8度保存,
ELISA檢測(cè)試劑盒采用方法:雙抗夾心法
人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒使用說明書-elisa免費(fèi)代測(cè)試劑盒組成:
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 2 | 酶標(biāo)試劑 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 4 | 樣品稀釋液 |
5 | 顯色劑A | 6 | 顯色劑B |
7 | 終止液 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品 |
9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 10 | 說明書 |
11 | 封板模 | 12 | 密封袋 |
注:僅用于科研,不得用于臨床
客戶常見問題;
1,代測(cè)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) ?
答:凡是在本公司購(gòu)買都是免費(fèi)待測(cè)的。
本公司提供elisa試劑盒代測(cè)免費(fèi)服務(wù)
特色服務(wù); 提供代測(cè)服務(wù),同城可送貨上門
樣本收集:血液,尿液,腦脊液,胸腹水,血漿等。
保存:待測(cè)樣本4° 隔天檢測(cè)分裝后凍存-20°(-70°)
有限期:6個(gè)月
2:不同批號(hào)的可以一起用么?
答:不同批號(hào)的是不可以混用的
3 ELISA實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間不同是由什么決定的?
答:抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37℃ 2h~3h達(dá)到高峰。時(shí)間太短,敏感性下降,時(shí)間太長(zhǎng),吸附的抗原或復(fù)合物(在這個(gè)溫度下)可能脫落。酶底物反應(yīng)時(shí)間的確定:一般采用15min~30min~45min。也可以標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清為準(zhǔn),隨時(shí)測(cè)定其OD值,當(dāng)達(dá)到規(guī)定的OD值時(shí),即終止反應(yīng)
。
4顯色淡,靈敏度偏低可能原因及解決方法?
我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)時(shí),常會(huì)遇到度偏低的問題,以下是根據(jù)不同問題可能原因及其防止方法總結(jié),僅供參考:
可能原因及防止方法:
1.孵育反應(yīng)時(shí)間不足
定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)
2.洗滌時(shí)沖擊力太大,洗滌液浸泡時(shí)間太長(zhǎng),洗滌次數(shù)增加
減少洗滌沖擊力,按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)
3.顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入
滴加顯色液時(shí),滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,反加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
4.顯色劑反應(yīng)時(shí)間不足
準(zhǔn)確定時(shí)
5.蒸餾水水質(zhì)有問題
測(cè)定蒸餾水配制試劑對(duì)酶免疫法的影響
6.試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高
試劑盒置保溫箱內(nèi)運(yùn)輸,并放足夠數(shù)量的冰塊,盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間
7.試劑、樣品用前未能平衡
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右。
8.樣品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反應(yīng)
樣品不能加 NaN 3 防腐
9.試劑盒超過有效期
超過效期試劑盒不要使用
10.試劑開啟時(shí)間過長(zhǎng)長(zhǎng)菌
試劑開啟后請(qǐng)盡量在短時(shí)間內(nèi)用完
11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔
校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快,排放應(yīng)*。吸頭內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
12.恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃)
放入反應(yīng)板時(shí)注意培養(yǎng)箱溫度,及時(shí)調(diào)整,孵育反應(yīng)期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。
一般ELISA試劑盒洗滌液中的非離子
ELISA試劑盒就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來??梢哉f在ELISA試劑盒操作中,洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA試劑盒儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,
(1)浸泡式a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;e.重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時(shí),可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
(2)流水沖洗式流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續(xù)沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
標(biāo)簽:elisa試劑盒上海;國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒;elisa試劑盒包裝
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