品牌：PAN

貨號：ST30-3302 PAN胎牛血清*

規(guī)格：500ml

保存條件：-20

血清來源：南美

用途：細(xì)胞研究

供應(yīng)商：琛藝實(shí)業(yè)  ST30-3302有現(xiàn)貨，有現(xiàn)貨哦~~~~

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司限公司主營品牌：BI品牌，Gibco品牌，SERANA品牌，Bovogen品牌，hyclone品牌，ATCC品牌，Sigma品牌，abcam品牌，CST品牌，SBI品牌，PAA品牌，PAN品牌。
主營：進(jìn)口胎牛血清，gibco10099-141胎牛血清，gibco10091-148胎牛血清，小牛血清，胰酶，雙抗，細(xì)胞系，代購ATCC原代細(xì)胞，gibco羊水培養(yǎng)基（貨號：11269-016），sigma人AB血清。（需要提供海關(guān)報(bào)關(guān)單等相關(guān)事宜，請咨詢本公司）

德國PAN公司的優(yōu)級胎牛血清是經(jīng)過嚴(yán)格工藝篩選出來的優(yōu)級系列，嚴(yán)格的質(zhì)量控制，批間差異較小，質(zhì)量穩(wěn)定性好，內(nèi)毒素含量低，無病毒、支原體，具有較高安全性。細(xì)胞培養(yǎng)測試顯示多種細(xì)胞系更好的生長特性，適用于品種繁多的細(xì)胞培養(yǎng)。

德國PAA/PAN胎牛血清詳細(xì)描述：

1）內(nèi)毒素含量極低<1UI/ml（規(guī)定：特級胎牛血清<10 UI/ml），極利于細(xì)胞的生長和傳代

2）具有歐洲藥品監(jiān)督委員會（EDQM）頒發(fā)的產(chǎn)品證書，符合歐洲藥典第1483條規(guī)定

3）GMP條件下生產(chǎn)，具有質(zhì)量認(rèn)證體系證書

4）每個(gè)批號血清均具有完整的檢驗(yàn)報(bào)告

5）三次0.01 μm無菌過濾處理

6）進(jìn)行細(xì)菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測，符合動(dòng)物協(xié)會要求

7）可按客戶要求用γ射線照射

ST30-3302 PAN胎牛血清*

PAN胎牛血清使用方法

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清，常使用的PAN胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，我們在實(shí)驗(yàn)中使用10%的PAN澳洲胎 牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的PAN胎牛血清南美或者20%的PAN胎牛血清，要根據(jù)具體 細(xì)胞選擇合適的PAN胎牛血清濃度。

PAN胎牛血清FBS保存方法

1、需要長期保存的PAN牛血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血 清中的有效成分會被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可 將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留 一 定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接 過濾血清。

3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全 部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。在溶解過程 中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度 與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而 出現(xiàn)沉淀。

4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體 成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄?淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體 參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞 發(fā)生化學(xué)趨化和活化。

5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身 的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下 "小黑點(diǎn)":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物 的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑 點(diǎn)不會影響細(xì)胞生 長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。

PAN胎牛血清使用中遇到的常見問題總結(jié)

一、血清滅活問題。

1、問：加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎？

答：不是必須的，看做什么實(shí)驗(yàn)了。

2、問：PAN胎牛血清滅活是56℃ 30分鐘嗎？

答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞，血清是 需要滅活，一般是56℃，30min。

3、問：我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)，胎牛血清要滅活嗎？

答：進(jìn)口的一般都已滅活，國產(chǎn)的不一定，還是滅活一下再用較安全。

4、問：我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞，培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體，是不是會影 響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會和病毒相結(jié)合，影響 轉(zhuǎn)染，正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞， 病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)，目的是什么？

答：血清一定要滅活，可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主 結(jié)合過程的干擾，一般是2-6小時(shí)，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需 要滅活，滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活 ！這要根據(jù)實(shí)際情況而定，如果沒有把握那就滅活吧，也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。

5、問：(1)我買的是PAN南美胎牛血清，要滅活嗎？有些說法是需要，有些說直接解凍后就可以加入到培 養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有關(guān)系嗎？

答：關(guān)于血清的熱滅活，是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為 常規(guī)來執(zhí)行，因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用，第yi是滅活補(bǔ)體，第二是滅活血清中可 能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處 理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響。