LLC小鼠肺癌細(xì)胞 LLC(小鼠肺癌細(xì)胞)

【細(xì)胞貨號(hào)】 C0775

【細(xì)胞縮寫】 LLC細(xì)胞

【細(xì)胞名稱】LLC細(xì)胞|小鼠肺癌細(xì)胞LLC 培養(yǎng)說明書

【背景資料】 小鼠Lewis肺癌細(xì)胞

【細(xì)胞來源】 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、LLC小鼠肺癌細(xì)胞promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外*大學(xué)建系

【代次】 P4

【規(guī)格】 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

【細(xì)胞數(shù)】 1*10（6）

【生物安全級(jí)別】 1

【生物體】 小鼠

【組織來源】 肺

【細(xì)胞形態(tài)】 其它形式

【細(xì)胞特性】 貼壁

【細(xì)胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

【細(xì)胞檢測(cè)】 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

【培養(yǎng)條件】 詳見細(xì)胞說明書

【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次

【凍存條件】 詳見細(xì)胞說明書

【主要文獻(xiàn)】 請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章

接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：

1、如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決

2、貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（*高不能超過20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

3、生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，LLC小鼠肺癌細(xì)胞可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作）

1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?-2min）

2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散

3、取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存

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