B16-F10細胞|小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10 培養(yǎng)詳細說明
B16-F10細胞|小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10 培養(yǎng)詳細說明
上海琛藝實業(yè)依托同濟大學,上海市東方醫(yī)院負擔大學供應人臍帶間充質干細胞,人脂肪干細胞,IPS功能性細胞,HUVEC細胞,各類細胞株細胞系,所有人源細胞均STR鑒定后入庫。并供應各類血清,培養(yǎng)基,胰酶,雙抗,*培養(yǎng)基等。
產品名稱:B16-F10細胞
中文名稱:小鼠黑色素瘤細胞
規(guī)格:T25瓶
形態(tài)特征:
生長狀態(tài):貼壁生長
是否STR鑒定:
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS(推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清 貨號:HN-FBS-500)
傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
支原體檢測:陰性
使用權限:A類
參考文獻:
細胞提供單位:上海琛藝實業(yè)有限公司
復蘇周期:10個工作日左右
培養(yǎng)步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
處理方法:
1. 收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100×,200×各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行售后的依據(jù)。
2. 收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費重發(fā)一次細胞。
3. 由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩氐挠绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后是需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后與客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4. 如客戶對細胞的種類、純度、活性等特性有疑問,需提供相應的生物學實驗檢測結果作為依據(jù)。
備注:各位老師收到后用無菌離心管收集瓶中培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng)
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KYSE-14 人食管鱗癌細胞;KYSE-140 T25
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Ketr-3 人腎癌細胞 T25
SNU-216 SNU-216;人胃癌細胞 T25
U373 人腦膠質瘤細胞 T25
U343 人腦膠質瘤細胞 T25
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K7M2 wt [K7M2-WT] K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨細胞 T25
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CT26.WT/LUC 小鼠結腸癌細胞帶熒光素酶 T25
143B/LUC 人骨肉瘤細胞帶熒光素酶 T25
SMMC7721/GFP 人肝癌細胞帶綠色熒光 T25
P815 小鼠肥大細胞瘤細胞;P815 T25
HKC 人腎小管上皮細胞;HKC T25
HUVEC 人臍靜脈血管內皮細胞;HUVEC T25
ARO 人甲狀腺癌細胞ARO T25
FRO 人甲狀腺癌細胞FRO T25
KGN 人卵巢顆粒細胞 KGN T25
SUM159PT SUM159PT 人乳腺癌細胞 T25
MMQ 大鼠垂體瘤細胞;MMQ T25
IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞 IOSE-80 T25
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