L1210/DDP-LUC小鼠白血病耐順鉑熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 處理方法：
請(qǐng)收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
（二） (二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1.棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注：1、觀察細(xì)胞建議在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否 則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。
【Organism物種來(lái)源】Animal
【Tissue組織來(lái)源】
【Cell Type細(xì)胞類(lèi)型】
【Product Format產(chǎn)品狀態(tài)】 frozen/live culture
【Morphology細(xì)胞形態(tài)】
【Culture Properties細(xì)胞特性】
【Biosafety Level生物安全級(jí)別】 1/2
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.

【Disease細(xì)胞源疾病】
【Age年齡】
【Gender性別】 Male/Female
【Storage Conditions保存條件】 liquid nitrogen vapor phase
【Karyotype染色體組型】
【Images細(xì)胞圖片】 Cell Micrograph
【Derivation衍生細(xì)胞】 ­
【Clinical Data臨床數(shù)據(jù)】
【Comments其他描述】
【Complete Growth Medium*培養(yǎng)基】 The base medium for this cell line is DMEM/RPMI-1640 Medium. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.
【Subculturing傳代方法】
Volumes are given for a 75 cm2 flask. Increase or decrease the amount of dissociation medium needed proportionally for culture vessels of other sizes.
Remove and discard culture medium.
Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.
Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).
Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal.
Add 6.0 to 8.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.
Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.
Incubate cultures at 37°C.
Subc*tion Ratio: A subc*tion ratio of 1:2 to 1:6 is recommended
Medium Renewal: 2 to 3 times per week
【Cryopreservation凍存條件】
【Freeze Medium凍存培養(yǎng)基】Complete growth medium supplemented with 5% (v/v) DMSO
【Storage Temperature保存溫度】 Liquid nitrogen vapor phase
【Culture Conditions培養(yǎng)條件】
【Atmosphere培養(yǎng)環(huán)境】 Air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
【Temperature培養(yǎng)溫度】 37°C
【STR Profile圖譜】
【Population Doubling Time倍增殖時(shí)間】
【References參考文獻(xiàn)】

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)為一體的專(zhuān)業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株，其中人的已通過(guò)STR鑒定的有幾百株，歡迎各位選購(gòu)。。。。。。

產(chǎn)品名稱(chēng)：L1210/DDP-LUC小鼠白血病耐順鉑熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

包裝：內(nèi)層無(wú)菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源：ATCC、sciencell、ICLC
貨期：1-2周
運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸
售后：收到細(xì)胞后12天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)通知銷(xiāo)售人員，我們將盡快為您解決！

注：耐藥細(xì)胞培養(yǎng)操作流程和普通細(xì)胞培養(yǎng)方法基本一致，只是在培養(yǎng)中會(huì)加藥維持篩選壓力

三、細(xì)胞生長(zhǎng)條件：

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件：

*培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml FU

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法：

收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，低速離心，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液（注意不要吸出細(xì)胞），換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 低速離心，棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中（補(bǔ)加*培養(yǎng)基至8到10ml）。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的di一次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。

凍存方法：

  凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO

  儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存

詳情如下：