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            產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


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            NUTU-19-GFP大鼠卵巢癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟

            來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年04月15日 12:07  

            上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。
            產(chǎn)品名稱:NUTU-19-GFP大鼠卵巢癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定
            特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi),細(xì)胞耐藥倍數(shù)8倍以上;
            包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
            細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
            貨期:1-2周
            運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
            售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)通知銷售人員,我們將盡快為您解決!
            1.慢病毒包裝部分
            1. 質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一天,293T在10cm培養(yǎng)盤中的細(xì)胞達(dá)到90%,胰酶消化后,1:3傳入新10cm培養(yǎng)盤中。轉(zhuǎn)染時(shí),細(xì)胞在培養(yǎng)盤中密度達(dá)到80%。采用脂質(zhì)體PEI轉(zhuǎn)染法使編碼慢病毒包膜蛋白的質(zhì)粒VSV G, Packaging Mix以及構(gòu)建的Gluc或Mluc質(zhì)粒15µg共轉(zhuǎn)染。6h后換新鮮DMEM培養(yǎng)基。
            2.提取病毒上清:轉(zhuǎn)染48-72hours后,將含有病毒液的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,在低溫4攝氏度條件下,3000rpm,離心10min去除片狀沉淀的細(xì)胞碎片。
            3.濃縮病毒:將病毒上清用0.45um濾器過濾至濃縮離心管中,2000rpm,4℃,15min離心。濃縮液收集于500µl離心管中,-80℃保存。
            1.慢病毒感染&篩選
            1.感染前一天(Day1),消化4T1細(xì)胞并計(jì)數(shù),將細(xì)胞鋪于24孔板中(以便在感染前細(xì)胞達(dá)到30%-50%的匯合度,37°C過夜孵化細(xì)胞。
            2.(Day2) 解凍低溫保存的慢病毒液,并且制備1:2病毒稀釋液200µl加入細(xì)胞中。
            3.向每孔加入Polybrene達(dá)到終濃度6ug/ml,晃勻孔板,37度孵化過夜。
            4.(Day3)移去含有慢病毒的培養(yǎng)基,加入500µl*培養(yǎng)基。
            5.(Day4)換液,加入300µg/ml  Hygromycin(Sigma)來選擇穩(wěn)定感染的細(xì)胞克隆。
            6.(Day4-7),每24h換液,300µg/ml Hygromycin(Sigma)來選擇穩(wěn)定感染的細(xì)胞克隆。
            維持培養(yǎng)。
            7.(Day8-12)細(xì)胞逐漸由24孔板傳入6孔板、6cm盤和10cm盤中100µg/ml Hygromycin維持培養(yǎng)。
            8. 4T1-Gluc/Mluc細(xì)胞系鑒定: 取5×104細(xì)胞,用Passive Lysis裂解液裂解,加入熒光素酶作用底物,將轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞與陰性,陽性對(duì)照共同進(jìn)行單報(bào)告基因檢測。GFP和mCherry表達(dá)通過熒光顯微鏡觀察。
             NUTU-19-GFP大鼠卵巢癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定

            ?培養(yǎng)條件 :置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中,用含10%胎牛血清(FBS;    Hyclone, Tauranga, New Zealand)和1%雙抗(100 U/ ml青霉素和100 μg/ ml鏈霉素,Hyclone, Logan, UT, USA)的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)一天(密度大概80%)按照1:3的比例傳代。
            ?細(xì)胞傳代所需時(shí)間:1天/代 
            ?篩選標(biāo)記維持壓力和選擇壓力:Hygromycin 100ug/ml 和300ug/ml 。
            ?體外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):
            1.4T1-Gluc 和4T1-Mluc熒光顯微鏡照片(100×):
            2.細(xì)胞裂解液的發(fā)光值,數(shù)據(jù)—化學(xué)發(fā)光儀(Berthold Lumat LB 9501)檢測。
            HuUMSCs-11細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:第三代
            HepAD38細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            Li-7細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁生長 ;細(xì)胞背景資料:人肝癌細(xì)胞株。這株細(xì)胞從裸鼠體外移植瘤中建立。
            Mahlavu細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:肝癌;女性
            SNU475細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:肝癌;男性
            NCI-H2081細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:隨細(xì)胞的密度而增加;細(xì)胞形態(tài)特性:聚團(tuán)懸浮;細(xì)胞生長特性:懸浮生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            PC-12細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿;細(xì)胞形態(tài)特性:多角形;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子(NGF)受體。NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。這些細(xì)胞不合成。
            95D細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:巨細(xì)胞肺癌
            YTMLC-90細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:肺鱗癌;男性
            HEP 3B細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:肝癌;男性
            TB 1 LU細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:肺
            HS578T細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            MDBK(NBL-1)細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:腎;自發(fā)永生;雄性
            NCI-H2052[H2052]細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            NRK49F細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            MCF-12A細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞;女性
            3T3-Swissalbino細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            WILL-2細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸??;細(xì)胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤;女性
            NUTU-19細(xì)胞:大鼠卵巢癌細(xì)胞
            RD細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,3-4天換液1次;細(xì)胞形態(tài)特性:梭型和大的多核細(xì)胞;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機(jī)磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
            J-111細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸浮;細(xì)胞背景資料:單核細(xì)胞白血病
            SGC-790細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            NCI-H1869細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            CL-34細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            TOV-112D細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,3-4天換液1次;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            OE-19細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            CHO-dhFr-細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            JVM-3細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸??;細(xì)胞背景資料:慢性髓白血??;女性
            WILL-2細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸浮;細(xì)胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤;女性
            NCI-H1385細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            HuT78細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:維持細(xì)胞濃度在0.5—8×105viablecells/ml之間;每周換液3次;細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣;細(xì)胞生長特性:懸浮生長;細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞可產(chǎn)生IL-2,TNF-α;表達(dá)IL-2受體。
            WM-266-4細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            CHO細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:1957年,PuckTT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞;廣泛用于生物制品的表達(dá)。
            PBL細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸??;細(xì)胞背景資料:外周血淋巴細(xì)胞
            DOhh2細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸浮;細(xì)胞背景資料:人彌漫大B淋巴瘤;男性
            CTLA4 Ig-24細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            Caco2細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:此細(xì)胞株分離自一個(gè)原發(fā)性結(jié)腸癌。當(dāng)細(xì)胞長滿時(shí),表現(xiàn)出典型的腸細(xì)胞分化的特征。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II,角蛋白陽性。
            NUTU-19細(xì)胞:大鼠卵巢癌細(xì)胞
            M619細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:脈絡(luò)膜黑色素瘤;女性
            NCI-H524細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:圓形細(xì)胞;細(xì)胞生長特性:懸浮生長;細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1982年建系,源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
            NCI-H23細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            HUVSMC細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:臍靜脈平滑肌
            RC92A細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:前列腺癌;HGNC-TERT轉(zhuǎn)化;男性
            DMS79細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:半貼壁;細(xì)胞背景資料:小細(xì)胞肺癌;男性
            HOPC-os細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            EU-4細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:懸浮;細(xì)胞背景資料:兒童急性髓系白血病
            NG108-15[108CC15]細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            KMST-6細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:胚成纖維細(xì)胞;女性
            HNE2細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            Farage細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代;細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣;細(xì)胞生長特性:懸浮生長;細(xì)胞背景資料:Farage細(xì)胞源于一名患有彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)白人女性的活檢淋巴組織,由HBen-Bassat建系。經(jīng)IL-4處理,該細(xì)胞CD21,CD22,CD54和CD58表達(dá)上調(diào),而CD21,CD22,andCD38表達(dá)下調(diào)。
            SNU-251細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:卵巢內(nèi)膜癌;腹水轉(zhuǎn)移;女性
            NCI-H23細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次;細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;細(xì)胞生長特性:貼壁生長;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            LS180細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            NCI-H2085[H2085]細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分;細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
            FHL124細(xì)胞系;細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書;細(xì)胞生長特性:貼壁;細(xì)胞背景資料:晶狀體上皮;自發(fā)永生

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