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            HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標記細胞 處理方法

            來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年06月08日 09:14  

            感恩回饋,價格實惠,物美價廉,量大從優(yōu),部分試劑買一送一。。。。。。

             

            上海琛藝實業(yè)有限公司提供ATCC原代細胞,ATCC菌株代購,同時上海琛藝新增細胞庫,具有自己的研發(fā)細胞培養(yǎng)庫,上千株細胞具有STR鑒定,開春大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

            HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標記細胞 處理方法 已通過STR鑒定

             

            【細胞傳代】:1:3 傳代

             

            【細胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

             

            【細胞檢測】:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

             

            【細胞凍存】:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)

             

            【細胞運輸】:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)

             

            詳細背景: 這株細胞的細胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會收縮。細胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。

             

            細胞來源: 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系

             

            "購買細胞注意事項:

             

            1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

             

            2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

             

            3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,OSKMZ-1小鼠誘導型多能干細胞| OSKMZ-1動物

             

            顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

             

            4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。

             

            規(guī)格: 復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

             

            細胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml

             

            HUVEC-C-GFP人臍靜脈血管內(nèi)皮綠色標記細胞 處理方法 已通過STR鑒定

            培養(yǎng)步驟:

            1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

            2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

             

            1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

            1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

            2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

            3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

            4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

            PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

            2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

             

            3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

             

            PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

             

            上海琛藝是一家專業(yè)從事細胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨立細胞房(可隨時約定參觀),供應胎牛血清,STR鑒定細胞,感受態(tài)細胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。

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