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2015
07-14

elisa間接法原理及實(shí)驗(yàn)步驟
ELISA實(shí)驗(yàn)中文酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?？捎糜跍y(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。間接法是多種實(shí)驗(yàn)方法中常用方法。elisa間接法原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。elisa間接法操作步驟如下：（1）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。（2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過(guò)程中被洗去。（3）加酶標(biāo)抗抗體：與固
2015
07-07

elisa酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)直接法和間接法優(yōu)缺點(diǎn)比較
因?yàn)镋LISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題，它是一種特殊的試劑分析方法。elisa可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent)；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate)；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢測(cè)方法。elisa可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來(lái)分類為以下兩種方
2015
07-06

ELISA試劑盒發(fā)展趨勢(shì)
國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒發(fā)展起步較晚，1985年才研制了我國(guó)*批國(guó)產(chǎn)生化診斷試劑。但受益于醫(yī)療消費(fèi)水平的提高、醫(yī)療體制改革的推動(dòng)、國(guó)家產(chǎn)業(yè)政策的扶持，以及本身具有的一次性消費(fèi)的特點(diǎn)，IVD行業(yè)將會(huì)以15%~20%的速度高速增長(zhǎng)。特別是醫(yī)改中的某些規(guī)定，讓我們看到了體外診斷試劑未來(lái)極富想象力的創(chuàng)富空間。比其對(duì)基本藥物的“零加成”的規(guī)定，使得基層醫(yī)院藥品收入頓時(shí)減少，于是化驗(yàn)單成為另一個(gè)開(kāi)源對(duì)象，檢驗(yàn)科的地位也將提升，而且隨著例行體檢的加快普及，體檢的人數(shù)越來(lái)越多。新醫(yī)改機(jī)會(huì)盡管落后于世界前沿,但從現(xiàn)在
2015
06-25

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)顯色可能碰到的問(wèn)題以及解決辦法
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)的操作步驟有標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋、加樣、溫育、洗滌、顯色等等，然而在顯色這一步驟可能碰到的問(wèn)題有：1、顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；2、加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。相應(yīng)解決辦法：1、顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用；2、加樣時(shí)保持顯色劑不外流；3、A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。顯色是elisa實(shí)驗(yàn)的后一步溫育反應(yīng),所以顯色也是重要步驟之一。
2015
06-18

elisa試劑盒測(cè)試要求
elisa試劑盒測(cè)試時(shí)要做好對(duì)照以及對(duì)實(shí)驗(yàn)條件做好選擇。在進(jìn)行正式試驗(yàn)之前，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被
2015
06-15

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)關(guān)重要的步驟
elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。雖然elisa試劑盒的操作步驟看似簡(jiǎn)單，但沒(méi)做到位的話就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的效果。所以elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)關(guān)重要的步驟有：*、重要的洗滌：不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高，懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。第二、關(guān)鍵的封閉：封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就
2015
06-11

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)前期準(zhǔn)備
elisa試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。而在實(shí)驗(yàn)之前需要準(zhǔn)備的東西有：1、準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料（如：微量移液器、吸頭、醫(yī)用蒸餾水等）。2、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1：4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。3、使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置少30分鐘。4、用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。5、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1：19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液。elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作也是比較重要的
2015
06-08

elisa試劑盒洗滌對(duì)試驗(yàn)的影響
洗滌是elisa試劑盒測(cè)定過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。洗滌可采用洗板機(jī)或手工洗滌兩種方式，手工洗板則分為浸泡式和流水沖洗式洗滌。無(wú)論洗板方式如何，在向板孔內(nèi)注液時(shí)應(yīng)當(dāng)避免氣泡殘留孔內(nèi)，否則會(huì)因洗滌液難以進(jìn)入孔中而影響洗滌效果。洗滌目的是去除反應(yīng)體系中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。由于抗原和抗體的包被通常是在堿性條件下與固相的疏水鍵相互作用而被動(dòng)吸附于其上的，因此必須注意非離子去垢劑的使用濃度，常用的洗滌液是含0.05％吐溫20的0.02m
2015
06-04

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差的種類
elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。然而在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些誤差，這些誤差分為：系統(tǒng)誤差、隨機(jī)誤差和過(guò)失誤差。1．系統(tǒng)誤差是指一系列測(cè)定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差，有明顯的規(guī)律性，可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn)，是可以通過(guò)質(zhì)控預(yù)防和校正的。2．隨機(jī)誤差又稱偶然誤差，是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差，是難以避免和校正的誤差。檢驗(yàn)工作中隨機(jī)誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。3．過(guò)失誤差
2015
06-01

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的原則
elisa試劑盒具有穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等特點(diǎn)，然而實(shí)驗(yàn)時(shí)的原則有：1.按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。2.選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。3.避免反復(fù)凍融。4.試劑盒上沒(méi)有指出配制物的儲(chǔ)藏方式的話，應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用，不要怕麻煩。5.試劑盒中會(huì)有提示，一般需要準(zhǔn)備的有：①洗滌液；用前配制，有的試劑盒會(huì)標(biāo)明，配好的4度下一般可以放一個(gè)月；如果沒(méi)有標(biāo)明，盡量用新鮮的，不要多配制。②顯色液（有A液和B液的），用前15分鐘配制；③標(biāo)準(zhǔn)
2015
05-28

廢棄的培養(yǎng)基有什么用途?
很多人想廢物利用，想把廢棄了的培養(yǎng)基再進(jìn)行利用，總覺(jué)得廢棄了的培養(yǎng)基還有其他的用途。但從生物安全的角度來(lái)看，廢棄的培養(yǎng)基是不能再回收利用的，這是原則問(wèn)題，而且也不可能知道培養(yǎng)基在使用后剩余哪些成分及其含量，或產(chǎn)生了哪些有害物質(zhì)，或者已經(jīng)受到了污染不能再次使用。廢棄的培養(yǎng)基應(yīng)該高溫高壓滅菌后排放或按相關(guān)規(guī)定運(yùn)送地點(diǎn)焚燒處理。所以廢棄的培養(yǎng)基沒(méi)有任何用途，應(yīng)該及時(shí)處理。本公司主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒，生物試劑，生化試劑，化學(xué)試劑，血清，標(biāo)準(zhǔn)品，抗體，細(xì)胞，培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)耗材，與國(guó)內(nèi)很多的企業(yè)都建立了
2015
05-25

elisa試劑盒為什么要用血清檢測(cè)
elisa檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。然而elisa試劑盒為什么要用血清檢測(cè)？elisa其實(shí)是可以測(cè)一些組織、細(xì)胞等樣本的，但是由于組織、細(xì)胞是固體樣本，要對(duì)其進(jìn)行破碎，提取被檢物質(zhì)；而在提取被檢物質(zhì)時(shí)破碎方式（如機(jī)械破碎、超聲破碎、裂解液裂解等）、提取液的成份等存在差異，終導(dǎo)致提取程度有所差異，從而難以建立正常參考值；而血清或血漿樣本就不存在因提取過(guò)程導(dǎo)致的偏差并且采集時(shí)又非常方便，因此通常臨床常采用血清、血漿作為檢測(cè)對(duì)象。
2015
05-21

ELISA試劑盒特點(diǎn)
ELISA試劑盒具有、靈敏、特異的抗體；穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。ELISA是一種簡(jiǎn)單、的檢測(cè)平臺(tái)，主要用于定性或者定量檢測(cè)細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子、磷酸化蛋白、免疫球蛋白以及其他的一些免疫標(biāo)記。ELISA可以檢測(cè)各種生物樣本，比如血清、血漿、細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解物等。目前在生物標(biāo)記物的篩選方面，ELISA已經(jīng)成為一個(gè)有價(jià)值的檢測(cè)工具。相對(duì)于其他檢測(cè)平臺(tái)，ELISA
2015
05-18

液態(tài)奶黃曲霉毒素M1、M2試劑盒
【檢測(cè)原理】試劑盒采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法分析原理結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)?！緳z測(cè)范圍】牛奶、生鮮奶等液態(tài)奶?！炯夹g(shù)指標(biāo)】測(cè)下限：0.5μg/kg；【檢測(cè)步驟】樣品處理：取1ml樣品置于5ml離心管中，向離心管中加2ml提取劑，振搖2～3min后，用離心機(jī)以2000r/min,離心5min，取2ml上清液另一個(gè)5ml離心管中，向其中加2ml凈化劑，振搖5min，用離心機(jī)以2000r/min離心5min，吸取全部下層點(diǎn)滴板的一個(gè)孔中自然揮干（或加熱將其揮干），備用；樣品檢測(cè):向點(diǎn)滴板上滴加4滴緩沖液，使其
2015
05-14

細(xì)胞凋亡檢測(cè)操作步驟之ELISA法
細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí)，內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶將分解核小體區(qū)間的雙鏈DNA，但核小體本身由于由組蛋白緊密結(jié)合而免受切割，單克隆抗體可以與核小體形成夾心結(jié)構(gòu)，可通過(guò)檢測(cè)核小體判斷細(xì)胞是否經(jīng)歷凋亡事件。(一)原理細(xì)胞凋亡的發(fā)生，是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進(jìn)入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp～200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu)，可特異性檢測(cè)細(xì)胞溶解物
2015
05-11

elisa試劑盒的選擇
elisa試劑盒的選擇對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也存在著一定的影響因素。免疫檢測(cè)的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過(guò)程受多種因素的影響，如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等，因而檢測(cè)結(jié)果難以溯源，不同方法、不同試劑之間甚同一試劑不同批號(hào)間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測(cè)的水平，因此在引入新項(xiàng)目之前必須對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。試劑的評(píng)估有以下幾個(gè)步驟：⑴確定開(kāi)展該項(xiàng)目的必要性；⑵了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測(cè)方法和原理；⑶在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較，判斷標(biāo)準(zhǔn)參考方法或參考物質(zhì)，其次為臨床的滿意
2015
05-06

小鼠ELISA試劑盒易于制備和保存
用于小鼠ELISA試劑盒的酶應(yīng)符合以下要求：純度高，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，專一性強(qiáng)，性質(zhì)穩(wěn)定，來(lái)源豐富，價(jià)格不貴，制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保留它的活性部分和催化能力。好在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶。另外，它的相應(yīng)底物，價(jià)格低廉，有色產(chǎn)物易于測(cè)定等。1，不能用手接觸試劑，不要把鼻孔湊到容器口去聞試劑（特別是氣體）的氣味。2，不得嘗任何試劑的味道。注意節(jié)約試劑，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)規(guī)定的用量取用試劑。如果沒(méi)有說(shuō)明用量，一般應(yīng)按少量取用：液體1～2mL，固體只需要蓋滿試管底部。實(shí)驗(yàn)剩余的試劑既不能放回原瓶，也不要隨
2015
05-04

試劑盒的清洗
試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡
2015
04-30

ELISA試劑盒新手入門的使用說(shuō)明技巧
方法原理1.雙抗體(原)夾心法：檢測(cè)抗原(體)的常見(jiàn)方法，應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原，不能測(cè)小分子半抗原)。2.間接法：檢測(cè)抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。3.競(jìng)爭(zhēng)法：檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體，以測(cè)抗原為例，使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)?！虿僮髯⒁猗偈褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲海褂们俺浞只靹蛟?
2015
04-27

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)有哪些禁忌？
ELISA檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研中為廣泛為敏捷的技術(shù)手段。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)八大禁忌？1．從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，ELISA試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其正確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)目多，推薦使用排槍加樣。4．如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣

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