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2016
04-06

免疫沉淀的具體步驟說明
免疫沉淀是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法?？贵w與細(xì)胞裂解液或表達(dá)上清中相應(yīng)的蛋白結(jié)合后，再與蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯(lián)的agarose或Sepharose珠子孵育，通過離心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗體-目的蛋白復(fù)合物，沉淀經(jīng)過洗滌后，重懸于電泳上樣緩沖液，煮沸5-10min，在高溫及還原劑的作用下，抗原與抗體解離，離心收集上清，上清中包括抗體、目的蛋白和少量的雜蛋白。溶液制備緩沖液：50毫米Tris-HClpH7.4；氯化鈉150毫米；1毫米EDTA；1%Tr
2016
03-24

6-芐基氨基喋呤（6-BA）
A81706-芐基氨基喋呤（6-BA）現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品基本信息6-BA具有、穩(wěn)定、廉價(jià)和易于使用等特點(diǎn),因而被廣泛采用,并且是組織培養(yǎng)者喜愛的細(xì)胞分裂素。BA的主要作用是促進(jìn)芽的形成,也可以誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)生?？捎糜谔岣卟枞~、煙草的質(zhì)量及產(chǎn)量；蔬菜、水果的保鮮和無根豆芽的培育，明顯提高果品及葉片的品質(zhì)。簡要介紹6-BA的說明：6-芐基氨基嘌呤是植物細(xì)胞分裂因子，用于合成細(xì)胞激動素和植物組織細(xì)胞培養(yǎng)。詳細(xì)說明貨號：A8170-1貨品名稱：6-BA,6-芐基氨基嘌呤,索萊寶規(guī)格：1g/5g別名：6-芐基腺
2016
03-22

Cell Counting Kit-8
CellCountingKit-8產(chǎn)品簡介：CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)使用說明：一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)）1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。2、按比例依次
2016
03-15

2×Taq PCR MasterMixPCR反應(yīng)擴(kuò)增試劑盒
PCRMasterMix中加入了高性能PCR增強(qiáng)劑和穩(wěn)定劑，適用于常規(guī)的PCR反應(yīng)和一些結(jié)構(gòu)復(fù)雜的模板如GC含量高、有二級結(jié)構(gòu)等的PCR擴(kuò)增。優(yōu)點(diǎn)是操作程序簡單、污染小、勞動強(qiáng)度低和取樣誤差小，而且PCR反應(yīng)的特異性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加。該產(chǎn)品分為含染料和不含染料兩種體系，含染料的PCRMasterMix在PCR結(jié)束后可以直接電泳，無需再加入上樣緩沖液。
2016
03-14

潮霉素B
潮霉素B潮霉素B(HygromycinB)是由吸水鏈霉菌（Streptomyceshygroscopicus）代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死細(xì)菌、真菌和高等真核細(xì)胞。潮霉素B通過干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對mRNA模板的錯(cuò)讀而抑制蛋白合成。目前常用于篩選和維持培養(yǎng)含潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞。潮霉素B的應(yīng)用：1）篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph+載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞（植物細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞）；2）由于作用模式的差異，常與G418（GeneticinTM），Zeoci
2016
03-04

動物基因組DNA的提取
動物基因組DNA的提取實(shí)驗(yàn)簡介DNA是遺傳信息的載體，是重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對象，為了進(jìn)行測序、雜交、基因表達(dá)、文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中重要、基本的操作之一。實(shí)驗(yàn)原理、目的DNA是遺傳信息的載體，是重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對象，為了進(jìn)行測序、雜交、基因表達(dá)、文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)
2016
02-23

血清使用中的常見問題解答
1.保存血清好的辦法我們建議血清應(yīng)保存在-5℃-20℃。若你一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？我們建議您將血清從冷凍箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的；而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成血清沉淀
2016
02-01

免疫細(xì)胞的分離和保存技術(shù)
免疫細(xì)胞的分離和保存技術(shù)一、分離細(xì)胞的保存在某些情況下，分離所得細(xì)胞需要加以保存，否則活力迅速下降，甚死亡。（一）短期保存技術(shù)將分離到的細(xì)胞用適量含10％～20％滅活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMI1640或其他培養(yǎng)液稀釋重懸。所用培養(yǎng)液要求等滲，具緩沖作用，并對細(xì)胞無毒性。通常置4℃保存較好，可減低細(xì)胞代謝活動。要注意不要迅速改變細(xì)胞所處的溫度，以免造成細(xì)胞“溫度”休克。（二）長期冷凍保存技術(shù)利用液氮深低溫（－196℃）環(huán)境保存細(xì)胞，是當(dāng)前世界上通用的細(xì)胞長期保存技術(shù)。其原理在于深
2016
01-22

甲醛測定儀之“*
近來，國內(nèi)家具市場上隨處可見商家打出“*”的廣告語，面對這些自稱不含甲醛，但價(jià)格卻高出普通家具20%的家具，消費(fèi)者們很迷糊，不知道是真的沒甲醛，還是坑人的？要想解決這一個(gè)疑惑，只有去買一臺家用式甲醛測定儀了。后來，經(jīng)檢驗(yàn)得知，所謂的“*”*是忽悠人的說法，“由于工藝和成本的限制，*的無醛加工是很難做到的?！睒I(yè)內(nèi)銷售人士表示，某些“提法”，不過是為了贏得銷量的一種宣傳說法。據(jù)專業(yè)人士得出結(jié)論：無論是符合E2、E1還是E0級標(biāo)準(zhǔn)的人造板，由于其仍然存在持續(xù)的甲醛釋放，當(dāng)居室存在容積有限、裝修密度大、
2016
01-20

免疫細(xì)胞的分離技術(shù) 外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離
免疫細(xì)胞的分離技術(shù)外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離用體外方法對機(jī)體各種具有免疫反應(yīng)的細(xì)胞分別作鑒定、計(jì)數(shù)和功能測定，是觀察機(jī)體免疫狀態(tài)的一種重要手段。為此，須將各種參與免疫反應(yīng)的細(xì)胞從血液或臟器中分離出來。參與免疫反應(yīng)的細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等。實(shí)驗(yàn)根據(jù)不同需求有的僅需分離白細(xì)胞，有的則需分離單個(gè)核細(xì)胞（mononuclearcell），其中含淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞（monocyte），有的則需分離T細(xì)胞和B細(xì)胞以及其亞群。白細(xì)胞包括以下細(xì)胞外周血中單個(gè)核細(xì)胞包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，其體積
2016
01-05

DNA Loading Buffer使用說明書
DNALoadingBuffer貨號：D1010規(guī)格：5ml/100ml保存：室溫保存，有效期少12個(gè)月。產(chǎn)品簡介：本產(chǎn)品是6倍濃縮的DNA上樣緩沖液，用于DNA凝膠電泳，能促使DNA樣品沉入凝膠加樣孔中。其主要成份為甘油，EDTA，溴酚藍(lán)和二甲苯青等。溴酚藍(lán)和二甲苯青用作電泳時(shí)的指示劑，可指示電泳進(jìn)程。使用說明：1、請按每5微升DNA樣品加入1微升6×DNALoadingBuffer上的比例(6倍稀釋)來使用。2、混勻后，直接加到DNA凝膠加樣孔中，電泳。注意事項(xiàng)：1、如果每次的使用量很小，可
2015
12-19

熒光抗體稀釋液使用說明
一抗體稀釋，主要用來稀釋*抗體，稀釋過的一抗可4度保存3-6個(gè)月。主要含有蛋白穩(wěn)定劑，PBS，疊氮鈉等，不適合于稀釋酶標(biāo)記抗體及待標(biāo)記抗體。酶標(biāo)抗體稀釋液只適合于稀釋對應(yīng)的抗體，稀釋過的抗體可4度保存3-6個(gè)月。熒光抗體稀釋液稀釋過的熒光抗體可4度避光保存一周。免疫熒光抗體稀釋液(ImmunofluorescenceStainingAntibodyDilutionBuffer)可以用于免疫熒光實(shí)驗(yàn)時(shí)熒光標(biāo)記抗體的稀釋和配制。產(chǎn)品添加了抗體保護(hù)劑、穩(wěn)定劑等成分，有效增加了稀釋后熒光抗體的穩(wěn)定性。用
2015
12-01

Western Blot常見問題及注意事項(xiàng)
WB常見問題常見問題解決對策及注意事項(xiàng)兩快玻璃板之間灌膠,膠總是不平玻璃沒有洗干凈，應(yīng)該要洗得非常干凈過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對較多，凝膠凝固過快，也會造成膠不平現(xiàn)象加完試劑以后沒有很好的搖勻，導(dǎo)致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快造成膠不平膠總是漏避免玻璃邊緣（與膠條接觸處）破損膠條一定要干，跑完電泳后，膠條就放在實(shí)驗(yàn)臺上晾著。下面的膠條注意不要老化，如果有裂紋的話用保鮮膜墊在上面，也可以有效防止漏膠將兩塊玻板擺放*對齊，底部處于同一個(gè)平面膜上有明顯氣泡操作時(shí)將氣泡*排除靠
2015
12-01

蛋白印跡用緩沖液及洗滌液
轉(zhuǎn)印緩沖液提供了電極之間的電連續(xù)性，其必須是導(dǎo)電的。它還提供了一個(gè)化學(xué)環(huán)境，能維持蛋白質(zhì)的溶解度，又不妨礙轉(zhuǎn)移過程中蛋白質(zhì)吸附到膜上。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)印緩沖液包含緩沖系統(tǒng)和甲醇。Tris甘氨酸緩沖液，常用于槽轉(zhuǎn)印系統(tǒng)中。這種緩沖液的pH值為8.3，比大多數(shù)蛋白的等電點(diǎn)（pI）要高。在凝膠上分離的蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷，向陽極遷移。由于槽內(nèi)的緩沖液是混合的，故轉(zhuǎn)移過程中的離子分布保持相對恒定。在蛋白測序應(yīng)用中，建議使用10mMCAPS緩沖液（pH=11）。凝膠電泳緩沖液中殘留的甘氨酸導(dǎo)致蛋白測序過程中出現(xiàn)高背景。
2015
12-01

尼龍膜、PVDF膜、NC膜區(qū)別
轉(zhuǎn)印膜：用于蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢驗(yàn)過程的微孔膜。Southernblot：又稱Southern印跡雜交，是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。Northernblot：又稱Northern印跡雜交，是檢測RNA的基本技術(shù)。Westernblot：又稱Western印跡雜交，是蛋白質(zhì)檢測分析的基本技術(shù)。轉(zhuǎn)印膜在蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢測過程中應(yīng)用廣泛，不同的轉(zhuǎn)印膜規(guī)格和參數(shù)不同，選擇正確、均一穩(wěn)定的轉(zhuǎn)印膜對達(dá)到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果起到關(guān)鍵性的作用。常用的三種轉(zhuǎn)印膜：硝酸纖維素膜（NC膜）、帶正電的尼龍膜（N66膜）、
2015
12-01

實(shí)驗(yàn)室詳解單克隆抗體的制備過程
單克隆技術(shù)又名雜交瘤技術(shù)。由G.K?hler和Milstein1975年創(chuàng)立。主要原理是利用產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交融合成雜交瘤細(xì)胞，生產(chǎn)抗體。單克隆抗體的制備過程主要有以下六個(gè)環(huán)節(jié)，具體為抗原指標(biāo)、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細(xì)胞雜交與選擇培養(yǎng)。單抗制備步驟1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原，從純度上說雖不要求很高，但高純度的抗原使得到所需單抗的機(jī)會增加，同時(shí)可以減輕篩選的工作量。因此，免疫抗原是越純越好，應(yīng)根據(jù)所研究的抗原和實(shí)驗(yàn)室的條件來決定。2、免疫動物的選擇根據(jù)所用的骨髓
2015
12-01

Western/ELISA顯色底物大盤點(diǎn)
一、HRP辣根過氧化酶是常見的酶促發(fā)光或顯色的交聯(lián)酶，由于HRP比活高、特異性更強(qiáng)、分子量?。?0kD）、穩(wěn)定性好和作用底物范圍廣的優(yōu)點(diǎn)而得到廣泛使用。HRP的底物種類有不少，主要可以分為化學(xué)發(fā)光底物和生色底物2大類:1.化學(xué)發(fā)光底物：化學(xué)發(fā)光底物主要考慮的是：發(fā)光信號強(qiáng)弱——發(fā)光信號當(dāng)然越強(qiáng)越好，強(qiáng)發(fā)光信號持續(xù)的時(shí)間也是越長越好，還有就是背景低靈敏度高。原理：試劑中的發(fā)光物在辣根過氧化物酶的作用下發(fā)生氧化降解，并發(fā)射波長為428nm的光，此光可經(jīng)x光膠片(放射自顯影片)感光記錄下來。常用的化學(xué)
2015
12-01

CTAB作用原理
物理性狀呈白色或淺黃色結(jié)晶體粉末狀，有刺激氣味，易溶于異丙醇，可溶于水，震蕩時(shí)產(chǎn)生大量泡沫。能與陰離子、非離子、兩性表面活性劑有良好的配位性。具有優(yōu)良的滲透、柔化、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。作用原理CTAB是一種陽離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性。它能與核酸形成復(fù)合物：在高鹽溶液中（0.7mol/LNaCl）是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度（0.3mol/LNaCl）時(shí),從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白、多糖類物
2015
11-12

二甲基亞砜配制及作用
二甲基亞砜物理性質(zhì)二甲基亞砜，英文名稱DMSO。無色粘稠液體。有吸濕性。能與水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶于乙炔以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛，可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機(jī)合成，醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜的合成二甲基亞砜一般采用二甲硫醚氧化法制得，由于所用的氧化劑和氧化方式不同，因而有不同的生產(chǎn)工藝。甲醇二硫化碳法甲醇和二硫化碳為原料，以γ-Al2O3作催化劑，先合成二甲基硫醚，再與二氧化氮（或硝酸）氧化得二甲
2015
11-12

紅細(xì)胞裂解液的工作原理及配制方法
紅細(xì)胞裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，它能既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。那么紅細(xì)胞裂解液的原理是怎么樣的呢？裂解液作用原理血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原，當(dāng)裂解液中含可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的時(shí)候就只會造成紅細(xì)胞的變形，生物通道擴(kuò)大膨脹裂解，或者引起紅細(xì)胞的變形，而不會攻擊其他細(xì)胞；另外紅細(xì)胞有自己的電負(fù)性，滲透脆性（通常是一些非酶細(xì)胞裂解液的突破點(diǎn)），懸浮穩(wěn)定性，這都是區(qū)別于其他種類細(xì)胞的區(qū)別點(diǎn)。紅細(xì)胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細(xì)胞的。另外紅細(xì)胞裂解液不能達(dá)到1

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