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2019
08-20

淺看氨基柱的2種使用方法
氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99：1)中。1、正相使用新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積，后換成流動(dòng)相。1.1正相使用時(shí)，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過氧化物(質(zhì)量不好的yi醚、
2019
07-29

這樣的離子色譜儀才是你一直所追求那一款
離子色譜儀作為近年來發(fā)展快的技術(shù)之一，離子色譜的應(yīng)用已滲透到眾多領(lǐng)域。但很多用戶卻一直不了解到底什么樣的離子色譜儀才算好呢？東曹（上海）生物科技認(rèn)為這樣的離子色譜儀才是你一直所追求：1、選擇性好：IC法分析無機(jī)和有機(jī)陰、陽離子的選擇性可通過選擇恰當(dāng)?shù)姆蛛x方式、分離祝賀監(jiān)測方法來達(dá)到。與HPLC相比，IC中固定相對選擇性的影響較大。2、可同時(shí)分析多種離子化合物：與光度法、原子吸收法相比，IC的主要優(yōu)點(diǎn)是可同時(shí)檢測樣品中的多種成分。只需很短的時(shí)間就可得到陰、陽離子以及樣品組成的全部信息。3、快速、方
2019
07-24

簡單介紹親水色譜柱的特點(diǎn)
簡單介紹親水色譜柱的特點(diǎn)親水色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性，所以也可以作為一種通用C18柱使用。親水色譜柱是專為親水性和極性化合物具有更強(qiáng)的保留能力和選擇性而設(shè)計(jì)的。典型的應(yīng)用是對生物分子、代謝物和藥物降解產(chǎn)物如有機(jī)酸、水溶性維生素、低聚糖、氨基酸以及小分子縮氨酸和小分子核苷等進(jìn)行分離。親水色譜柱相呈現(xiàn)穩(wěn)定的基線、高選擇性和長保留時(shí)間，甚至在中性pH值條件下和沒有緩沖溶液或反離子添加劑條件下使用。親水色譜柱詳細(xì)介紹：1．適度的表面覆蓋率和*的封尾2．對酸性、堿性和中
2019
07-22

親水色譜柱的流向
親水色譜柱的流向親水色譜柱的流向不能改變在我們常規(guī)思維中，色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循?？墒?，大家有沒有想過這個(gè)方向的作用是什么呢？為什么要標(biāo)示一個(gè)使用方向呢？其實(shí)親水色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的，標(biāo)示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動(dòng)相從哪個(gè)方向流入色譜柱，那么這個(gè)流入段就是zui先污染端。這樣就為我們?nèi)蘸缶S護(hù)或再生色譜柱做了準(zhǔn)備，而我們需要遵循這個(gè)規(guī)定應(yīng)該在色譜柱開始做樣后。我曾將已經(jīng)污染過的色譜柱反方向來使用，如果保留時(shí)間不是很長，而色譜柱足夠長，還是能使用
2019
06-27

陰陽離子交換色譜柱的色譜行為
陰陽離子交換色譜柱的色譜行為磺酸基陽離子交換固定相是一種常見的陽離子交換固定相，離子交換功能基為苯磺酸，通常將其健合在有機(jī)聚合物基質(zhì)（如苯乙烯-乙基乙烯苯）或硅膠基質(zhì)上，前者耐酸堿，常用于離子色譜法分析無機(jī)陽離子，后者機(jī)械性強(qiáng)，常用于普通HPLC分析有機(jī)化合物陽離子。以硅膠為基質(zhì)的磺酸基陽離子交換固定相簡稱為SCX,功能基團(tuán)為大多為苯磺酸。目前市面上有多種品牌，pH適用范圍一般為2~8，磺酸基均以離子型存在，為強(qiáng)陰陽離子交換色譜柱。本文主要探討組分在SCX柱上的保留行為?；谑杷饔玫纳V行為S
2019
06-26

分析陰陽離子交換色譜柱的產(chǎn)品特點(diǎn)
分析陰陽離子交換色譜柱的產(chǎn)品特點(diǎn)陰陽離子交換色譜柱主要由液相輸液泵帶示差檢測器組成主要單元，配好帶GPC的色譜工作站和聚合物基質(zhì)的。色譜柱溫箱和在線脫氣機(jī)為選配單元，因?yàn)槭静顧z測器對氣泡比較敏感，對柱溫的要求比較高，因此在預(yù)算夠的情況下建議配置。待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動(dòng)相，流動(dòng)相帶著樣品進(jìn)入色譜柱，故流動(dòng)相又稱為載氣。載氣在分析過程中是連續(xù)地以一定流速流過色譜柱的；而樣品則只是一次一次地注入，每注入一次得到一次分析結(jié)果。樣品在色譜柱中得以分離是基于熱力學(xué)性質(zhì)的差異。固定相與樣品中的各組分
2019
05-30

疏水色譜柱的影響因素有哪些？
疏水色譜柱是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同，用流動(dòng)相洗脫時(shí)，各組分遷移速度不同而達(dá)到分離的目的。流動(dòng)相一般為pH6-8的鹽水溶液，具有對蛋白質(zhì)的回收率高，蛋白質(zhì)變性可能性小等優(yōu)勢。由于流動(dòng)相中不使用有機(jī)溶劑，也有利于蛋白質(zhì)保持固有的活性。疏水層析的原理*不同于離子交換層析或凝膠過濾層析等技術(shù)，使該技術(shù)與后兩者經(jīng)常聯(lián)合使用來分離復(fù)雜的生物樣品。目前該技術(shù)主要應(yīng)用領(lǐng)域是在蛋白質(zhì)的純化方面，成為血清蛋白、膜結(jié)合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等，以及一些藥物分子，甚至細(xì)胞等分離時(shí)的有效手段。疏水色
2019
05-29

生物分析色譜柱的接頭介紹
生物分析色譜柱的接頭介紹在不同供應(yīng)商的液相色譜儀、液相色譜柱或接頭之間來回切換時(shí)，尤其需要重視接頭。不同供應(yīng)商的接頭幾何形狀略有不同，因此對不同液相色譜柱采用同一種已裝配的接頭可能無法實(shí)現(xiàn)的連接。毛細(xì)管從密封墊圈中伸出過長。由于接頭不夠牢固，這樣可能導(dǎo)致泄漏。有時(shí)泄漏非常明顯，會迅速觸發(fā)泄漏傳感器并中斷運(yùn)行；但有時(shí)泄漏非常緩慢，難以察覺，尤其對于有機(jī)流動(dòng)相，溶劑在觸發(fā)泄漏傳感器之前可能已經(jīng)蒸發(fā)，導(dǎo)致譜圖結(jié)果異常。毛細(xì)管未延伸出密封墊圈足夠長，在毛細(xì)管端部和色譜柱頭之間形成空隙。這種死體積或混合室
2019
05-27

生物分析色譜柱實(shí)驗(yàn)中易發(fā)生降解，原因幾何？
生物分析色譜柱實(shí)驗(yàn)中易發(fā)生降解，原因幾何？某些補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品在HCl中易發(fā)生降解，特別是谷氨酰胺和天冬酰胺，正因?yàn)槿绱耍酝ǔＪ褂萌ルx子水進(jìn)行配制，也就是說標(biāo)準(zhǔn)配制方法不同。正確做法是將補(bǔ)充氨基酸溶解于去離子水中，如果將它們與其他氨基酸混合使用，則需要注意它們?nèi)芙庥谙←}酸中，因此需要快速使用。此外，還注意到其他氨基酸將在酸水解條件下發(fā)生降解。其中包括色氨酸和4-羥基脯氨酸。然而，它們的降解機(jī)理不同。請注意兩種氨基酸中的酰胺基團(tuán)。當(dāng)這些基團(tuán)暴露在酸中時(shí)，將水解釋放出氨。那么機(jī)理的來源究竟是什么
2019
05-27

離子交換色譜的優(yōu)點(diǎn)和常見問題介紹
離子交換色譜法是通過試樣離子在離子交換劑(固相)和淋洗液(液相)之間的分配系數(shù)不同，從而使欲測組分與干擾組分達(dá)到分離的一種固-液分離法。該色譜法實(shí)際是離子交換原理和液相柱色譜技術(shù)的有機(jī)結(jié)合，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于無機(jī)離子或有機(jī)離子混合物的分離，因此應(yīng)用范圍廣泛。離子交換色譜的優(yōu)點(diǎn)是:⑴具有開放性支持骨架，大分子可以自由進(jìn)入和迅速擴(kuò)散，故吸附容量大。⑵具有親水性，對大分子的吸附不大牢固，用溫和條件使可以洗脫，不致引起蛋白質(zhì)變性或酶的失活。⑶多孔性，表面積大、交換容量大，回收率高，可用于分離和制備。離子交換
2019
05-23

凝膠滲透色譜優(yōu)點(diǎn)及其維護(hù)保養(yǎng)
凝膠滲透色譜也稱為體積排除色譜或尺寸排除色譜，是液相色譜的一個(gè)分支，是高聚物表征的重要方法之一。不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。凝膠滲透色譜的優(yōu)點(diǎn)有哪些？（1）全部組分均在溶劑分子洗脫之前洗脫下來，分離時(shí)間短。（2）可以預(yù)測洗脫時(shí)間，可以連續(xù)進(jìn)樣。（3）凝膠色譜的分離過程不依靠分子間作用力，一般情況下，沒有強(qiáng)保留的分子累積在色譜柱，所以分離時(shí)試樣組分不會丟失，柱的使用壽命也會延長。（4）保留時(shí)間短，色譜峰窄，容易檢測。凝膠滲透色譜的保養(yǎng)維
2019
05-20

離子色譜儀的原理和操作要點(diǎn)
離子色譜是液相色譜的一種，是分析離子的一種液相色譜方法。離子色譜法作為傳統(tǒng)的分離分析方法，具有分析速度快、檢測靈敏度高、選擇性好，能同時(shí)分離多種離子并能將一些非離子物質(zhì)轉(zhuǎn)變成離子性物質(zhì)進(jìn)行測定等優(yōu)點(diǎn)。離子色譜儀的基本原理：分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換和分析物溶質(zhì)對交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽離子的分離。離子色譜儀的操作要點(diǎn)：1．使用環(huán)境條件：相對濕度：﹤85%，工作環(huán)境溫度：15—30℃，電源電壓：220±10%，
2019
05-14

C4反相色譜柱的優(yōu)點(diǎn)介紹
C4反相色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的反相色譜柱。使用3微米粒徑的硅膠填料，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長及表面鍵合密度，可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實(shí)現(xiàn)快速分析。C4反相色譜柱的優(yōu)點(diǎn)介紹：1、定量結(jié)果更準(zhǔn)確，包括純度分析和穩(wěn)定性分析。2、靈敏度更高，檢測下限更低，對低濃度雜質(zhì)有更強(qiáng)的檢測能力。3、分離度更好，更有利于相鄰色譜峰的分離。4、色譜柱間重現(xiàn)性：指同一批次合成的填料之間的重現(xiàn)性。（1）柱床填充質(zhì)量控制：1）理論塔板數(shù)。2）色譜峰對稱。3）柱反壓。（2）
2019
05-06

體積排阻色譜（SEC）的分離原理介紹
體積排阻色譜（SEC）是一項(xiàng)使用水相洗脫液基于尺寸分離蛋白質(zhì)、寡核苷酸和其它復(fù)雜生物聚合物的技術(shù)，也被稱為凝膠色譜、凝膠過濾色譜或凝膠滲透色譜，它是快速分離不同分子量混合物的有效方法。體積排阻色譜的分離原理：分子的體積排阻，樣品組分和固定相之間原則上不存在相互作用，色譜柱的固定相是具有不同孔徑的多孔凝膠，只讓臨界直徑小于凝膠孔開度的分子進(jìn)入（保留），其孔徑大于溶劑分子，所以溶劑分子可以自由地出入。高聚物分子在溶液中呈無規(guī)則線團(tuán)，線團(tuán)的體積和分子量有一定的線性關(guān)系，對不同大小的溶質(zhì)分子可以滲透到不
2019
04-29

C18反相色譜柱的操作與清洗
C18反相液相色譜柱是一種常用的色譜柱產(chǎn)品，主要由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成，被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中。在c18反相液相色譜柱的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。使用時(shí)間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化，如不采取措施，將會縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。C18反相色譜柱操作步驟：1.平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高，用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑流速如果
2019
04-23

尺寸排阻色譜柱的特點(diǎn)與清洗方法
尺寸排阻色譜（SEC）是一種分析技術(shù)，可以按尺寸并根據(jù)從填有多孔硅膠的色譜柱中洗脫的情況來分離已溶解的大分子，用于測量蛋白質(zhì)分子量、結(jié)構(gòu)、大小及構(gòu)成。當(dāng)SEC與光散射、粘度計(jì)以及濃度檢測器相結(jié)合（稱為三重檢測）時(shí)，可測量分子量、分子大小和特性粘度，并生成關(guān)于大分子結(jié)構(gòu)、構(gòu)象聚集與支化方面的信息。通過使用SEC來測量分子量和其他特性，可以對蛋白質(zhì)、合成聚合物和多糖類之類的天然聚合物等分子進(jìn)行表征。尺寸排阻色譜的特點(diǎn)：1.保留時(shí)間是分子尺寸的函數(shù)，有可能提供分子結(jié)構(gòu)的某些信息。2.保留時(shí)間短，譜峰窄
2019
04-19

高溫凝膠滲透色譜儀的性能優(yōu)勢
凝膠滲透色譜不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。凝膠滲透色譜的分離原理：讓被測量的高聚物溶液通過一根內(nèi)裝不同孔徑的色譜柱，柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙（較大）和粒子內(nèi)的通孔（較?。．?dāng)聚合物溶液流經(jīng)色譜柱時(shí)，較大的分子被排除在粒子的小孔之外，只能從粒子間的間隙通過，速率較快；而較小的分子可以進(jìn)入粒子中的小孔，通過的速率要慢得多。經(jīng)過一定長度的色譜柱，分子根據(jù)相對分子質(zhì)量被分開，相對分子質(zhì)量大的在前面（即淋洗時(shí)間短），相對分子質(zhì)量小的在
2019
04-15

影響離子交換色譜保留行為的因素有哪些？
離子交換色譜是利用離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進(jìn)行分離。離子交換色譜技術(shù)常被用于蛋白質(zhì)、寡核苷酸、多肽、病毒、噬菌體、多糖等的純化。離子交換色譜的基本原理：離子交換色譜是蛋白純化技術(shù)中心常用的一種純化方法，其原理是指分離物質(zhì)所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結(jié)合，這種帶電分子和固定相之間的結(jié)合作用是可逆的，在改變PH或者用逐漸增加離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫時(shí)，離子交換劑上結(jié)合的物質(zhì)可與洗脫液中的離子
2019
04-08

親水作用色譜HILIC具有哪些優(yōu)勢特點(diǎn)？
親水作用色譜（HILIC）是反相色譜的重要補(bǔ)充，用于改善強(qiáng)極性物質(zhì)的保留和分離選擇性。HILIC模式下化合物的保留行為與正相色譜類似，而且由于HILIC使用含水流動(dòng)相，有效解決了正相色譜中水溶性物質(zhì)不溶于非水流動(dòng)相的難題。親水色譜柱的產(chǎn)品特點(diǎn)：●采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù)●采用*的化學(xué)健合技術(shù)可使HILIC固定相的表面具有酸性、中性和堿性的性質(zhì)●采用孔徑可控的超純硅膠●高的化學(xué)穩(wěn)定性，低固定相流失●色譜柱內(nèi)徑75µm到30mm，長度1cm到30cm●可提供克到千克級的填料●pH穩(wěn)定范圍
2019
04-02

氨基柱的正相和反相使用說明
氨基柱，全稱氨丙基鍵合硅膠色譜柱，不僅可以用于正反相還可以應(yīng)用于離子交換（弱陰離子交換柱）中。但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99：1)中。一、正相使用新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積，后換成流動(dòng)相。正相使用時(shí)，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要*脫氣

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