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2019
02-25

生物分析色譜柱的選擇
生物分析色譜柱的選擇生物分析色譜柱就是填裝有固定相的柱管。宏觀上，色譜柱是由柱管和填料組成，那么生物分析色譜柱的選擇就要從填料和柱管規(guī)格來(lái)選擇。1.填料的選擇：即根據(jù)化合物的屬性選擇適合其分離的色譜模式及固定相。2.柱規(guī)格選擇：生物分析色譜柱規(guī)格的選擇要從內(nèi)徑和柱長(zhǎng)兩個(gè)指標(biāo)來(lái)考慮。不同內(nèi)徑的色譜柱用途：2.1mm和3.0mm內(nèi)徑色譜柱一般用于超液相色譜分析UPLC（分析時(shí)間短，效率高）；4.6mm內(nèi)徑色譜柱一般用于常規(guī)液相色譜分析HPLC；10.0-300mm內(nèi)徑色譜柱一般用于制備色譜PreHP
2019
02-22

凝膠色譜柱主要用于相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試
凝膠色譜柱主要用于相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜柱主要用于高聚物的相對(duì)分子質(zhì)量分級(jí)分析以及相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)試。目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物,凝膠色譜柱又可分為凝膠過(guò)濾色譜(GFC
2019
01-15

凝膠滲透色譜儀氣路管的清洗
凝膠滲透色譜儀(GPC)，又稱排阻色譜法或凝膠過(guò)濾色譜法。它采用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、多孔性的固定相，利用試樣的組分分子對(duì)固定相的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi)部的滲透性的差異來(lái)分離各組分。是一種穩(wěn)定的分離方法。不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來(lái)分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。應(yīng)用：主要應(yīng)用在生物化學(xué)和高分子領(lǐng)域，具體如分子量的測(cè)定、成分分析、回收料的評(píng)估等。凝膠色譜的常用固定相有多孔型的半剛性凝膠和剛性凝膠兩大類。半剛性凝膠是以二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯，剛性凝膠則多采用剛性硅膠，流動(dòng)相可以使用水和
2018
11-15

一個(gè)合格的離子色譜柱應(yīng)該關(guān)注的基本參數(shù)
離子色譜柱是實(shí)驗(yàn)室常用的一種色譜耗材，那么我們?cè)谧鲞x擇色譜柱的時(shí)候，怎么選擇它的固定相呢，因?yàn)樯V柱的固定相關(guān)系到我們分離樣品的準(zhǔn)確性。選擇正確的固定相是確保氣相色譜方法成功的關(guān)鍵參數(shù)。因?yàn)榉治鑫锓肿优c流動(dòng)相之間的相互作用幾乎可以忽略不計(jì)，柱溫度和分析物與固定相之間的相互作用是支配分離選擇性的關(guān)鍵。使用溫度將進(jìn)一步在氣相色譜的理論和儀器/氣相色譜程序升溫章節(jié)中進(jìn)行討論。色譜固定相選擇的*原則是“相似相溶”原理，分離極性分析物時(shí)需要一個(gè)極性的固定相，反之亦然。固定相選擇的技巧已知(或經(jīng)驗(yàn)性證實(shí))，
2018
11-10

親水性色譜柱的特點(diǎn)介紹
親水性色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性，所以也可以作為一種通用C18柱使用。親水性色譜柱是專為親水性和極性化合物具有更強(qiáng)的保留能力和選擇性而設(shè)計(jì)的。典型的應(yīng)用是對(duì)生物分子、代謝物和藥物降解產(chǎn)物如有機(jī)酸、水溶性維生素、低聚糖、氨基酸以及小分子縮氨酸和小分子核苷等進(jìn)行分離。親水性色譜柱特點(diǎn)介紹：1．適度的表面覆蓋率和*的封尾2．對(duì)酸性、堿性和中性化合物具有良好的峰形3．親水性色譜柱能與100％水流動(dòng)相條件兼容4．在高含水量的流動(dòng)相中，對(duì)有機(jī)酸、縮氨酸、核苷和水溶性維他命等
2018
11-10

老化離子色譜柱是氣相應(yīng)用的一項(xiàng)常見工作
離子色譜柱老化的目的在于去除固定相表面不穩(wěn)定的固定相流失碎片或污染物，讓離子色譜柱為即將進(jìn)行的分析做好準(zhǔn)備。通常，新柱初次使用、離子色譜柱放置一段時(shí)間后再次使用、或離子色譜柱受到一定污染或損傷后都需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)睦匣?。離子色譜柱老化的一般步驟：1.首先使所有加熱部位（如進(jìn)樣口和檢測(cè)器）降溫；2.將切割好的毛細(xì)管柱接到進(jìn)樣口，開通載氣并保持適當(dāng)流速，將色譜柱出口端插入盛有甲醇或乙醇的燒杯，正常情況下應(yīng)能夠觀察有連續(xù)的氣泡冒出，否則應(yīng)及時(shí)檢查是否有漏氣、色譜柱斷裂、或進(jìn)樣口參數(shù)設(shè)置；3.用6倍柱體積（
2018
10-26

反相色譜的介紹及其影響因素
反相色譜法以被測(cè)的高分子為固定相、以惰性氣體為流動(dòng)相，為了測(cè)定需要，在流動(dòng)相中加入一些探針?lè)肿?，它們是揮發(fā)性的低分子。將探針?lè)肿幼⑷霘饣覛饣?，由載氣帶入色譜柱，測(cè)定它們?cè)趦上嘀械姆峙?，從而研究高分產(chǎn)的各種性質(zhì)，高分子與探針?lè)肿拥南嗷プ饔靡约案叻肿优c高分子間的相互作用。反相色譜是迄今在液相色譜中應(yīng)用廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相本質(zhì)上都是疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小程度來(lái)分離的，樣
2018
08-30

色譜柱的安裝和清洗
色譜柱的安裝1、請(qǐng)將液相色譜裝置中的流動(dòng)相*置換后再連接色譜柱。并且*排出流路內(nèi)的空氣。2、裝置內(nèi)的液體和所使用的流動(dòng)相不能相溶的情況下，請(qǐng)使用雙方都能相溶的液體做過(guò)渡。比如從水置換到氯仿的情況，就需要使用丙酮做過(guò)渡，才能*置換。3、將鹽溶液置換成有機(jī)溶劑的時(shí)候，需要通過(guò)純水、丙酮的順序來(lái)進(jìn)行置換。相反，從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)換成鹽溶液的情況下，需要通過(guò)丙酮、純水的順序置換。4、不僅僅是泵，流動(dòng)相流動(dòng)的所有流路都必須進(jìn)行置換。例如，注入樣品的情況，軟管內(nèi)的液體也需要置換。另外，如果使用壓力計(jì)等別的軟管的情
2018
08-02

離子色譜儀試驗(yàn)時(shí)背景太高,是什么造成的?
離子色譜儀因其快速、、靈敏而成為許多實(shí)驗(yàn)室分析陰離子的較好方法，如一次進(jìn)樣，20min可連續(xù)測(cè)定μg/L～數(shù)mg/L數(shù)量級(jí)的F-、BrO3-、Cl-、NO2-、Br-、N03-、HPO4-和SO4-等多種陰離子，如果是基體簡(jiǎn)單的試樣無(wú)需前處理，經(jīng)過(guò)濾后直接進(jìn)樣。也正因?yàn)榇?，一旦儀器出現(xiàn)故障，會(huì)給使用者造成極大的不便。這就要求使用者了解一些關(guān)于儀器日常維護(hù)的知識(shí)，遇有故障時(shí)能夠正確的判斷并及時(shí)排除。離子色譜儀在工作中經(jīng)常遇到以下幾種情況：諸如背景高、噪聲大、泵頭堵塞，有氣泡、峰形不好、分離度下降等
2018
05-29

東曹生物詳解離子色譜儀的流動(dòng)相
流動(dòng)相（又稱為淋洗液）是離子色譜儀中容易忽略，也是容易出問(wèn)題的地方。離子色譜儀使用較多的溶液就是流動(dòng)相，如果流動(dòng)相處理得當(dāng)，那么離子色譜中能夠減少一半以上的維修工作。離子色譜儀的流動(dòng)相基本以水相體系為主，離子色譜的水一般建議使用高純水，如果僅僅為一般性實(shí)驗(yàn)（如mg/L級(jí)別離子分析），則娃哈哈純凈水等也是可以使用的，但分析低含量（µg/L）級(jí)別的離子還是需要18.2MΩ/cm的高純水，有時(shí)候不能相信國(guó)產(chǎn)的某些純水機(jī)，其電導(dǎo)顯示有一定的誤差。如需要判斷水是否可以使用，可以以純凈水為流動(dòng)相，不經(jīng)過(guò)色譜
2018
05-28

關(guān)于離子色譜柱的固定液涂漬要求說(shuō)明
離子色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外，還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下，填料粒度20um時(shí)，干法填充制備柱較為合適；顆粒必須指出，離子色譜柱的獲得，裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié)，但根本問(wèn)題還在于填料本身性能的優(yōu)劣，以及配套的色譜儀系統(tǒng)的的結(jié)構(gòu)是否合理。一根好的離子色譜柱不僅與選擇合適的固定液和擔(dān)體有重要關(guān)系，而且固定液能否在擔(dān)體表面上分布呈一層薄而均勻的膜，以及與固定相的填允情況有密切的關(guān)系。為了在擔(dān)體表面得到一層薄而均勻的液膜，固定液的涂漬一般采用靜態(tài)法。以靜態(tài)法涂漬固定液的過(guò)稈如下:根據(jù)需要稱取一定量
2018
05-04

液相色譜柱的使用
隨著社會(huì)發(fā)展，HPLC也越來(lái)普遍。而液相色譜柱就是篩選分析方法開發(fā)的*步，色譜柱也是HPLC分析方法的核心。關(guān)于液相色譜柱的使用步驟和注意事項(xiàng)下面做簡(jiǎn)單介紹。液相色譜柱的使用：1、樣品的前處理a、使用流動(dòng)相溶解樣品。b、使用預(yù)處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。c、使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。2、流動(dòng)相的配制液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中
2018
05-02

反相色譜柱的優(yōu)點(diǎn)和影響因素
液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱。正相色譜柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相色譜柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料柱等。反相色譜柱的優(yōu)點(diǎn)是固定相穩(wěn)定，應(yīng)用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料，使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動(dòng)相的PH值小于2時(shí)，會(huì)導(dǎo)致鍵合相的水解；當(dāng)PH值
2018
04-27

凝膠滲透色譜儀的結(jié)構(gòu)組成介紹
凝膠滲透色譜不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定，而且可以用來(lái)分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。凝膠滲透色譜儀的結(jié)構(gòu)組成介紹：(1)溶劑儲(chǔ)存器和過(guò)濾脫氣裝置溶劑儲(chǔ)存器用來(lái)存儲(chǔ)凝膠滲透色譜的流動(dòng)相，一般由玻璃、不銹鋼或聚四氟乙烯塑料等耐腐蝕材料做成，容積為0.5～2L，常用一根帶有鑄鐵過(guò)濾頭(1Oμm)的聚四氟乙烯導(dǎo)管將溶劑引入泵系統(tǒng)。過(guò)濾脫氣裝置的作用是去除溶劑中溶解的氣體。溶劑中通常會(huì)溶有一些氣體，當(dāng)溶劑進(jìn)入泵或分離柱后，由于溫度和壓力的變化，溶劑中所溶的氣體會(huì)生成氣泡而停留在泵或色譜柱
2018
04-23

離子交換色譜柱的選擇
離子交換色譜柱既有聚合物基質(zhì)色譜柱也有硅膠基質(zhì)色譜柱。然而，不像在反相的領(lǐng)域硅膠柱占絕大部分占有率，離子交換模式中聚合物色譜柱和硅膠色譜柱使用頻率相近。離子交換色譜柱在蛋白質(zhì)，核酸等生物化學(xué)領(lǐng)域被廣泛利用。絕大多數(shù)重組蛋白純化都要用到離子交換。離子交換色譜的基礎(chǔ)是高分辨率，可以直接放大規(guī)模應(yīng)用在工業(yè)上，柱再生容易，還可以使蛋白濃縮。離子交換色譜柱的選擇：1、介質(zhì)的選擇離子交換介質(zhì)首先要考慮目的分子的大小，因?yàn)槟康姆肿訒?huì)影響其接近介質(zhì)上的帶電功能集團(tuán)，因此也會(huì)影響介質(zhì)對(duì)目的分子的動(dòng)力載量，從而影響
2018
04-18

離子色譜儀與ICP優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比
離子色譜儀與ICP優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比1.離子色譜儀:主要用于環(huán)境樣品的分析,包括地面水、飲用水、雨水、生活污水和工業(yè)廢水、酸沉降物和大氣顆粒物等樣品中的陰陽(yáng)離子,與微電子工業(yè)相關(guān)的水和試劑中痕量雜質(zhì)的分析。2.陽(yáng)離子:LI+,Na+,NH4+,K+,Ca+,Mg2+,Cu2+,Zn2+,Fe2+；3.陰離子:F-,CL-,Br-,NO2-,PO43-,NO3-等；4.一般來(lái)說(shuō)用離子色譜儀分析常見的陰離子優(yōu)勢(shì)還是比較大的,相對(duì)于ICPP來(lái)說(shuō)速度快,標(biāo)一次標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定情況下可以持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),一個(gè)樣品一針打進(jìn)去,大
2018
04-16

TSK色譜柱相關(guān)介紹
TSK色譜柱是一款疏水作用模式(HIC)的色譜柱，由于采用了粒徑2.5微米的無(wú)孔型填料，對(duì)樣品中的疏水性物質(zhì)具有分離速度快、回收率高等特點(diǎn)。TSK色譜柱中的介質(zhì)，是實(shí)驗(yàn)室生物分子分析色譜所通用的。柱填料的材質(zhì)是硅膠或者聚合物基體，粒徑分布范圍為2.5-20μm。鍵合了二醇基的硅膠顆粒充填，主要針對(duì)蛋白質(zhì)、抗體、酶等生物大分子的分離分析而開發(fā)設(shè)計(jì)。TSK色譜柱通過(guò)優(yōu)化填料的粒徑和細(xì)孔容積，實(shí)現(xiàn)了色譜柱性能的提升，和色譜柱操作壓強(qiáng)的降低。特別是對(duì)單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高，
2018
04-10

探究離子色譜儀各零部件的作用
離子色譜儀原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換和分析物溶質(zhì)對(duì)交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽(yáng)離子的分離。離子色譜儀零部件的作用電導(dǎo)檢測(cè)器微處理器控制的信號(hào)處理功能和新型的電導(dǎo)池設(shè)計(jì)使電導(dǎo)檢測(cè)器S3115成為現(xiàn)有利用離子色譜儀進(jìn)行離子測(cè)定反應(yīng)zui靈敏的儀器。微電導(dǎo)池的溫度可保持極度穩(wěn)定，無(wú)論配合抑制反應(yīng)柱還是背景電導(dǎo)的直接電抑制，它的快速反應(yīng)和持久穩(wěn)定性都令人稱贊。動(dòng)態(tài)范圍0.05μs—10ms,*和極低濃度離子測(cè)定可在同一次分析中
2018
04-02

離子色譜儀輸送系統(tǒng)中輸液泵的常見種類
離子色譜儀輸送系統(tǒng)中的動(dòng)力主要由輸液泵提供，輸液泵的作用是使流動(dòng)相以相對(duì)穩(wěn)定的流量或壓力通過(guò)流路系統(tǒng)。流量或壓力的穩(wěn)定將直接影響基線的穩(wěn)定和分析結(jié)果的重現(xiàn)性。一般輸液泵的流量可以設(shè)定在0.01~10.OmL/min之間，對(duì)于一般分析工作，0.5~2.OmL/min的流量zui為常用。輸液泵在較低流量時(shí)，通常要求壓力能夠達(dá)到3OMPa。耐高壓的能力是衡量離子色譜儀性能的一個(gè)重要指標(biāo)。目前，離子色譜儀的耐高壓性能越來(lái)越好。輸液泵可作為液相色譜分析的輸液泵使用，作為離子色譜儀的重要部件之一，它提供動(dòng)力
2018
03-30

影響色譜柱性能因素有哪些？
色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。影響色譜柱性能因素有：一、物理因素：(1)硅膠純度：硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。(2)色譜柱尺寸填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑，增加色譜柱長(zhǎng)度，可以在一定程度上提高柱效，但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散，同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴(kuò)散，但壓力較

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