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            上海遠慕生物科技有限公司
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            原核生物mRNA的特點介紹2023/10/07
            在原核細胞內(nèi),參與翻譯的mRNA具有以下特點:(1)具有多個開放閱讀框(ORF),即多順反子,意味著同一條mRNA可以編碼多個蛋白。特別注意可讀框之間不重疊(除移碼翻譯涉及終止密碼子和起始密碼子的2個堿基重疊)。(2)具有較為保守的核糖體結(jié)合位點(RBS)GGAGG,位置大概在起始密碼子上游的3~9個堿基。(3)自身可通過RBS招募小亞基核糖體RNA(16S·rRNA)。(4)存在移碼編譯。在一些情況下,第一個ORF的終止密碼子UGA和第二個ORF的AUG重疊,形成一個序列AUGA。當核糖體遇到
            DNA限制酶的功能和作用介紹2023/10/07
            限制性核酸內(nèi)切酶(以下簡稱限制酶):限制酶主要存在于微生物(細菌、霉菌等)中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點上切割DNA分子。是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵的核酸酶(“分子手術(shù)刀”)。發(fā)現(xiàn)于原核生物體內(nèi),現(xiàn)已分離出100多種,幾乎所有的原核生物都含有這種酶。是重組DNA技術(shù)和基因診斷中重要的一類工具酶。例如,從大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的一種限制酶只能識別GAATTC序列,并在G和A之間將這段序列切開。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了200多種限制酶,它們的切點各不相同。蘇云金芽孢桿菌中的抗蟲
            生物指示劑的重要性與驗證步驟2023/09/28
            生物指示劑的重要性:1、生物指示劑常用于制藥工藝中滅菌設(shè)備的性能確認以及氣體滅菌法、過濾除菌法的滅菌程序的驗證。生物指示劑是指一類特定微生物經(jīng)過特定方法制備的生物制品,這些特定微生物比普通微生物具有更強的耐受性。2、在滅菌程序驗證中,盡管可通過滅菌過程某些參數(shù)的監(jiān)控來評估滅菌效果,但生物指示劑的被滅殺程度,則是評價一個滅菌程序有效性更加直觀的的指標。3、在生物指示劑驗證試驗中,需確定孢子在實際滅菌條件下的D值,并測定孢子的純度和數(shù)量。驗證時,生物指示劑的微生物用量應(yīng)比日常檢出的微生物污染量大,耐
            定量菌株的主要形態(tài)、使用步驟和注意事項2023/09/28
            現(xiàn)在行業(yè)中所應(yīng)用的定量菌株種類是非常多的,并且不同種類的菌株所呈現(xiàn)的狀態(tài)都是不一樣的,那么主要有哪些形態(tài)呢?分別是典型類、大腸菌樣型、粗糙型、黏液型、以及侏儒型等等這幾種形態(tài)。我們在使用它的時候,還要注意使用的步驟,以及使用時的注意事項,下文中遠慕就為大家詳細介紹了這三個關(guān)于定量菌株的知識點,感興趣的朋友們一起來看看吧!定量菌株的主要形態(tài):1、典型類此類定量菌株的菌落不規(guī)則,菌落的邊緣像傘狀一樣伸展。2、大腸菌樣型此類定量菌株的菌落圓形凸起,無色透明,似大腸埃希菌菌落。3、粗糙型此類定量菌株的菌
            bca法測蛋白濃度時,樣品不溶解分析2023/09/27
            bca法測蛋白濃度時,樣品不溶解時按照以下方法解決操作。BCA蛋白定量法是一種快速靈敏、穩(wěn)定可靠的蛋白定量測定方法,其測定范圍是10-2000ug/ml,是比Lowry法更*的專用于檢測總蛋白質(zhì)含量的產(chǎn)品。BCA蛋白定量測定方法:(96孔板)1、配制BCA工作液:根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積試劑A,1體積試劑B配制適量BCA工作液,充分混勻。2、將蛋白標準品按0,1,2,4,6,8,10微升加到96孔板的蛋白標準品孔中,加滅菌雙蒸水補足到10微升;取10微升待測樣品加入96孔板。每個測定要做
            DNA提取中各類試劑的作用2023/09/27
            Tris-HCL:緩沖體系。提供穩(wěn)定pH;NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破壞DNA的結(jié)構(gòu);EDTA:Ca2+Mg2+的螯合劑,抑制DNase活性;SDS:使蛋白變性,促進蛋白質(zhì)和DNA的分離;巰基乙醇:抗氧化劑,防止酚氧化成醌,保護DNA;也有人說可以用來消泡;醋酸鉀:鉀離子置換SDS的鈉離子,形成不溶于水的PDS,將大量蛋白同步沉淀下來。氯仿:異戊醇:使蛋白變性。氯仿的作用是變性劑、抽提脂溶性物質(zhì);異戊醇作用是A.降低表面張力、阻止氣泡的產(chǎn)生;B.有助于分相(使離心后水相、有機
            影響革蘭染色法實驗結(jié)果的因素分析2023/09/26
            1、操作因素1.1涂片太厚在涂片時細菌挑的太多,沒法分開,在脫色時就不能將第一步染上的結(jié)晶紫的顏色脫去,可能會使革蘭陰性菌也出現(xiàn)紫色,誤認為革蘭陽性菌。1.2脫色時間陽性菌透性小,不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色;但這是在固定的時間條件下的結(jié)果,如果延長脫色時間,也會使脫色劑滲透進陽性菌的細胞壁中,使染上的結(jié)晶紫脫去顏色,最后染上復(fù)紅的顏色,變成革蘭陰性菌。而脫色時間太短的話又會使陰性菌染上的結(jié)晶紫不能wan全脫色,出現(xiàn)紫色,誤認為革蘭陽性菌。1.3固定方法固定不僅能殺死細菌,改變細菌對染料的通
            質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化實驗操作步驟2023/09/26
            實驗方法原理轉(zhuǎn)化活性是檢測質(zhì)粒生物活性的重要指標,在基因克隆技術(shù)中,轉(zhuǎn)化(transformation)是特指以質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組質(zhì)粒DNA(包括人工染色體)導(dǎo)入細胞的過程,是一種常用的基本實驗技術(shù)。該過程的關(guān)鍵是受體細胞的遺傳學(xué)特性及其所處的生理狀態(tài),用于轉(zhuǎn)化的受體細胞一般是限制修飾系統(tǒng)缺陷的變異株,以防止對導(dǎo)入的外源的切割,用R-M-符號表示。此外,為了便于檢測,受體菌一般應(yīng)具有可選擇的標記(例如抗生素敏感性、顏色變化等)。但質(zhì)粒DNA能否進入受體細胞則取決于該細胞是否處于感受
            自然菌種選育的步驟簡介2023/09/25
            自然選育的步驟主要是:采樣,增長培養(yǎng),培養(yǎng)分離和篩選等。采樣篩選的菌種采集的對象以土壤為主,也可以是植物、腐敗物品和某些水域等。土壤是微生物的匯集地,從土壤中幾乎可以分離到任何所需的微生物,故土壤往往是首shou選的采集目標。微生物的營養(yǎng)需求和代謝類型與生長環(huán)境有很大關(guān)系。富集培養(yǎng)由于采集樣品中各種微生物數(shù)量有很大差異,若估計到要分離的菌種數(shù)量不多時,就要人為增加分離的概率,增加該菌種的數(shù)量,稱為富集培養(yǎng)。純種培養(yǎng)盡管通過增長培養(yǎng)的效果很好,但是得到的微生物還是處于混雜狀態(tài),因為樣品中本身含有許
            實驗室化學(xué)試劑管理要點2023/09/25
            實驗室化學(xué)試劑的種類繁多,化學(xué)藥品大多具有一定的毒性和危險性,對其加強管理無疑是實驗室管理人員的首要工作。接下來遠慕生物與大家一起了解化學(xué)試劑管理注意事項,希望大家可以做個參考。1、易燃易爆化學(xué)試劑一般將閃點在25℃以下化學(xué)試劑列入易燃化學(xué)試劑,它們多是極易揮發(fā)的液體,遇明火即可燃燒。閃點越低,越易燃燒。使用易燃化學(xué)試劑時絕不能使用明火,加熱也不能直接用加熱器,一般不用水浴加熱。在使用易燃化學(xué)試劑的實驗人員,要穿好必要的防護用具,最好戴上防護眼鏡。2、有毒化學(xué)試劑一般化學(xué)試劑對人體都有毒害,在使
            血清和血漿的制備方法2023/09/22
            血清和血漿均是不含細胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板,血漿則含有凝血因子,它們的制備方法如下:1、血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3000rpm,離心5~10min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細胞成分),分裝備用。2、血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液=1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件
            IgM抗體與IgG抗體的區(qū)別2023/09/22
            IgM和IgG的區(qū)別是:作用不同、功能不同以及生理變化不同。一、作用不同1、IgM是免疫球蛋白M,根據(jù)結(jié)構(gòu)的不同將免疫球蛋白分為五種,IgM是人的免疫球蛋白之一。2、IgG是免疫球蛋白G是血清主要的抗體成分,約占血清Ig的75%。其中40~50%分布于血清中,其余分布在組織中。二、功能不同1、IgG的功能作用主要在機體免疫中起保護作用,大多數(shù)抗菌、抗病毒;應(yīng)對麻疹、甲型肝炎等,能有效地預(yù)防相應(yīng)的感染性疾病。2、IgM以膜結(jié)合型(mIgM)表達于細胞表面,構(gòu)成B細胞抗原受體(BCR)。分泌型IgM
            酸堿指示劑的制備方法2023/09/21
            酸堿指示劑指的是用于酸堿滴定的指示劑,英文名稱:acid-baseindicator。酸堿指示劑一般是有機弱酸或弱堿,它們的共軛酸堿對具有不同結(jié)構(gòu)而呈現(xiàn)不同顏色。當溶液的pH改變時,指示劑得到質(zhì)子,由堿式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹椝崾?,或失去質(zhì)子,由酸式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹棄A式,由于其結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變而發(fā)生顏色的變化。有許多植物色素在不同pH值的溶液里會呈現(xiàn)出不同的顏色。因此,每個地方都可以就地取材,自制一些酸堿指示劑。下面介紹一些自制的方法:1.從紅蘿卜皮中提取酸堿指示劑:刮下紅蘿卜的紅皮后,用95%的酒精浸泡一天左右,過濾
            微生物染色步驟和染色方法介紹2023/09/21
            一、制片和染色的基本程序微生物的染色方法很多,各種方法應(yīng)用的染料也不盡相同,但是一般染色都要通過制片及一套染色操作程序。1、制片在干凈的載玻片上滴上一滴蒸餾水,用接種環(huán)進行無菌操作,挑取培養(yǎng)物少許,置載玻片的水滴中,與水混合做成懸液并涂成直徑約1厘米的薄層,為避免因菌數(shù)過多聚成集團,不利觀察個體形態(tài),可在載玻片之一側(cè)再加一滴水,從已涂布的菌液中再取一環(huán)于此水滴中進行稀釋,涂布成薄層,若材料為液體培養(yǎng)物或固體培養(yǎng)物中洗下制備的菌液,則直接涂布于載玻片上即可。2、自然干燥涂片在室溫下使其自然干燥,有
            常用化學(xué)抑制劑的種類和功能2023/09/20
            常用抑制劑有:硫化鈉、硫酸鋅、氰qing化鈉、重鉻酸鉀、水玻璃、石灰、黃血鹽、單寧、淀粉(糊精)、羧甲基纖維素等。硫化鈉硫化鈉是有色金屬氧化礦的活化劑,當添加量足夠大時又是硫化礦的抑制劑。硫化鈉的制取是以煤、木碳等燃燒作為還原性氣體還原硫酸鈉(Na2SO4)。反應(yīng)式為:Na2SO4+2C=Na2S+2CO2↑硫化鈉在浮選作業(yè)中做為硫化礦的抑制劑使用,在選鉬的生產(chǎn)實踐中利用硫化鈉抑制黃鐵礦,用煤油為捕收劑浮選輝鉬礦,由于輝鉬礦的天然可浮性好不受硫化鈉的抑制,硫化鈉使黃鐵礦受到抑制,經(jīng)過幾次精選得到
            淺談一下RNA生物合成的抑制劑2023/09/20
            一、堿基類似物有些人工合成的堿基類似物能干擾和抑制核酸的合成。作用方式有以下兩類:(一)作為代謝拮抗物,直接抑制核苷酸生物合成有關(guān)酶類。如6-巰基嘌呤進入體內(nèi)后可轉(zhuǎn)變?yōu)閹€基嘌呤核苷酸,抑制嘌呤核苷酸的合成??勺鳛榭拱┧幬铮委熂毙园籽〉?。此類物質(zhì)一般需轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的核苷酸才能表現(xiàn)出抑制作用。(二)進入核酸分子,形成異常RNA或DNA,影響核酸的功能并導(dǎo)致突變。5-氟尿嘧啶類似尿嘧啶,可進入RNA,與腺嘌呤配對或異構(gòu)成烯醇式與鳥嘌呤配對,使A-T對轉(zhuǎn)變?yōu)镚-C對。因為正常細胞可將其分解,而癌細胞不
            質(zhì)粒提取試劑盒中各溶液配方及作用介紹2023/09/19
            提質(zhì)粒是分子生物學(xué)中基本,easy的實驗。wan全不需要借助大腦,直接照著提取試劑盒中的操作說明傻瓜操作即可(其實應(yīng)該由機器人在實驗室中操作這些簡單卻耗時的實驗)。盡管操作簡單,提質(zhì)粒卻也是一個比較重要的步驟,提出質(zhì)粒的質(zhì)量和數(shù)量將直接決定著后續(xù)實驗室的成敗。當我們按照試劑盒中操作說明進行操作時,我們會看到P1,P2,N3,PE,EB等不同的溶液(不同試劑盒可能標識不同)。那么大家是否知道每瓶溶液中裝的什么?它們在質(zhì)粒提取過程中的作用又是怎樣的?質(zhì)粒提取采用的是強堿裂解法(alkalinelys
            如何配制測ph值的標準溶液2023/09/19
            1.從當?shù)氐幕瘜W(xué)試劑店購買二級pH標準物質(zhì),幾角錢一包,通常買三種:磷酸二氫鉀(6.86pH)、磷苯二甲酸氫鉀(4.00pH)、硼砂(9.18pH),每包配有溫度-pH表;2.使用新鮮無污染的蒸餾水;3.使用檢定合格Aji或B級250ml容量瓶,將少量蒸餾沖入標準物質(zhì)袋子,溶解后倒入容量瓶;4.用少量蒸餾水反復(fù)洗幾次標準物質(zhì)袋子,殘液倒入容量瓶;5.容量瓶加蒸餾水至250毫升處,反復(fù)搖晃幾下后放幾個小時后就可用了。PH值名詞解釋:pH值,亦稱氫離子濃度指數(shù)、酸堿值,是溶液中氫離子活度的一種標度,
            遠慕分享細菌分離純化的詳細方法2023/09/18
            平板劃線分離,在平板培養(yǎng)出單個細菌菌落后可以做鏡檢觀察。稀釋倒平板法:先把微生物懸液作一系列的稀釋,分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時間即可出現(xiàn)菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。培養(yǎng)基與菌種分離培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作
            核酸分離與純化的原則、步驟2023/09/18
            磁珠提核酸磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質(zhì)等其細胞中其他物質(zhì)分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。核酸分離與純化的原則核酸在細胞中總是與各種蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等生物大分子物質(zhì)分開。在分離核酸時應(yīng)遵循以下原則:保證核酸分子一級結(jié)構(gòu)的完整性;排除其他分子污染。核酸分離與純化的步驟大多數(shù)核酸分離與純化的方法一般都包括了細胞裂解、酶處理、核酸與其他生物大分子物質(zhì)分離、核酸純
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