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						上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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            原核生物mRNA的特點(diǎn)介紹2023/10/07
            
					
            
				在原核細(xì)胞內(nèi)，參與翻譯的mRNA具有以下特點(diǎn)：（1）具有多個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORF），即多順?lè)醋?，意味著同一條mRNA可以編碼多個(gè)蛋白。特別注意可讀框之間不重疊（除移碼翻譯涉及終止密碼子和起始密碼子的2個(gè)堿基重疊）。（2）具有較為保守的核糖體結(jié)合位點(diǎn)（RBS）GGAGG，位置大概在起始密碼子上游的3~9個(gè)堿基。（3）自身可通過(guò)RBS招募小亞基核糖體RNA（16S·rRNA）。（4）存在移碼編譯。在一些情況下，第一個(gè)ORF的終止密碼子UGA和第二個(gè)ORF的AUG重疊，形成一個(gè)序列AUGA。當(dāng)核糖體遇到
					
            
				
            
								
            
					
            DNA限制酶的功能和作用介紹2023/10/07
            
					
            
				限制性核酸內(nèi)切酶（以下簡(jiǎn)稱限制酶）：限制酶主要存在于微生物（細(xì)菌、霉菌等）中。一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵的核酸酶（“分子手術(shù)刀”）。發(fā)現(xiàn)于原核生物體內(nèi)，現(xiàn)已分離出100多種，幾乎所有的原核生物都含有這種酶。是重組DNA技術(shù)和基因診斷中重要的一類工具酶。例如，從大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的一種限制酶只能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間將這段序列切開(kāi)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了200多種限制酶，它們的切點(diǎn)各不相同。蘇云金芽孢桿菌中的抗蟲(chóng)
					
            
				
            
								
            
					
            生物指示劑的重要性與驗(yàn)證步驟2023/09/28
            
					
            
				生物指示劑的重要性：1、生物指示劑常用于制藥工藝中滅菌設(shè)備的性能確認(rèn)以及氣體滅菌法、過(guò)濾除菌法的滅菌程序的驗(yàn)證。生物指示劑是指一類特定微生物經(jīng)過(guò)特定方法制備的生物制品，這些特定微生物比普通微生物具有更強(qiáng)的耐受性。2、在滅菌程序驗(yàn)證中，盡管可通過(guò)滅菌過(guò)程某些參數(shù)的監(jiān)控來(lái)評(píng)估滅菌效果，但生物指示劑的被滅殺程度，則是評(píng)價(jià)一個(gè)滅菌程序有效性更加直觀的的指標(biāo)。3、在生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)中，需確定孢子在實(shí)際滅菌條件下的D值，并測(cè)定孢子的純度和數(shù)量。驗(yàn)證時(shí)，生物指示劑的微生物用量應(yīng)比日常檢出的微生物污染量大，耐
					
            
				
            
								
            
					
            定量菌株的主要形態(tài)、使用步驟和注意事項(xiàng)2023/09/28
            
					
            
				現(xiàn)在行業(yè)中所應(yīng)用的定量菌株種類是非常多的，并且不同種類的菌株所呈現(xiàn)的狀態(tài)都是不一樣的，那么主要有哪些形態(tài)呢？分別是典型類、大腸菌樣型、粗糙型、黏液型、以及侏儒型等等這幾種形態(tài)。我們?cè)谑褂盟臅r(shí)候，還要注意使用的步驟，以及使用時(shí)的注意事項(xiàng)，下文中遠(yuǎn)慕就為大家詳細(xì)介紹了這三個(gè)關(guān)于定量菌株的知識(shí)點(diǎn)，感興趣的朋友們一起來(lái)看看吧！定量菌株的主要形態(tài)：1、典型類此類定量菌株的菌落不規(guī)則，菌落的邊緣像傘狀一樣伸展。2、大腸菌樣型此類定量菌株的菌落圓形凸起，無(wú)色透明，似大腸埃希菌菌落。3、粗糙型此類定量菌株的菌
					
            
				
            
								
            
					
            bca法測(cè)蛋白濃度時(shí),樣品不溶解分析2023/09/27
            
					
            
				bca法測(cè)蛋白濃度時(shí),樣品不溶解時(shí)按照以下方法解決操作。BCA蛋白定量法是一種快速靈敏、穩(wěn)定可靠的蛋白定量測(cè)定方法，其測(cè)定范圍是10－2000ug/ml，是比Lowry法更*的專用于檢測(cè)總蛋白質(zhì)含量的產(chǎn)品。BCA蛋白定量測(cè)定方法：（96孔板）1、配制BCA工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積試劑A，1體積試劑B配制適量BCA工作液，充分混勻。2、將蛋白標(biāo)準(zhǔn)品按0,1,2,4,6，8,10微升加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加滅菌雙蒸水補(bǔ)足到10微升；取10微升待測(cè)樣品加入96孔板。每個(gè)測(cè)定要做
					
            
				
            
								
            
					
            DNA提取中各類試劑的作用2023/09/27
            
					
            
				Tris-HCL：緩沖體系。提供穩(wěn)定pH;NaCl：可以降低DNA在水中的溶解度，并且不破壞DNA的結(jié)構(gòu);EDTA:Ca2+Mg2+的螯合劑，抑制DNase活性;SDS：使蛋白變性，促進(jìn)蛋白質(zhì)和DNA的分離;巰基乙醇：抗氧化劑，防止酚氧化成醌，保護(hù)DNA;也有人說(shuō)可以用來(lái)消泡;醋酸鉀：鉀離子置換SDS的鈉離子，形成不溶于水的PDS,將大量蛋白同步沉淀下來(lái)。氯仿：異戊醇：使蛋白變性。氯仿的作用是變性劑、抽提脂溶性物質(zhì);異戊醇作用是A.降低表面張力、阻止氣泡的產(chǎn)生;B.有助于分相(使離心后水相、有機(jī)
					
            
				
            
								
            
					
            影響革蘭染色法實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素分析2023/09/26
            
					
            
				1、操作因素1.1涂片太厚在涂片時(shí)細(xì)菌挑的太多，沒(méi)法分開(kāi)，在脫色時(shí)就不能將第一步染上的結(jié)晶紫的顏色脫去，可能會(huì)使革蘭陰性菌也出現(xiàn)紫色，誤認(rèn)為革蘭陽(yáng)性菌。1.2脫色時(shí)間陽(yáng)性菌透性小，不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色；但這是在固定的時(shí)間條件下的結(jié)果，如果延長(zhǎng)脫色時(shí)間，也會(huì)使脫色劑滲透進(jìn)陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁中，使染上的結(jié)晶紫脫去顏色，最后染上復(fù)紅的顏色，變成革蘭陰性菌。而脫色時(shí)間太短的話又會(huì)使陰性菌染上的結(jié)晶紫不能wan全脫色，出現(xiàn)紫色，誤認(rèn)為革蘭陽(yáng)性菌。1.3固定方法固定不僅能殺死細(xì)菌，改變細(xì)菌對(duì)染料的通
					
            
				
            
								
            
					
            質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)操作步驟2023/09/26
            
					
            
				實(shí)驗(yàn)方法原理轉(zhuǎn)化活性是檢測(cè)質(zhì)粒生物活性的重要指標(biāo)，在基因克隆技術(shù)中，轉(zhuǎn)化（transformation）是特指以質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組質(zhì)粒DNA（包括人工染色體）導(dǎo)入細(xì)胞的過(guò)程，是一種常用的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該過(guò)程的關(guān)鍵是受體細(xì)胞的遺傳學(xué)特性及其所處的生理狀態(tài)，用于轉(zhuǎn)化的受體細(xì)胞一般是限制修飾系統(tǒng)缺陷的變異株，以防止對(duì)導(dǎo)入的外源的切割，用R-M-符號(hào)表示。此外，為了便于檢測(cè)，受體菌一般應(yīng)具有可選擇的標(biāo)記（例如抗生素敏感性、顏色變化等）。但質(zhì)粒DNA能否進(jìn)入受體細(xì)胞則取決于該細(xì)胞是否處于感受
					
            
				
            
								
            
					
            自然菌種選育的步驟簡(jiǎn)介2023/09/25
            
					
            
				自然選育的步驟主要是：采樣，增長(zhǎng)培養(yǎng)，培養(yǎng)分離和篩選等。采樣篩選的菌種采集的對(duì)象以土壤為主，也可以是植物、腐敗物品和某些水域等。土壤是微生物的匯集地，從土壤中幾乎可以分離到任何所需的微生物，故土壤往往是首shou選的采集目標(biāo)。微生物的營(yíng)養(yǎng)需求和代謝類型與生長(zhǎng)環(huán)境有很大關(guān)系。富集培養(yǎng)由于采集樣品中各種微生物數(shù)量有很大差異，若估計(jì)到要分離的菌種數(shù)量不多時(shí)，就要人為增加分離的概率，增加該菌種的數(shù)量，稱為富集培養(yǎng)。純種培養(yǎng)盡管通過(guò)增長(zhǎng)培養(yǎng)的效果很好，但是得到的微生物還是處于混雜狀態(tài)，因?yàn)闃悠分斜旧砗性S
					
            
				
            
								
            
					
            實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑管理要點(diǎn)2023/09/25
            
					
            
				實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑的種類繁多，化學(xué)藥品大多具有一定的毒性和危險(xiǎn)性，對(duì)其加強(qiáng)管理無(wú)疑是實(shí)驗(yàn)室管理人員的首要工作。接下來(lái)遠(yuǎn)慕生物與大家一起了解化學(xué)試劑管理注意事項(xiàng)，希望大家可以做個(gè)參考。1、易燃易爆化學(xué)試劑一般將閃點(diǎn)在25℃以下化學(xué)試劑列入易燃化學(xué)試劑，它們多是極易揮發(fā)的液體，遇明火即可燃燒。閃點(diǎn)越低，越易燃燒。使用易燃化學(xué)試劑時(shí)絕不能使用明火，加熱也不能直接用加熱器，一般不用水浴加熱。在使用易燃化學(xué)試劑的實(shí)驗(yàn)人員，要穿好必要的防護(hù)用具，最好戴上防護(hù)眼鏡。2、有毒化學(xué)試劑一般化學(xué)試劑對(duì)人體都有毒害，在使
					
            
				
            
								
            
					
            血清和血漿的制備方法2023/09/22
            
					
            
				血清和血漿均是不含細(xì)胞（包括血小板）等有形成分的血液液體部分，其主要區(qū)別是血清不含凝血因子和血小板，血漿則含有凝血因子，它們的制備方法如下：1、血清的制備：獲得的血液不能抗凝，盛于離心管或可以離心的器皿中，靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固，待血液凝固后，將其平衡后離心（一般為3000rpm，離心5～10min），得到的上清液即為血清，可小心將上清吸出（注意切勿吸出細(xì)胞成分），分裝備用。2、血漿制備：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑（抗凝劑：血液=1：9，將血液加到一定量后顛倒混勻，離心（離心條件
					
            
				
            
								
            
					
            IgM抗體與IgG抗體的區(qū)別2023/09/22
            
					
            
				IgM和IgG的區(qū)別是：作用不同、功能不同以及生理變化不同。一、作用不同1、IgM是免疫球蛋白M，根據(jù)結(jié)構(gòu)的不同將免疫球蛋白分為五種，IgM是人的免疫球蛋白之一。2、IgG是免疫球蛋白G是血清主要的抗體成分，約占血清Ig的75%。其中40～50%分布于血清中，其余分布在組織中。二、功能不同1、IgG的功能作用主要在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用，大多數(shù)抗菌、抗病毒；應(yīng)對(duì)麻疹、甲型肝炎等，能有效地預(yù)防相應(yīng)的感染性疾病。2、IgM以膜結(jié)合型（mIgM)表達(dá)于細(xì)胞表面，構(gòu)成B細(xì)胞抗原受體（BCR)。分泌型IgM
					
            
				
            
								
            
					
            酸堿指示劑的制備方法2023/09/21
            
					
            
				酸堿指示劑指的是用于酸堿滴定的指示劑，英文名稱：acid-baseindicator。酸堿指示劑一般是有機(jī)弱酸或弱堿，它們的共軛酸堿對(duì)具有不同結(jié)構(gòu)而呈現(xiàn)不同顏色。當(dāng)溶液的pH改變時(shí)，指示劑得到質(zhì)子，由堿式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹椝崾剑蚴ベ|(zhì)子，由酸式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹棄A式，由于其結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變而發(fā)生顏色的變化。有許多植物色素在不同pH值的溶液里會(huì)呈現(xiàn)出不同的顏色。因此，每個(gè)地方都可以就地取材，自制一些酸堿指示劑。下面介紹一些自制的方法：1.從紅蘿卜皮中提取酸堿指示劑：刮下紅蘿卜的紅皮后，用95%的酒精浸泡一天左右，過(guò)濾
					
            
				
            
								
            
					
            微生物染色步驟和染色方法介紹2023/09/21
            
					
            
				一、制片和染色的基本程序微生物的染色方法很多，各種方法應(yīng)用的染料也不盡相同，但是一般染色都要通過(guò)制片及一套染色操作程序。1、制片在干凈的載玻片上滴上一滴蒸餾水，用接種環(huán)進(jìn)行無(wú)菌操作，挑取培養(yǎng)物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成懸液并涂成直徑約1厘米的薄層，為避免因菌數(shù)過(guò)多聚成集團(tuán)，不利觀察個(gè)體形態(tài)，可在載玻片之一側(cè)再加一滴水，從已涂布的菌液中再取一環(huán)于此水滴中進(jìn)行稀釋，涂布成薄層，若材料為液體培養(yǎng)物或固體培養(yǎng)物中洗下制備的菌液，則直接涂布于載玻片上即可。2、自然干燥涂片在室溫下使其自然干燥，有
					
            
				
            
								
            
					
            常用化學(xué)抑制劑的種類和功能2023/09/20
            
					
            
				常用抑制劑有：硫化鈉、硫酸鋅、氰qing化鈉、重鉻酸鉀、水玻璃、石灰、黃血鹽、單寧、淀粉（糊精）、羧甲基纖維素等。硫化鈉硫化鈉是有色金屬氧化礦的活化劑，當(dāng)添加量足夠大時(shí)又是硫化礦的抑制劑。硫化鈉的制取是以煤、木碳等燃燒作為還原性氣體還原硫酸鈉（Na2SO4）。反應(yīng)式為：Na2SO4+2C=Na2S+2CO2↑硫化鈉在浮選作業(yè)中做為硫化礦的抑制劑使用，在選鉬的生產(chǎn)實(shí)踐中利用硫化鈉抑制黃鐵礦，用煤油為捕收劑浮選輝鉬礦，由于輝鉬礦的天然可浮性好不受硫化鈉的抑制，硫化鈉使黃鐵礦受到抑制，經(jīng)過(guò)幾次精選得到
					
            
				
            
								
            
					
            淺談一下RNA生物合成的抑制劑2023/09/20
            
					
            
				一、堿基類似物有些人工合成的堿基類似物能干擾和抑制核酸的合成。作用方式有以下兩類：（一）作為代謝拮抗物，直接抑制核苷酸生物合成有關(guān)酶類。如6-巰基嘌呤進(jìn)入體內(nèi)后可轉(zhuǎn)變?yōu)閹€基嘌呤核苷酸，抑制嘌呤核苷酸的合成?？勺鳛榭拱┧幬?，治療急性白血病等。此類物質(zhì)一般需轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的核苷酸才能表現(xiàn)出抑制作用。（二）進(jìn)入核酸分子，形成異常RNA或DNA，影響核酸的功能并導(dǎo)致突變。5-氟尿嘧啶類似尿嘧啶，可進(jìn)入RNA，與腺嘌呤配對(duì)或異構(gòu)成烯醇式與鳥(niǎo)嘌呤配對(duì)，使A-T對(duì)轉(zhuǎn)變?yōu)镚-C對(duì)。因?yàn)檎＜?xì)胞可將其分解，而癌細(xì)胞不
					
            
				
            
								
            
					
            質(zhì)粒提取試劑盒中各溶液配方及作用介紹2023/09/19
            
					
            
				提質(zhì)粒是分子生物學(xué)中基本，easy的實(shí)驗(yàn)。wan全不需要借助大腦，直接照著提取試劑盒中的操作說(shuō)明傻瓜操作即可（其實(shí)應(yīng)該由機(jī)器人在實(shí)驗(yàn)室中操作這些簡(jiǎn)單卻耗時(shí)的實(shí)驗(yàn)）。盡管操作簡(jiǎn)單，提質(zhì)粒卻也是一個(gè)比較重要的步驟，提出質(zhì)粒的質(zhì)量和數(shù)量將直接決定著后續(xù)實(shí)驗(yàn)室的成敗。當(dāng)我們按照試劑盒中操作說(shuō)明進(jìn)行操作時(shí)，我們會(huì)看到P1，P2，N3,PE，EB等不同的溶液（不同試劑盒可能標(biāo)識(shí)不同）。那么大家是否知道每瓶溶液中裝的什么？它們?cè)谫|(zhì)粒提取過(guò)程中的作用又是怎樣的？質(zhì)粒提取采用的是強(qiáng)堿裂解法（alkalinelys
					
            
				
            
								
            
					
            如何配制測(cè)ph值的標(biāo)準(zhǔn)溶液2023/09/19
            
					
            
				1.從當(dāng)?shù)氐幕瘜W(xué)試劑店購(gòu)買二級(jí)pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，幾角錢一包，通常買三種：磷酸二氫鉀（6.86pH）、磷苯二甲酸氫鉀(4.00pH)、硼砂(9.18pH)，每包配有溫度-pH表；2.使用新鮮無(wú)污染的蒸餾水；3.使用檢定合格Aji或B級(jí)250ml容量瓶，將少量蒸餾沖入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)袋子，溶解后倒入容量瓶；4.用少量蒸餾水反復(fù)洗幾次標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)袋子，殘液倒入容量瓶；5.容量瓶加蒸餾水至250毫升處，反復(fù)搖晃幾下后放幾個(gè)小時(shí)后就可用了。PH值名詞解釋：pH值，亦稱氫離子濃度指數(shù)、酸堿值，是溶液中氫離子活度的一種標(biāo)度，
					
            
				
            
								
            
					
            遠(yuǎn)慕分享細(xì)菌分離純化的詳細(xì)方法2023/09/18
            
					
            
				平板劃線分離，在平板培養(yǎng)出單個(gè)細(xì)菌菌落后可以做鏡檢觀察。稀釋倒平板法：先把微生物懸液作一系列的稀釋，分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出現(xiàn)菌落。如果稀釋得當(dāng)，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。培養(yǎng)基與菌種分離培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作
					
            
				
            
								
            
					
            核酸分離與純化的原則、步驟2023/09/18
            
					
            
				磁珠提核酸磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸，從而將核酸和蛋白質(zhì)等其細(xì)胞中其他物質(zhì)分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。核酸分離與純化的原則核酸在細(xì)胞中總是與各種蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等生物大分子物質(zhì)分開(kāi)。在分離核酸時(shí)應(yīng)遵循以下原則：保證核酸分子一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性；排除其他分子污染。核酸分離與純化的步驟大多數(shù)核酸分離與純化的方法一般都包括了細(xì)胞裂解、酶處理、核酸與其他生物大分子物質(zhì)分離、核酸純
					
            
				
            
							
				
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