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						上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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            醋酸緩沖液配制原理與步驟2023/11/30
            
					
            
				醋酸鹽緩沖液（pH3.5）取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml，用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)PH值至3.5（電位滴定法），用水稀釋至100ml，即得。當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿，或加少量水稀釋時(shí)，溶液有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液（如HOAc與NaOAc），弱堿及其鹽的混合溶液（如NH3·H2O與NH4Cl）等都是緩沖溶液。配制原理：由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用
					
            
				
            
								
            
					
            使用容量瓶配制溶液的步驟2023/11/30
            
					
            
				使用容量瓶配制溶液的方法是：(1)使用前檢查瓶塞處是否漏水。向容量瓶?jī)?nèi)加少量水，塞好瓶塞，用食指頂住瓶塞，用另一只手的五指托住瓶底，把瓶倒立過(guò)來(lái)，如不漏水，正立，把瓶塞旋轉(zhuǎn)180度后塞緊，再倒立若不漏水，方可使用。(2)把準(zhǔn)確稱量好的固體溶質(zhì)放在燒杯中，用少量溶劑溶解。然后把溶液沿玻璃棒轉(zhuǎn)移到容量瓶里。為保證溶質(zhì)能全部轉(zhuǎn)移到容量瓶中，要用溶劑多次洗滌燒杯，并把洗滌溶液全部轉(zhuǎn)移到容量瓶里。(3)向容量瓶?jī)?nèi)加入的液體液面離標(biāo)線1~2厘米左右時(shí)，應(yīng)改用滴管小心滴加，最后使液體的彎月面（凹液面）與刻度線
					
            
				
            
								
            
					
            使用流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡過(guò)程介紹2023/11/29
            
					
            
				細(xì)胞凋亡通常稱為細(xì)胞程序性死亡，是由基因控制的主動(dòng)性細(xì)胞死亡過(guò)程。越來(lái)越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)，如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力，利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫瘤診斷，療效評(píng)價(jià)和預(yù)后預(yù)測(cè)提供了重要的參考指標(biāo)。然而很多實(shí)驗(yàn)的同學(xué)們，常會(huì)碰到上機(jī)檢測(cè)時(shí)細(xì)胞死亡太多卻檢測(cè)不出凋亡，多次重復(fù)結(jié)果不一致等現(xiàn)象，接下來(lái)就一起看看如何把細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)變的更加漂亮，準(zhǔn)確！首先，明確一下細(xì)胞凋亡和壞死的區(qū)別細(xì)胞凋亡(apoptosis)是一件主動(dòng)性細(xì)胞死亡事件，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)
					
            
				
            
								
            
					
            DNA提取試劑盒的工作原理及操作步驟2023/11/29
            
					
            
				一、RNA和DNA提?。毫呀猓毫呀夤娇赡芤蚰崛NA還是RNA而異，但共同點(diǎn)是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。Chaotropes（離液劑）的作用：Chaotrope會(huì)破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。洗滌劑：除了離液劑外，裂解緩沖液中通常還有一些去污劑，以幫助蛋白質(zhì)溶解和裂解。溶菌酶和蛋白酶K:根據(jù)樣品類型，也可以使用酶進(jìn)行裂解。蛋白酶K就是其中之一，實(shí)際上在這些變性緩沖液中效果較好；當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)變性增多，蛋白酶K的作用也會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)。然而，溶菌酶在變性中不
					
            
				
            
								
            
					
            遠(yuǎn)慕分享：酶標(biāo)記抗體的方法步驟2023/11/28
            
					
            
				1、HRP標(biāo)記抗體的方法酶與抗體交聯(lián)的方法有許多種,根據(jù)酶的結(jié)構(gòu)不同可采用不同的方法。對(duì)于制備HRP結(jié)合物，可用戊二醛二步法和過(guò)碘酸鈉法。尤以簡(jiǎn)易過(guò)碘酸鈉法更為常用。戊二醛二步法原理戊二醛為一種雙功能試劑，通過(guò)其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價(jià)結(jié)合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結(jié)合物。2、標(biāo)記步驟(1)稱取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室溫靜置過(guò)夜。(2)反應(yīng)后的酶溶液經(jīng)SephadexG-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml/1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，則
					
            
				
            
								
            
					
            HRP標(biāo)記抗體-簡(jiǎn)易過(guò)碘酸鈉法介紹2023/11/28
            
					
            
				實(shí)驗(yàn)概要本實(shí)驗(yàn)用簡(jiǎn)易過(guò)碘酸鈉法進(jìn)行HRP標(biāo)記抗體。本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與Ig上的氨基相結(jié)合，所獲酶標(biāo)記抗體的產(chǎn)率高，將近70%的HRP和Ig結(jié)合，99%的Ig與酶結(jié)合，酶與Ig的活性無(wú)重大損失，是目前最chang用的方法。實(shí)驗(yàn)原理經(jīng)典的過(guò)碘酸鈉法中需采用二硝基氟苯封閉HRP上殘留的α-和ε氨基基以避免酶分子之間的交聯(lián)。后來(lái)Wilson等改用在低PH下使NaIO4氧化HRP，從而省去了二硝基氟苯封閉HRP步驟。HRP經(jīng)NaIO4氧化后形成的醛化酶可與抗體分子的
					
            
				
            
								
            
					
            單克隆抗體的制備原理說(shuō)明2023/11/27
            
					
            
				單克隆抗體是利用體外培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的抗體，它由于是由一個(gè)細(xì)胞分裂而來(lái)的，所有只含有一種抗體。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是：理化性狀高度均一、生物活性單一、與抗原結(jié)合的特異性強(qiáng)、便于人為處理和質(zhì)量控制，并且來(lái)源容易。這些優(yōu)點(diǎn)使其廣泛應(yīng)用于抗腫瘤等領(lǐng)域，缺點(diǎn)就是生成的抗體只針對(duì)1種抗原決定簇，比較單一。基本過(guò)程：1.抗原的處理2.在小鼠體內(nèi)植入抗原（免疫）3.取免疫鼠的B淋巴細(xì)胞4.與鼠的骨髓瘤細(xì)胞用PEG細(xì)胞融合5.在多孔板上篩選。雜交瘤細(xì)胞就是上面的34兩步原理1：?jiǎn)慰寺】贵w（MAb）與抗血清（又稱多克隆抗
					
            
				
            
								
            
					
            標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所需基礎(chǔ)條件2023/11/27
            
					
            
				標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是以特性量值的均勻性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性等特性為主要特征的。為獲得這些基本特征，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)起碼應(yīng)滿足以下基本條件的要求。材質(zhì)均勻從理論上講，如果物質(zhì)的一部分（單元）的特性值與另一部分（單元）的特性值沒(méi)有顯著差異，則該物質(zhì)的該特性是均勻的。但是，wan全均勻的物質(zhì)是不存在的，物質(zhì)內(nèi)部和單元之問(wèn)或多或少會(huì)存在有不均勻性，在貯存過(guò)程中，也會(huì)發(fā)生層析、偏析、聚集等不均勻的傾向，因而，均勻是相對(duì)的，而不均勻是絕對(duì)的。如果物質(zhì)的一部分(單元）的特性值與另一部分（單元）的特性值之間的差異不能被實(shí)驗(yàn)檢測(cè)出來(lái)，
					
            
				
            
								
            
					
            FITC熒光素標(biāo)記抗體具體操作步驟2023/11/24
            
					
            
				當(dāng)FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應(yīng)時(shí)，主要是蛋白質(zhì)上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結(jié)合，形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物，即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個(gè)IgG分子中有86個(gè)賴氨酸殘基，一般zui多能結(jié)合15～20個(gè)，一個(gè)IgG分子可結(jié)合2～8個(gè)分子的FITC，其反應(yīng)式如下：FITC-N=C=S+N-H2-蛋白質(zhì)→FITC-NS-C-N-H2-蛋白質(zhì)常用Marsshall（1958）法標(biāo)記熒光抗體，也可以根據(jù)條件采用Chadwick等標(biāo)記法或Clark等（1963）的透析標(biāo)
					
            
				
            
								
            
					
            不同類型的標(biāo)記抗體的介紹2023/11/24
            
					
            
				熒光素標(biāo)記熒光色素是最chang用于標(biāo)記抗體的標(biāo)記物之一。熒光素經(jīng)恰當(dāng)?shù)募ぐl(fā)可發(fā)光，從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平精確定位的方法。酶標(biāo)記酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高，但較難應(yīng)用于定量分析。生物素標(biāo)記生物素標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將生物素與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
					
            
				
            
								
            
					
            關(guān)于廢液的分類及對(duì)應(yīng)的處理辦法2023/11/23
            
					
            
				廢液的分類及對(duì)應(yīng)的處理辦法一.含一般有機(jī)溶劑的廢液一般有機(jī)溶劑是指醇類、酯類、有機(jī)酸、酮及醚等由C、H、O元素構(gòu)成的物質(zhì)。對(duì)此類物質(zhì)的廢液中的可燃性物質(zhì)，用焚燒法處理。對(duì)難于燃燒的物質(zhì)及可燃性物質(zhì)的低濃度廢液，則用溶劑萃取法、吸附法及氧化分解法處理。再者，廢液中含有重金屬時(shí)，要保管好焚燒殘?jiān)?。但是，?duì)其易被生物分解的物質(zhì)（即通過(guò)微生物的作用而容易分解的物質(zhì)），其稀溶液經(jīng)用水稀釋后，即可排放。二.含石油、動(dòng)植物性油脂的廢液此類廢液包括：苯、已烷、二甲苯、甲苯、煤油、輕油、重油、潤(rùn)滑油、切削油、機(jī)器
					
            
				
            
								
            
					
            培養(yǎng)基的使用步驟2023/11/23
            
					
            
				1.瓊脂培養(yǎng)基的融化將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過(guò)高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時(shí)間,避免過(guò)度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開(kāi),室溫靜置片刻(約2min），以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫，冷卻到47℃~50℃所需的時(shí)間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用，放置時(shí)間一般不超過(guò)4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基，應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，縮短融化后放置的時(shí)間。將瓊脂培養(yǎng)基
					
            
				
            
								
            
					
            菌株到手不會(huì)用？看這篇！2023/11/22
            
					
            
				菌種說(shuō)明書(shū)詳細(xì)說(shuō)明了菌種本身特性、生長(zhǎng)條件以及形態(tài)特征等，提供了完整的培養(yǎng)方法。菌株編號(hào)“株”是我們常用菌種具體化的最小單位，即編號(hào)是唯1的；與我們通常所說(shuō)的“種”不同的是，“種”是指一類菌，例如大腸桿菌，有很多株編號(hào)，它們都具有各自的特性。拉丁名稱代表了菌種的種屬，通常是唯1的。即我們通常所說(shuō)的菌種，用拉丁名稱來(lái)表示較為準(zhǔn)確，如Escherichiacoli的中文名稱為大腸桿菌，也叫大腸埃希氏菌。中文名稱通常根據(jù)菌種本身特性或拉丁名稱翻譯而來(lái)，因此，部分菌種中文名稱通常存在多種叫法，如“大腸桿
					
            
				
            
								
            
					
            流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法2023/11/22
            
					
            
				流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法1、使用前的處理在使用緩沖鹽作流動(dòng)相之前需要用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗色譜柱，直至基線平穩(wěn)。原則上，用于沖洗的流動(dòng)相與分析時(shí)所用的流動(dòng)相含水的比例相同(或含水更多)，不同的只是用于沖洗用的流動(dòng)相中不含緩沖鹽。理由：緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。用含緩沖鹽的(特別是做流動(dòng)相的水為飽和的緩沖鹽溶液時(shí))流動(dòng)相進(jìn)行分析時(shí)，如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動(dòng)相中含水的比例相對(duì)較小，不先沖洗掉，接下來(lái)做樣品的時(shí)候所用的流動(dòng)相中如果有機(jī)溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以
					
            
				
            
								
            
					
            配制培養(yǎng)基的詳細(xì)步驟2023/11/21
            
					
            
				配制培養(yǎng)基的詳細(xì)步驟1、配制溶液向容器內(nèi)加入所需水量的一部分，按照培養(yǎng)基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶bai解，最后補(bǔ)足所需水分。對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì)，需加熱溶解，加熱過(guò)程所蒸發(fā)的水分，應(yīng)在全部原料溶解后加水補(bǔ)足。配制固體培養(yǎng)基時(shí)，先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續(xù)加熱至wan全融化。并不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。2、調(diào)節(jié)pH值用pH試紙（或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì)）測(cè)試培養(yǎng)基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)節(jié)，直到調(diào)節(jié)到配方要求的p
					
            
				
            
								
            
					
            標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的作用原理說(shuō)明2023/11/21
            
					
            
				⑴保存和傳遞特性量值，建立測(cè)量溯源性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是特性量準(zhǔn)確、均勻性和穩(wěn)定性良好的計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有在時(shí)間上保持特性量值，在空間上傳遞量值的功能。通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可以使實(shí)際測(cè)量結(jié)果獲得量值溯源性。⑵保證測(cè)量結(jié)果的一致性、可比性通過(guò)校準(zhǔn)測(cè)量?jī)x器，評(píng)價(jià)測(cè)量過(guò)程，由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)將測(cè)量結(jié)果溯源到國(guó)家單位制(SI)，保證測(cè)量結(jié)果的一致性、可比性，從而達(dá)到量值統(tǒng)一。⑶研究與評(píng)價(jià)測(cè)量方法標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可作為特性量值已知的物質(zhì)，用于研究和評(píng)價(jià)測(cè)量這些成分或特性的方法，從而判斷該方法的準(zhǔn)確度和重復(fù)性，并通過(guò)驗(yàn)證和改進(jìn)測(cè)量方法的準(zhǔn)
					
            
				
            
								
            
					
            酸堿緩沖溶液的類型及選擇2023/11/20
            
					
            
				酸堿緩沖溶液的選型一般應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇。緩沖酸性可選用堿性緩沖液，緩沖酸性可采用堿性緩沖液。常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴bi妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統(tǒng)，生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。酸堿緩沖溶液由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合
					
            
				
            
								
            
					
            ph值測(cè)定常用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液介紹2023/11/20
            
					
            
				ph值測(cè)定常用的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液酒石酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液苯二甲酸氫鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液硼酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋，而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液性質(zhì)a.抗酸/堿,抗稀釋作用因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分，所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時(shí)，酸和堿的濃度比值不改變，適當(dāng)稀釋不影響其pH值。b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度
					
            
				
            
								
            
					
            組織固定固定液的選擇標(biāo)準(zhǔn)2023/11/17
            
					
            
				影響標(biāo)本固定的因素很多，如組織與固定液的比例、固定時(shí)間、固定溫度等；除此之外，固定液本身也很重要，若所選固定液不當(dāng)，細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、脂類、核酸等成分將會(huì)有不同程度地?fù)p失。固定劑最好隨配隨用，并注意其濃度和酸堿度。因此根據(jù)實(shí)際工作的目的，選用合適的固定液非常重要。下面是一些常用固定液的配制方法及適用范圍。1．單純固定液(1)4％中性甲醛固定液：最chang用的固定液，能滿足常規(guī)HE及免疫組化、PCR等工作。一般無(wú)特殊要求的病理標(biāo)本均適用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7．2～7．4的磷酸緩沖液為
					
            
				
            
								
            
					
            血液保存液的主要成分與作用說(shuō)明2023/11/17
            
					
            
				血液保存液的主要成分與作用1.血液保存液常用種類配方可分為：ACD（A，枸櫞酸；C，枸櫞酸三鈉；D，葡萄糖）與CPD（C，枸櫞酸三鈉；P，磷酸鹽；D，葡萄糖及枸櫞酸）兩大類保存液。在CPD中加腺嘌呤即為CPDA-1。2.血液保存液主要成分（1）枸櫞酸鹽：是所有抗凝保存液中的基本抗凝物質(zhì)。最chang用的是枸櫞酸三鈉，除抗凝作用外，它還能阻止溶血的發(fā)生。（2）枸櫞酸：避免保存液中的葡萄糖在消毒中焦化。（3）葡萄糖：是紅細(xì)胞代謝所必需的營(yíng)養(yǎng)成分，可延長(zhǎng)紅細(xì)胞保存時(shí)間，且防止溶血；并減慢細(xì)胞中有機(jī)磷的
					
            
				
            
							
				
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