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						優(yōu)誓（北京）生物技術(shù)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第6年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            物料凍干時(shí)的吸濕情況2020/08/31
            
					
            
				物料吸濕后，形態(tài)常有收縮；粉粒狀物料吸濕后，則相互粘結(jié)以至結(jié)塊，有的還會(huì)潮解。像這種因吸濕而引起的各種現(xiàn)象，均將使物料失去原有的特性，若繼續(xù)吸濕會(huì)引起進(jìn)一步的變化，致使品質(zhì)劣變。凍干產(chǎn)品在吸水后便失去了其多孔性。在情況下，它們粘附在容器上，不能恢復(fù)原有的形狀。經(jīng)過研究溫度和壓力對(duì)物料吸濕性的影響。還研究了在-20℃到+50℃之間，不同物料對(duì)水蒸氣的平衡等溫線、吸附速率及脫吸速率的影響。另外物料凍干時(shí)的速凍快慢對(duì)吸濕性能也有影響，速凍速度慢的其吸濕速率較高且平衡水分含量較高。具有相同水分含量的不同
					
            
				
            
								
            
					
            怎樣制定生物制品的凍干曲線2020/08/29
            
					
            
				生物制品的冷凍干燥，需要有一定的物理形態(tài)、均一的顏色、合格的殘余水份含量、良好的溶解性、高的存活率，長(zhǎng)的保存期。凍干曲線和時(shí)序就是進(jìn)行冷凍干燥過程控制的基本依據(jù)。凍干曲線就是表示凍干過程中產(chǎn)品的溫度、壓力隨時(shí)間變化的關(guān)系曲線；凍干時(shí)序是在凍干過程中不同時(shí)間，各種設(shè)備的啟閉運(yùn)行情況。凍干過程中重要的過程參數(shù)是制品的溫度和干燥箱內(nèi)的壓力。對(duì)于凍干機(jī)說，由于制品的溫度與擱板溫度或箱內(nèi)空間溫度有一定依從關(guān)系，許多設(shè)備又不能控制產(chǎn)品表面的壓力，所以實(shí)踐中凍干曲線往往用擱板溫度（或箱內(nèi)空間溫度）與時(shí)間的關(guān)系
					
            
				
            
								
            
					
            解析干燥之方法2020/08/28
            
					
            
				解析干燥也稱二次干燥。在一次干燥結(jié)束后，產(chǎn)品內(nèi)還存在10%左右的水分吸附在干燥物質(zhì)的毛細(xì)管壁和極性基團(tuán)上，這一部分的水是未被凍結(jié)的。為了使產(chǎn)品達(dá)到合格的殘余水分含量，必須對(duì)產(chǎn)品進(jìn)一步的干燥。解吸干燥階段中提高制品的允許溫度和維持適當(dāng)?shù)母哒婵帐侵破窔堄嗪亢细竦谋匾獥l件。產(chǎn)品的允許溫度視產(chǎn)品的品種而定，一般為25℃～40℃左右，病毒性產(chǎn)品為25℃，細(xì)菌性產(chǎn)品為30℃，血清、抗菌素等可高達(dá)40℃。為了改進(jìn)干燥箱擱板的傳熱，使產(chǎn)品溫度較快地達(dá)到允許溫度，以縮短解吸干燥階段時(shí)間。要對(duì)干燥箱內(nèi)的真空度進(jìn)
					
            
				
            
								
            
					
            微生物凍干選用保護(hù)劑的要點(diǎn)2020/08/25
            
					
            
				微生物在凍干及保存過程中，細(xì)胞膜會(huì)出現(xiàn)破裂，脫水，細(xì)胞質(zhì)濃縮等物理化學(xué)原因而死亡。在凍干溶介性較低的物質(zhì)時(shí)，若溶液濃度太低，則凍干物質(zhì)在真空升華時(shí)，會(huì)與水蒸氣一起飛散，或凍干后變成絨毛狀結(jié)構(gòu)，在停止真空后，這種結(jié)構(gòu)的物質(zhì)就會(huì)飛散，因此凍干前必須在溶液中加入填充保護(hù)劑，使之成形?？梢苑乐箖鼋Y(jié)前溶液沉淀和凍干后發(fā)生破碎。可以使制品變得易于凍干。在選擇保護(hù)劑時(shí)要符合以下幾點(diǎn)要求(1)無免疫原性，無毒性；（2)冷凍升華時(shí)不起泡，凍干后易溶解；(3)在凍干和保存過程中有保護(hù)作用；（4)有利于生物活性的保持
					
            
				
            
								
            
					
            冷凍干燥機(jī)之生物制劑分裝及升華2020/08/22
            
					
            
				生物制劑調(diào)配好之后應(yīng)裝在一定形狀的容器中，再放入凍干箱內(nèi)預(yù)凍。生物制品一般用瓶裝。瓶子有小玻璃瓶和血漿瓶等。小瓶塞材料一般為丁基橡膠制造，頂部為塞蓋，中間為直徑與瓶口內(nèi)徑配合緊密的圓柱部，下部為帶槽的支撐部。在產(chǎn)品分裝后由半加塞機(jī)將塞子放在瓶口上。怎樣分裝溶液呢？分裝在分裝機(jī)上進(jìn)行。溶液在托盤、小瓶中的高度一般為10～15mm，深不得超過18mm。這樣凍干周期可控制在18～24h內(nèi)。為減小溶液凍結(jié)后的深度，對(duì)裝量大的產(chǎn)品可采用水平或立式旋轉(zhuǎn)凍結(jié)成殼狀，以增大其外表面積，可大大縮短干燥時(shí)間。升華干
					
            
				
            
								
            
					
            冷凍干燥機(jī)之常用制冷劑2020/08/21
            
					
            
				滲透性冷凍保護(hù)劑主要包括二甲基亞砜、甘油、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。其保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液*凝固之前，滲透到細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時(shí)。細(xì)胞內(nèi)水分也不會(huì)過分外滲，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮。滲透性冷凍保護(hù)劑的作用：1、滲入細(xì)胞內(nèi)，降低細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的差距。當(dāng)細(xì)胞外凍結(jié)時(shí)，減輕細(xì)胞皺縮的程度和速度。2、細(xì)胞外保護(hù)劑的存在，可以降低細(xì)胞外液中溶質(zhì)的濃度，減少高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞的損壞。3、能與細(xì)胞內(nèi)水分及電解質(zhì)
					
            
				
            
								
            
					
            熒光PCR凍干-甜菜堿2020/08/20
            
					
            
				甜菜堿是一種生物堿，具有強(qiáng)烈的吸濕性能，所以在制作工藝中經(jīng)常會(huì)使用抗結(jié)塊劑處理，其分子結(jié)構(gòu)、應(yīng)用效果與天然甜菜堿無明顯差別，屬于化學(xué)合成的天然物等同物。可廣泛應(yīng)用于化工、飼料、食品、印染、日化、醫(yī)藥等領(lǐng)域。下面介紹下甜菜堿在PCR的主要應(yīng)用1.可應(yīng)用于DNA的測(cè)序反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中，提升含有重復(fù)序列(連續(xù)多個(gè)A或T)的測(cè)序準(zhǔn)確性。2.提升長(zhǎng)片段DNA的PCR成功率。3.適用于復(fù)雜模板的PCR擴(kuò)增，如高GC含量DNA的PCR擴(kuò)增。4.適用于某些粗糙模板的直接測(cè)序，如經(jīng)NaOH溶液裂解的細(xì)胞裂解物。5.適用
					
            
				
            
								
            
					
            熒光PCR凍干-甘露醇2020/08/20
            
					
            
				甘露醇是山梨糖醇的同分異構(gòu)體，兩種醇類物質(zhì)的二號(hào)碳原子上羥基朝向不同，易溶于水，為白色透明的固體，有類似蔗糖的甜味.甘露醇主要用于醫(yī)藥和食品，可作添加劑、保護(hù)劑等。甘露醇作為蛋白質(zhì)的抗凍劑和保護(hù)劑由來已久，甘露醇對(duì)蛋白質(zhì)的保護(hù)作用與其濃度、形態(tài)結(jié)構(gòu)有關(guān),而其濃度與結(jié)晶形態(tài)有時(shí)呈一定的關(guān)聯(lián)性。通常認(rèn)為無定型甘露醇具有使蛋白質(zhì)穩(wěn)定的作用,而結(jié)晶態(tài)的甘露醇則失去保護(hù)功能;1%的濃度或更低濃度的甘露醇通過無定型結(jié)構(gòu)的形成，而阻止蛋白質(zhì)藥物的聚集,但是高濃度的甘露醇則易于形成結(jié)晶態(tài)而促進(jìn)蛋白質(zhì)藥物的聚集。
					
            
				
            
								
            
					
            熒光PCR凍干保護(hù)劑-磷酸鹽2020/08/20
            
					
            
				磷酸鹽是磷酸的鹽，在無機(jī)化學(xué)，生物化學(xué)及生物地址化學(xué)上是很重要的物質(zhì)。磷酸鹽是蛋白質(zhì)配方中常見的緩沖劑之一，特別是含水蛋白質(zhì)藥物，有效pH值范圍為5.8-8.0，并且具有生物相容性。然而，正如“冷凍過程中的pH變化”所討論的那樣，磷酸鹽緩沖液，特別是磷酸氫二鈉，在冷凍過程中會(huì)發(fā)生顯著的pH變化，因此不推薦用于pH敏感蛋白質(zhì)。相反，磷酸鉀，組氨酸，三羥甲基氨基甲烷(Tris)和檸檬酸鹽緩沖液在冷凍期間顯示出小的pH變化。此外，低緩沖液濃度可有助于降低pH變化。然而，選擇適當(dāng)?shù)睦鋬龈稍锼灾苿?
					
            
				
            
								
            
					
            蛋白藥物凍干時(shí)出現(xiàn)的常見現(xiàn)象2020/08/20
            
					
            
				生物藥品是以微生物，寄生蟲，動(dòng)物霉素，生物組織為起始材料，采用生物學(xué)工藝或分離純化技術(shù)制備。對(duì)于大多數(shù)生物藥品來說，冷凍干燥都是生產(chǎn)過程的一項(xiàng)極為重要的制劑手段。對(duì)于藥品的品質(zhì)起了關(guān)鍵作用。蛋白藥物凍干時(shí)出現(xiàn)的常見現(xiàn)象，1.快速凍結(jié)大多對(duì)蛋白類藥品凍干不利，是因?yàn)榭焖賰鼋Y(jié)過程中，冰晶與凍結(jié)濃縮的溶液間界面面積增大，使變性蛋白質(zhì)量增大。2.低溫回火常有利于蛋白類藥品的凍干，是因?yàn)榈蜏鼗鼗鸫偈贡L(zhǎng)，冰界面面積減小。3.凍干過程中濃度較高的蛋白溶液凍干后穩(wěn)定性相對(duì)較好。是因冰界面處蛋白處于飽和狀態(tài)
					
            
				
            
								
            
					
            凍干機(jī)放大工藝要考慮的因素2020/08/19
            
					
            
				試驗(yàn)型凍干機(jī)凍干結(jié)果的放大工藝，要考慮這些因素1.箱體壁溫TW,2.隔板溫度Th，3.箱體真空壓力Po,4.隔板，箱體壁，藥瓶之間的幾何關(guān)系。傳到板層上藥瓶的熱量與這些因素有關(guān)，1.從箱體壁面?zhèn)鞯桨鍖佣瞬克幤總?cè)部的熱量比板層中心部藥瓶的熱量多的多，并且從下隔板的空余面往端部藥瓶側(cè)面有追加傳熱量，因此，中心部藥瓶的升華干燥時(shí)間約為端部藥瓶的2倍。2.箱體壁溫，對(duì)于壁面?zhèn)鳠岬蕉瞬克幤總?cè)面以及中心藥瓶上部的熱量影響很大，隨著箱體壁溫的降低，壁面?zhèn)鞯剿幤康臒崃縿t大為減少。3.隨著隔板溫度的降低，從下隔板
					
            
				
            
								
            
					
            抗生素類藥物及凍干2020/08/18
            
					
            
				抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬）或高等動(dòng)植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物，能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)?？股靥崛》椒ㄈ苊捷腿》?，離子交換法，直接沉淀法?？股仡愃幬锏闹苽渑c凍干時(shí)需要知道的幾個(gè)方面1.配料的水溫、加料的順序、活性炭的吸附時(shí)間和溫度、料液放置時(shí)間。2、有的原料存在多晶型，不同晶型的穩(wěn)定性是不一樣的；有的原料對(duì)溫度敏感；有的原料對(duì)pH敏感；有的原料對(duì)氧化敏感等。不穩(wěn)定性物質(zhì)的分解物很可能就是異物的來源。3
					
            
				
            
								
            
					
            抗體及冷凍干燥2020/08/17
            
					
            
				抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白?？贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。抗體在醫(yī)療實(shí)踐中應(yīng)用廣泛?？贵w的溶解方法是用移液器加0.1ml雙蒸水到試管內(nèi)，混勻，-20℃保存。怎樣分裝呢？抗體溶解后，將其分裝成5-10支（如0.1ml抗體，20ulx5支或10ulx10支），-20℃保存，用一支取一支，避免反復(fù)凍溶。抗原抗體凍干保護(hù)劑機(jī)理：甘油、山梨醇可以保持抗原抗體表面的滋潤(rùn)，使其不至于因失水而失活。以血漿為例介紹一下其制備及冷凍干燥1.先將冰
					
            
				
            
								
            
					
            輔酶及凍干法制備工藝2020/08/15
            
					
            
				輔酶A為白色或微黃色粉末，具典型的硫醇味。有引濕性，一溶于水不溶于丙酮、乙醇。易被空氣（特別在痕量重屑離子存在時(shí)）、過氧化氫、碘或高猛酸堿鹽等氧化成無活性的二硫化物，故在制劑中加穩(wěn)定劑和賦形劑（填充劑）。輔酶A為水溶液中不穩(wěn)定的藥物，需采用凍干法制備成粉針。凍干法制備工藝先是藥品的準(zhǔn)備，包括無菌配液→過濾→分裝（安瓿瓶或西林瓶），此時(shí)藥品溶液要保持一定的濃度，為了有利于干燥和凍干后形成穩(wěn)定的多孔結(jié)構(gòu)，還需要添加賦形劑：對(duì)于激素、酶、疫苗等劑量相對(duì)較小的熱敏型藥品，加入凍干保護(hù)劑：為保護(hù)含有蛋白質(zhì)
					
            
				
            
								
            
					
            多肽的穩(wěn)定性及凍干保存2020/08/14
            
					
            
				多肽是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物。通常由三個(gè)或三個(gè)以上氨基酸分子脫水縮合而成的化合物都可以成為叫多肽。多肽在其制劑研究中存在不穩(wěn)定性，其原因較多。但對(duì)某一個(gè)多肽來說引起不穩(wěn)定的主要原因并不多。可以詳細(xì)研究外界條件（如PH、溫度、光照、氧濃度等）對(duì)多肽穩(wěn)定性的影響有助于設(shè)計(jì)合理的制劑配方。怎樣能提高多肽的穩(wěn)定性？可通過加入添加劑，如糖類、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類，可以提高多肽的穩(wěn)定性。在凍干過程中，上述物質(zhì)還可以取代水而與多肽形成氫鍵來穩(wěn)定多肽的天然構(gòu)象，而且還可以提高凍干制品的玻璃化溫度。多肽發(fā)
					
            
				
            
								
            
					
            緩沖溶液及溶液凍干升華2020/08/13
            
					
            
				緩沖溶液是由能抵抗外加的少量酸，堿或稀釋而保持本身的PH值基本不變的溶液，用來配制緩沖溶液的試劑叫緩沖試劑。在生物制品冷凍干燥配方中選擇緩沖試劑應(yīng)注意什么呢？如每一種緩沖劑不能都用于任何溶液，如蛋白質(zhì)溶液對(duì)于PH敏感，這時(shí)就應(yīng)該避免使用磷酸鈉緩沖劑。這是由于在凍結(jié)過程中磷酸氫二鈉易于優(yōu)先結(jié)晶，溶液PH值降低，終會(huì)引起蛋白質(zhì)變性。又如緩沖劑的濃度也是很重要的，例如，β-牛乳糖水溶液（2μg/ml）冷凍干燥過程中，因?yàn)楦事洞冀Y(jié)晶而不能起到保護(hù)作用。當(dāng)添加濃度為10mM的磷酸鹽緩沖液（pH7.4）后，
					
            
				
            
								
            
					
            冷凍干燥之凍干曲線2020/08/12
            
					
            
				凍干曲線是表示凍干過程中產(chǎn)品的溫度、壓力隨時(shí)間變化的關(guān)系曲線。實(shí)踐中凍干曲線往往用擱板溫度（或箱內(nèi)空間溫度）與時(shí)間的關(guān)系曲線來表示。在制定凍干曲線時(shí)要考慮下列幾個(gè)因素：1.有些產(chǎn)品受冷凍的影響較大，有些產(chǎn)品則影響較?。灰话慵?xì)菌性的產(chǎn)品受冷凍的影響較大，病毒性的產(chǎn)品受冷凍的影響較小。共熔點(diǎn)低的產(chǎn)品要求預(yù)凍的溫度低，加熱時(shí)板層的溫度相應(yīng)要低些；為了長(zhǎng)期保存產(chǎn)品，殘余水份含量要求低的產(chǎn)品，凍干時(shí)間需長(zhǎng)些。殘余水份含量要求高的產(chǎn)品，凍干時(shí)間可縮短；2.總裝液量和每一容器內(nèi)產(chǎn)品裝液量的多少，裝液量多則凍干
					
            
				
            
								
            
					
            生物制品冷凍干燥的升華要點(diǎn)2020/08/11
            
					
            
				生物制品的溶液是由主要功能成分（如藥用成分）、多種天加組分（如抗氧化劑、填充劑等）和蒸餾水混合的膠體懸浮液。在冷凍干燥時(shí)升華時(shí)的要點(diǎn)，升華時(shí)所需的熱量由加熱設(shè)備(通過擱板)提供。從擱板傳來的熱量由下列途徑至產(chǎn)品的升華界面：1.由玻璃瓶底與擱板接觸部位傳到玻璃瓶底，穿過瓶底和產(chǎn)品的凍結(jié)部分到達(dá)升華界面；2.上擱板的下表面和下擱板的上表面向玻璃瓶及產(chǎn)品干燥層上表面輻射，再通過玻璃瓶壁及凍結(jié)層或已干燥層的導(dǎo)熱到達(dá)升華界面；3.通過擱板與玻璃瓶外表面問殘存氣體的對(duì)流，由于傳熱中必需有傳熱溫差，各段傳熱溫
					
            
				
            
								
            
					
            藥液在凍干后出現(xiàn)的常見問題及凍干工藝優(yōu)化2020/08/08
            
					
            
				藥液在凍干前分裝，方便、準(zhǔn)確，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)，且在低溫凍干過程中微生物和酶的作用幾乎不進(jìn)行，可較好保持被凍干藥物的性狀，凍干的藥物大多疏松多孔，脫水*藥物可以進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的貯存，而且容易重新吸收水分和恢復(fù)活性。藥液在冷凍干燥后會(huì)出現(xiàn)的一些常見問題及解決方法，如凍干產(chǎn)品出現(xiàn)萎縮、塌陷、空洞、硬殼、灰散或形成不定形結(jié)構(gòu)等現(xiàn)象，有以下幾種原因:1.產(chǎn)品干燥不*，殘存冰晶，出箱后，產(chǎn)品的溫度、壓力均處于共熔點(diǎn)以上，冰晶融化，水被周圍已干燥的物質(zhì)吸收，使得產(chǎn)品出現(xiàn)空洞、萎縮。解決方法:可能是由于干燥時(shí)間不
					
            
				
            
								
            
					
            溶液凍干時(shí)的要素及冷凍干燥過程2020/08/08
            
					
            
				溶液凍干時(shí)的關(guān)鍵要素如確定處方，處方包括：活性成分；賦形劑；工藝用水。溶液的組成關(guān)系到冷凍、升華等步驟的實(shí)施。如凍干工藝曲線的設(shè)定，包括過冷的程度；結(jié)晶的程度；崩解溫度或共晶溫度；亞穩(wěn)狀態(tài)間隙物質(zhì)的相變化；溶液的結(jié)晶熱；間隙物質(zhì)的熔化溫度。溶液凍干過程分為以下幾個(gè)步驟：1.預(yù)凍是將溶液中的水固化，防止抽空干燥時(shí)起泡、濃縮、收縮和溶質(zhì)移動(dòng)等不可逆的變化。溶液在凍結(jié)過程中，需過冷到冰點(diǎn)以下，其內(nèi)產(chǎn)生晶核以后，水開始結(jié)晶，同時(shí)放出結(jié)晶熱，使其溫度上升到冰點(diǎn)，隨著晶體的生長(zhǎng)，溶液濃度增加，當(dāng)濃度到達(dá)共晶
					
            
				
            
							
				
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