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2023
12-11

DMEM培養(yǎng)基的制作工藝是什么？
DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，用于支持多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的制作工藝是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！1.準(zhǔn)備所需材料：DMEM培養(yǎng)基粉末、無(wú)菌去離子水、無(wú)菌濾器、無(wú)菌容器、pH計(jì)、稱量?jī)x器、試劑瓶等。2.消毒操作區(qū)域：將工作臺(tái)、培養(yǎng)器具、儀器等進(jìn)行消毒處理，確保無(wú)菌條件。3.稱量DMEM粉末：根據(jù)所需培養(yǎng)基的濃度和容量，稱取適量的DMEM粉末。4.加入無(wú)菌去離子水：將DMEM粉末緩慢加入無(wú)菌容器中的無(wú)菌去離子水，同時(shí)攪拌均勻，直到wan全溶解。5.調(diào)整pH
2023
12-11

DMEM培養(yǎng)基的配制方法是什么？
DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，常用于培養(yǎng)多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的配制方法是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、準(zhǔn)備所需材料：1.DMEM粉末2.蒸餾水3.生長(zhǎng)因子（如胰島素、胰島素樣生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)鐵蛋白等）4.氨基酸（如谷氨酸、絲氨酸、甘氨酸等）5.維生素（如維生素C、維生素E等）6.礦物質(zhì)鹽溶液（如鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽等）7.脂質(zhì)（如膽固醇、油酸等）8.血清（可選）二、使用蒸餾水將DMEM粉末溶解1.根據(jù)需要制備的培養(yǎng)基量，按比例計(jì)算DMEM粉末的用量。2.將所需量的DMEM
2023
12-11

DMEM培養(yǎng)基的作用有什么？
DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，被廣泛應(yīng)用于體外細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞生物學(xué)研究和藥物篩選等領(lǐng)域。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的作用有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)DMEM培養(yǎng)基中含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、葡萄糖、維生素和礦物質(zhì)等，可以供給細(xì)胞進(jìn)行正常的代謝活動(dòng)和生長(zhǎng)。其中，氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單元，葡萄糖是能量的來(lái)源，維生素和礦物質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化也具有重要作用。二、維持pH穩(wěn)定DMEM培養(yǎng)基中添加了緩沖劑，可以穩(wěn)定培養(yǎng)基的pH值，防止細(xì)胞環(huán)境的酸堿度發(fā)生變化，保證細(xì)胞在適宜
2023
12-08

DMEM培養(yǎng)基的pH值多少合適？
DMEM培養(yǎng)基（Dulbecco’sModifiedEagle’sMedium）是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，廣泛應(yīng)用于體外細(xì)胞培養(yǎng)中。pH值是衡量培養(yǎng)基酸堿性的重要指標(biāo)之一，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和生理功能有重要影響。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的pH多少合適嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！細(xì)胞培養(yǎng)是一種體外研究生物學(xué)的常用方法，為了使細(xì)胞在體外條件下能夠正常生長(zhǎng)和分裂，細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值需要保持在適宜的范圍內(nèi)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基的pH值會(huì)受到細(xì)胞代謝產(chǎn)物的影響，例如產(chǎn)生的二氧化碳會(huì)與培養(yǎng)基中的水反應(yīng)形成碳酸氫根離
2023
12-08

未拆封的DMEM培養(yǎng)基能保存多久？
DMEM（Dulbecco’sModifiedEagle’sMedium）是一種常用的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)和維持動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)。那么你知道未拆封的DMEM培養(yǎng)基通?？梢员４娑嗑?？讓我們一起來(lái)看看吧！未拆封的DMEM培養(yǎng)基應(yīng)該存放在恒溫環(huán)境下，通常是在2-8℃的冰箱中。這可以幫助延緩培養(yǎng)基中化學(xué)成分的降解速度，保持其穩(wěn)定性。避免暴露于光線和空氣中，培養(yǎng)基瓶子應(yīng)該始終保持密封，以防止氧氣和濕氣的進(jìn)入。此外，培養(yǎng)基瓶子可以用鋁箔或黑色袋子包裹起來(lái)，進(jìn)一步減少光線的進(jìn)入。保存未拆封的DMEM培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)避免頻
2023
12-07

DMEM培養(yǎng)基顏色常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？
你知道DMEM培養(yǎng)基在顏色上的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、為什么DMEM培養(yǎng)基是鮮紅色的培養(yǎng)基的顏色主要是酚紅來(lái)顯示的，酚紅指示顏色非常靈敏，p值范圍為6-8，顏色由黃變?yōu)樽霞t。酚紅不是必須的，在有些情況下甚至是多余的，酚紅有類似固醇類激素的作用，如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)，最好不要添加。但是為了培養(yǎng)方便，能讓我們直觀地感覺(jué)培養(yǎng)液的狀況，加入酚紅后，如果培養(yǎng)液偏酸了，就顯示偏黃色，偏堿性了就顯示偏紫色。二、培養(yǎng)基顏色變黃一般污染細(xì)菌的時(shí)候或者長(zhǎng)時(shí)間不換液，溶液變?yōu)辄S色主要是
2023
12-07

DMEM培養(yǎng)基加多少血清和雙抗？
在細(xì)胞培養(yǎng)中，DMEM培養(yǎng)基是一種常用的培養(yǎng)基，其中添加適量的血清和雙抗可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和支持。那么你知道DMEM培養(yǎng)基中加多少血清和雙抗嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！血清是一種含有豐富生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的液體，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和支持。在DMEM培養(yǎng)基中，通常添加10-20%的胎牛血清(FBS)或小牛血清(NCS)。添加適量的血清可以提供細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)。然而，血清的加入量也要根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行調(diào)整。有些細(xì)胞類型對(duì)血清的依賴性
2023
12-06

DMEM培養(yǎng)基常溫可以存放多久？
DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，用于維持和培養(yǎng)多種不同類型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。DMEM培養(yǎng)基是由一系列組分組成的，包括氨基酸、維生素、有機(jī)化合物、糖類和鹽類等。那么你知道DMEM培養(yǎng)基常溫可以存放多久嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！DMEM培養(yǎng)基在常溫下的保存時(shí)間是有限的。一般來(lái)說(shuō)，DMEM培養(yǎng)基在4°C下存放可以保持較長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性。但是如果需要在常溫下保存DMEM培養(yǎng)基，可以根據(jù)以下幾個(gè)因素來(lái)決定存放時(shí)間。1.開(kāi)封時(shí)間是影響DMEM培養(yǎng)基穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素之一。一旦打開(kāi)DMEM培養(yǎng)基瓶子，空氣中的微
2023
12-06

DMEM培養(yǎng)基和1640培養(yǎng)基的區(qū)別有什么？
培養(yǎng)基既是供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的環(huán)境，所以非常重要。細(xì)胞培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上，添加了碳水化合物、氨基酸、脂類、無(wú)機(jī)鹽、維生素、微量無(wú)素和細(xì)胞生長(zhǎng)因子等。那么你知道DMEM培養(yǎng)基和1640培養(yǎng)基的區(qū)別有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、DMEM培養(yǎng)基DMEM培養(yǎng)基是在MEM的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的，增加了原來(lái)各成分的含量。雖然DMEM與MEM的營(yíng)養(yǎng)成分非常相似，但是DMEM的濃度要高出MEM2~4倍。DMEM培養(yǎng)基分為高糖型（含葡萄糖4500mg/L
2023
12-05

DMEM培養(yǎng)基選高糖還是低糖？
DMEM培養(yǎng)基是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞優(yōu)先選擇的一款培養(yǎng)基。根據(jù)葡萄糖含量的高低，DMEM培養(yǎng)基一般可以區(qū)分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。那么DMEM培養(yǎng)基是選高糖還是低糖呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、DMEM高糖培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來(lái)，高糖型DMEM培養(yǎng)基有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長(zhǎng)，適于生長(zhǎng)較快、附著較困難的腫瘤細(xì)胞等。目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞?？捎糜诙喾N哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞的
2023
12-05

DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么？
DMEM培養(yǎng)基是一種富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的能量、氨基酸和其他重要成分。它可以用于多種細(xì)胞類型的培養(yǎng)，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、鳥(niǎo)類細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞等。DMEM培養(yǎng)基還具有良好的穩(wěn)定性和可調(diào)節(jié)性，可以根據(jù)不同細(xì)胞的需求進(jìn)行改良和優(yōu)化。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！DMEM培養(yǎng)基的配制方法如下：1.準(zhǔn)備所需材料：DMEM培養(yǎng)基粉末、去離子水、胎牛血清（FBS）、L-谷氨酰胺、雙抗。2.取一定量的去離子水倒入一個(gè)無(wú)菌容器中，加熱至60℃左右。3.將DMEM
2023
12-05

DNA提取的注意事項(xiàng)
DNA的提取可以簡(jiǎn)單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過(guò)程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過(guò)程。那么你知道DNA提取的注意事項(xiàng)有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！1.裂解液要預(yù)熱,以抑制DNase,加速蛋白變性,促進(jìn)DNA溶解。2.酚一定要堿平衡，使用平衡飽和酚。苯酚具有高度腐蝕性，飛濺到皮膚、粘膜和眼睛會(huì)造成損傷，因此應(yīng)注意防護(hù)。氯仿易燃、易爆、易揮發(fā)，具有神經(jīng)毒作用，操作時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。3.各操作步驟要輕柔,
2023
12-04

抗體特異性驗(yàn)證方法有什么？
抗體特異性驗(yàn)證方法有什么？抗體特異性從始至終備受重視，那么你知道抗體特異性驗(yàn)證方法有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、RNA干擾(RNAInterference)RNA干擾是與靶基因序列同源的雙鏈RNA(dsRNA)所誘導(dǎo)的一種特異性基因沉默，可以迅速阻斷基因活性。siRNA(SmallInterferingRNA)是一種小RNA分子(大約21-25核苷酸)，siRNA只降解與其序列互補(bǔ)配對(duì)的mRNA，其調(diào)控的機(jī)制是通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)來(lái)降低相應(yīng)靶位基因的表達(dá)，所以是一種典型的負(fù)調(diào)控機(jī)制。在抗體特異性檢測(cè)
2023
12-04

如何選擇熒光定量PCR耗材
熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)已成為當(dāng)前病毒核酸檢測(cè)的主要手段，除了高質(zhì)量的檢測(cè)試劑、參數(shù)穩(wěn)定的熒光定量PCR儀外，所選用的檢測(cè)耗材的質(zhì)量，也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及靈敏度產(chǎn)生很大的影響。那么如何選擇熒光定量PCR耗材呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、高純度1.高品質(zhì)、高純度、高透明聚丙烯PP。2.潔凈空間生產(chǎn)加工。二、高熱傳遞性1.極薄的壁厚優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時(shí)間。三、高反射熒光信號(hào)1.qPCR更推薦使用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。2.管蓋：高透光性，蓋子的光通過(guò)率直接關(guān)系著儀器的信號(hào)采集，選擇一款透光性高的蓋子對(duì)
2023
11-30

如何分辨細(xì)胞污染類型？
細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的問(wèn)題，有時(shí)會(huì)造成非常嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類，一類是化學(xué)污染物，如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)，包括內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑，另一類是生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒和支原體，以及其他細(xì)胞系的交叉污染。那么我們?cè)撊绾畏直娓鞣N細(xì)胞污染呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)菌污染肉眼觀察特點(diǎn)：細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基可能在幾個(gè)小時(shí)呈現(xiàn)混濁，爆發(fā)很快。有時(shí)稍加震蕩，便會(huì)有很多混濁物漂起。在低倍顯微鏡下，細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間，在高倍顯微鏡下觀察可
2023
11-30

蛋白質(zhì)純化的原理是什么？
蛋白純化是指通過(guò)基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞，使其大量表達(dá)，再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來(lái)，從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)可以分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類。那么你知道蛋白質(zhì)純化的原理是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控在沒(méi)有乳糖存在時(shí)，lac操縱子處于阻遏狀態(tài)，此時(shí)，I序列表達(dá)Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)。當(dāng)有乳糖存在時(shí)，乳糖進(jìn)入細(xì)胞，經(jīng)β-半乳糖苷酶催化，轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘?，異乳糖結(jié)合阻遏
2023
11-29

細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么？有何注意事項(xiàng)？
細(xì)胞計(jì)數(shù)是指對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行定量測(cè)定的方法。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定細(xì)胞培養(yǎng)的密度和數(shù)量，可以掌握細(xì)胞生長(zhǎng)的情況。同時(shí)，細(xì)胞計(jì)數(shù)也是衡量不同實(shí)驗(yàn)條件下細(xì)胞生長(zhǎng)情況的重要指標(biāo)之一。那么你知道細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么嗎？有何注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)胞計(jì)數(shù)的通用方法1.以貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞為例，消化后的細(xì)胞充分重懸吹散，取一部分轉(zhuǎn)移至干凈的EP管內(nèi)，例如1mL;2.使用酒精棉球輕輕擦拭計(jì)數(shù)板表面和蓋玻片，把后者的邊緣微微濕潤(rùn)，然后小心蓋在計(jì)數(shù)板的正中間，邊緣要能覆蓋住計(jì)數(shù)板上的凹槽；
2023
11-29

瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？
瓊脂糖凝膠電泳是根據(jù)核酸（DNA或RNA）分子大小來(lái)分離和識(shí)別物質(zhì)的技術(shù)。那么你知道瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、同樣大小的DNA一起跑電泳條帶不一樣大DNA條帶不一樣大，本質(zhì)上是DNA在凝膠中的遷移率不一樣，有的跑得快，有的慢，通常情況同樣大小的DNA，遷移率是一樣的，條帶位置也會(huì)一樣。但遷移率也受很多因素影響，例如DNA的構(gòu)象。例如環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA，和同等大小的線性DNA（例如單位點(diǎn)酶切后的質(zhì)粒），前者的遷移率要高，表現(xiàn)出來(lái)就是看上去超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA分子量
2023
11-28

你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)幔?/a>
你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)?？讓我們一起?lái)看看吧！緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的重要溶液，對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。最常見(jiàn)的幾種緩沖體系有磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡(jiǎn)稱Tris）-HCl緩沖溶液、羥yi基哌qin乙磺酸（供注射用）（簡(jiǎn)稱HEPES）緩沖溶液。對(duì)于絕大多數(shù)生物制劑（如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等）而言，實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行，從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮最hao的治療效果。在

2023
11-28

如何選擇緩沖溶液？
三羥甲基氨基甲烷（Tris）是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備，可用于制作藥物、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。其中在生化實(shí)驗(yàn)中，許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用Tris作為生物緩沖劑。那么你知道該如何選擇緩沖溶液?jiǎn)?？讓我們一起?lái)看看吧！TBS即Tris緩沖鹽水，是Tris-HCl緩沖鹽溶液，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；對(duì)生物化學(xué)過(guò)程

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