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2016
05-23

YNB培養(yǎng)基的成分及滅菌方法
以下是TNB培養(yǎng)基的成分，本品僅用于研發(fā)，而不是用于藥物、家庭或其他用途。配制途中可因培養(yǎng)物不同而適當(dāng)添加或減少其他成份。YNB培養(yǎng)基的成分NitrogenSource（氮源）AmmoniumSulfate（硫酸銨）...............................................5gVitamins（維生素）Biotin（生物素）........................................................2μgCalciumPan
2016
05-23

油紅O染色步驟有哪些
油紅O染色液主要由油紅O異丙醇飽和液組成，利用染料易溶于脂質(zhì)的性質(zhì)證明組織脂質(zhì)含量的多少。適用于細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)研究的切片觀察.但滲透慢,不能長期保存;冰凍切片附貼于載玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分鐘后即可染色。染色后脂滴呈橘紅色。下面來了解一下油紅O染色步驟有哪些。油紅O染色步驟試劑:0.5%的油紅O溶液配方(100ml)：油紅O：1.5g70%乙醇：50ml丙酮：50ml需要的其他試劑：異丙醇、乙醇、丙酮、蘇木素（hematoxylin）油紅O染色步驟:1．將冰凍切片(厚度為4-8u
2016
05-23

什么是LB培養(yǎng)基，以及LB培養(yǎng)基的分類
什么是LB培養(yǎng)基？LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基，生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。LB培養(yǎng)基的分類液態(tài)LB培養(yǎng)基根據(jù)《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著）配制每升培養(yǎng)基,應(yīng)該在950ml去離子水中加入:蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl10g搖動容器直溶質(zhì)溶解.用5mol/LNaOH調(diào)pH7.0.用去離子水定容1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過改造的無法
2016
05-23

培養(yǎng)基的配制與滅菌方法說明
培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長因子（維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等）等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。有些微生物，如自養(yǎng)型微生物，不需要碳源，所以上述物質(zhì)只具有一般性。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格
2016
05-23

培養(yǎng)基的制備方法及基本原則
培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料。不用的培養(yǎng)基的成分不同，但是步驟卻大徑相同。培養(yǎng)基的制備方法1.配料配方換算→在容器中加入少量水（蒸餾水，自然水）→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。2.溶解淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3.調(diào)PH用1N的鹽酸或1N的
2016
05-23

微生物培養(yǎng)基的滅菌方法
微生物培養(yǎng)基是供微生物生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。按照培養(yǎng)基的成分來分培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和版合成培養(yǎng)基三類。按照微生物的種類分培養(yǎng)基按微生物的種類可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基等四類。培養(yǎng)基應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。為了達(dá)到特定要求的研究，需要進(jìn)行培養(yǎng)基配制和滅菌。那么微生物培養(yǎng)基的滅菌方法有哪些呢？微生物培養(yǎng)基的滅菌方法滅菌的
2016
05-23

簡述實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)步驟方法
微生物培養(yǎng)（microculture)是生物培養(yǎng)的中的一種。所培養(yǎng)的微生物主要有病毒、細(xì)菌、放線菌、真菌等。微生物培養(yǎng)需要用到培養(yǎng)基，根據(jù)微生物的不同種類和生活習(xí)性來配制特定的培養(yǎng)基。微生物培養(yǎng)成功的關(guān)鍵在于無菌操作，如果培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基不能*滅菌、培養(yǎng)的過程中有雜菌污染是很容易失敗的。那么微生物培養(yǎng)步驟有哪些呢？實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)步驟實(shí)驗(yàn)材料1培養(yǎng)基和菌種淀粉瓊脂培養(yǎng)基(高氏I號培養(yǎng)基)，牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，馬丁氏瓊脂培養(yǎng)基，查氏瓊脂培養(yǎng)基，活性污泥混合液。普通瓊脂斜面和平板,營養(yǎng)肉湯,普通
2016
05-23

微生物培養(yǎng)基的配制方法以及常見培養(yǎng)基的成分
微生物培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。微生物培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。下面我們來介紹一下基本微生物培養(yǎng)基的配制方法。微生物培養(yǎng)基的配制溶化：一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi).加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時應(yīng)經(jīng)常攪拌,防止焦結(jié),待其溶解后補(bǔ)足水分.在使用干燥培養(yǎng)基時,先將蒸餾水按定量加入容器中,然后稱取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中,靜置10—15min,攪拌,振
2016
05-23

微生物培養(yǎng)基的分類常見的微生物培養(yǎng)基
微生物培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，人工配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。在微生物培養(yǎng)過程中，微生物培養(yǎng)基要根據(jù)不同的菌種及其不同的培養(yǎng)目的確定搭配的營養(yǎng)成分及營養(yǎng)比例。那么微生物培養(yǎng)基的分類是怎么樣的呢？微生物培養(yǎng)基的分類1、按照培養(yǎng)基用途分為培養(yǎng)基按其特殊用途可分為加富培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，組成成分，重復(fù)性強(qiáng)，但價格較貴，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏
2016
05-23

表面活性劑的作用
表面活性劑(surfactant)，是指加入少量能使其溶液體系的界面狀態(tài)發(fā)生明顯變化的物質(zhì)。表面活性劑分為離子型表面活性劑（包括陽離子表面活性劑與陰離子表面活性劑）、非離子型表面活性劑、兩性表面活性劑、復(fù)配表面活性劑、其他表面活性劑等。那么表面活性劑的作用是什么呢？表面活性劑的作用（1）乳化作用：由于油脂在水中表面張力大,當(dāng)水中滴入油脂后,用力攪拌,油脂被粉碎成細(xì)珠狀,互相混合成乳濁液,但攪拌停止又重新分層.如果加入表面活性劑,用力攪拌,停止后很長時間內(nèi)卻不易分層,這就是乳化作用.其原因是油脂的
2016
05-13

RIPA裂解液的原理
RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)對動物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA裂解液的原理如下：RIPA主要是從動物組織和動物細(xì)胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA組織/細(xì)胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細(xì)胞膜（包括核膜）。索萊寶RIPA裂解液的使用方法如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量，取每1mlRIPA加入10ulPMSF，使PMSF的終濃度為1mM?；靹騻溆茫≒MS
2016
05-13

瑞氏染色的步驟
瑞氏染色是目前常用而又簡單的染色方法。瑞氏染液由酸性染料伊紅和堿性染料美藍(lán)組成的復(fù)合染料，溶于甲醇，后解離為帶正電的美藍(lán)和帶負(fù)電的伊紅離子。瑞氏染色的步驟是什么？為了觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，識別各種細(xì)胞及異常變化，血涂片必須進(jìn)行染色。血涂片的各種染色方法大多是羅氏染色法衍變而來。目前常用瑞氏染色法。瑞氏染色的步驟瑞氏染液的配制：取瑞氏染料1.0g、甲醇600ml、甘油15ml。I液：將全部染料放入清潔干燥的乳缽中，先加少量甲醇慢慢地研磨(少半小時)，以使染料充分溶解，再加一些甲醇混勻，然后將溶解的部分
2016
05-13

瑞氏染色原理及作用
瑞氏染液由酸性染料伊紅和堿性染料美藍(lán)組成的復(fù)合染料，溶于甲醇，后解離為帶正電的美藍(lán)和帶負(fù)電的伊紅離子。瑞氏染色法就是用瑞氏染色液對細(xì)菌進(jìn)行染色。那么瑞氏染色原理是什么？瑞氏染色原理：瑞氏染料是由堿性染料美藍(lán)（Methvlemblue）和酸性染料黃色伊紅（EostmY）合稱伊紅美藍(lán)染料即瑞氏（美藍(lán)－伊紅Y）染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍(lán)通常為氯鹽是堿性的，美藍(lán)的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復(fù)鹽，其有色部分為陽離子，無色部分為陰離子，恰與伊紅
2016
05-13

瑞氏染色的注意事項(xiàng)有哪些
瑞氏染色法是從經(jīng)典和常用的染色法。是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用，各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。因此，染色后同一血片上各種細(xì)胞可以染上各自特征性的顏色。在瑞氏染色的過程中也有一些注意事項(xiàng)。瑞氏染色的注意事項(xiàng)1.血涂片干透后固定，否則細(xì)胞在染色過程中容易脫落。2.沖洗時應(yīng)以流水沖洗，不能先倒掉染液，以防染料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久，以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水沖洗。3.染色過淡可
2016
05-09

蛋白marker的作用的解析
蛋白marker的作用是什么，先要要了解一下什么是蛋白marker。在WesternBlot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細(xì)節(jié)，然而就是這樣一個小細(xì)節(jié)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。蛋白marker的作用：Marker是表面覆蓋有特殊反光材料的標(biāo)記物，常見形狀有球形、半球形。染色體上一個可以被識別的區(qū)域（比如限制性內(nèi)切酶的酶切點(diǎn)，基因的位置等）。標(biāo)記的遺傳能夠被檢測出來。標(biāo)記可以是染色體上有表達(dá)功能的部分（比如基因），也可以是沒有編碼蛋白質(zhì)功能但遺傳特性能夠被檢測出來的部分
2016
05-09

什么是預(yù)染蛋白marker
蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。那么，什么是預(yù)染蛋白marker？預(yù)染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍(lán)色染料共價偶聯(lián).可在凝膠電泳時出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的8條帶.同未預(yù)染的蛋白marker相比,預(yù)染蛋白marker因與染料共價偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發(fā)生某些改變.預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與染料共價耦聯(lián)，在電泳
2016
05-09

幾種磷酸緩沖液的配制方法
磷酸緩沖液也叫做磷酸鹽緩沖液，英文名為PhosphateBuffer，是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液，磷酸緩沖液的配制我們一起來了解一下。先，按照下表所給定的體積，混合1mol/L的磷酸二氫鈉(單堿)和1mol/L磷酸氫二鈉(雙堿)貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。配制1mol/L的磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O)貯液：溶解138g于足量水中，使終體積為1L;1mol/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。1mol/L磷酸二氫鈉(ml)lmol/L磷
2016
05-09

磷酸緩沖液的作用
磷酸緩沖液也叫磷酸鹽緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液，磷酸鹽緩沖液是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成的溶液，那么磷酸緩沖液具體有哪些作用呢?磷酸緩沖液的作用有哪些?磷酸緩沖液主要用于一些化學(xué)實(shí)驗(yàn)中不影響實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值，以便讓實(shí)驗(yàn)的化學(xué)反應(yīng)在佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工，如食品或者飼料真菌毒素檢驗(yàn)中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗(yàn)中的稀釋緩沖液。磷酸緩沖液的作用不僅僅如此，僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平
2016
05-06

MTT實(shí)驗(yàn)原理
MTT是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。MTT實(shí)驗(yàn)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細(xì)胞數(shù)量，OD值越大，細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活
2016
05-06

MTT配制以及注意事項(xiàng)
MTT全稱為3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide，又稱噻唑藍(lán)。用于細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定和對體外細(xì)胞的細(xì)胞毒性的測定。MTT的原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臢（Z?。‵ormazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臢（Zā），用酶標(biāo)儀在490nm波長處(英文說明書寫的是570nm）測定其光吸收值，在一定細(xì)胞

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