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            北京索萊寶科技有限公司

            16
            • 2016

              04-25

              常見的指示劑有哪些

              不同的指示劑在不同的酸堿環(huán)境下呈現(xiàn)不同的顏色。指示劑的分類1、酸堿指示劑。指示溶液中H+濃度的變化,是一種有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿,其酸性和堿性具有不同的顏色。指示劑酸HIn在溶液中的離解常數(shù)Ka=[H+][In-]/[HIn],即溶液的顏色決定于[In-]/[HIn],而[In-]/[HIn]又決定于[H+]。以甲基橙(Ka=10-3.4)為例,溶液的pH4.4時(shí),呈堿性,具黃色;而在pH3.1~4.4,則出現(xiàn)紅黃的混合色橙色,稱之為指示劑的變色范圍。不同的酸堿指示劑有不同的變色范圍。2、金屬指示劑
            • 2016

              04-25

              總結(jié)實(shí)驗(yàn)室常用染色液的制備方法

              染色液是實(shí)驗(yàn)室中常用的試劑之一,分為天然染液和人工染料,也分堿性染料和酸性染料,以下來(lái)詳細(xì)介紹一下實(shí)驗(yàn)室常見染色液的配制。⒈碘-碘化鉀(I2-KI)溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色,蛋白質(zhì)染成黃色,也是植物組織化學(xué)測(cè)定的重要試劑。配方:碘化鉀2g;蒸餾水300ml;碘1g先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中,待全溶解后再加碘,振蕩溶解后稀釋300mL,保存在棕色玻璃瓶?jī)?nèi)。用時(shí)可將其稀釋2-10倍,這樣染色不致過深,效果更佳。⒉蘇丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹脂等染成紅色或淡紅色
            • 2016

              04-22

              熒光免疫染色和DAPI染色實(shí)驗(yàn)步驟

              免疫染色實(shí)驗(yàn)方法和步驟免疫染色(immunolstaining)包括免疫熒光(immunolfluorescence)、免疫組化(immunolhistochemistry)、免疫細(xì)胞化學(xué)(immunolcytochemistry)等,可以參考如下步驟進(jìn)行操作。1.樣品準(zhǔn)備(Samplepreparation)對(duì)于貼壁細(xì)胞:可以直接用多孔板,例如6孔板、24孔板等,培養(yǎng)細(xì)胞,然后到預(yù)定時(shí)間時(shí)進(jìn)行固定等后續(xù)操作。也可以用潔凈的蓋玻片,70%乙醇中浸泡后,用無(wú)菌的鑷子放置到6孔板內(nèi),然后用無(wú)菌的生理
            • 2016

              04-22

              DAPI染DNA的原理及使用方法(包含DAPI配制)

              DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式為C16H15N5·2C3H6O3,分子量457.48。DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料。它結(jié)合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對(duì)處,一個(gè)DAPI分子可以占據(jù)三個(gè)堿基對(duì)的位置。結(jié)合到雙鏈DNA上DAPI分子的熒光強(qiáng)度提高大約20倍,常用與熒光顯微鏡觀測(cè),根據(jù)熒光的強(qiáng)度可以確定DNA的量。另外,因?yàn)镈API可以透過完整的細(xì)胞膜,它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)
            • 2016

              04-22

              透析袋原理介紹及使用方法步驟

              自1861年發(fā)明透析方法今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)便常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)。下面分別介紹透析袋和透析膜使用方法和步驟透析袋使用前處理方法:1.把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段。2.在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和10mmol/LEDTA(pH8
            • 2016

              04-22

              透析袋分子量的選擇 如何選擇合適的透析袋

              透析是一個(gè)簡(jiǎn)單的擴(kuò)散過程,溶質(zhì)中小分子物質(zhì)從高濃度溶液通過半透性膜擴(kuò)散到低濃度溶液中,直滲透壓達(dá)到平衡。由于多孔膜的選擇性,使得溶質(zhì)中小分子物質(zhì)可以通過,而較大物質(zhì)則被截留,從而分離出不同大小分子量的物質(zhì),依據(jù)分子量大小截留,可用于分離工藝,改變或控制透析的條件,可在多種透析應(yīng)用中得到預(yù)期效果,通過截留分子量(MWCO)可使目標(biāo)分子得到分離。所以透析袋分子量的選擇就決定了實(shí)驗(yàn)的成敗。這篇文章就詳細(xì)介紹了如何選擇合適的透析袋。透析膜的材質(zhì)透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析
            • 2016

              04-21

              姬姆薩染液配制方法及原理

              姬姆薩染液又稱吉姆薩染色液,姬姆薩染原液,為天青色素、伊紅、次甲藍(lán)的混合物。常用作對(duì)血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行染色的染色方法。姬姆薩染色液的配制方法很簡(jiǎn)單,但是現(xiàn)在很多實(shí)驗(yàn)室都開始買現(xiàn)成的姬姆薩染液,這樣節(jié)省了時(shí)間,染色液的價(jià)格也不貴。姬姆薩染液配制方法:甲液:取瑞氏染粉1克,姬姆薩染粉0.3g,置于干燥清潔研缽中,另備甲醇(不含水或丙酮)500ml分?jǐn)?shù)次加少量甲醇研磨,分次收集于棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖3分鐘,經(jīng)1星期后即可使用。2、乙液:(磷酸緩沖
            • 2016

              04-21

              簡(jiǎn)述瑞士-姬姆薩染色液的步驟

              瑞氏-姬姆薩染色液是利用Romanowsky??Stain?技術(shù)原理改良而成的。主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。姬姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,著色清晰,色澤純正,但是對(duì)胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯示較差。瑞氏-姬姆薩染色液原理瑞氏-姬姆薩染色液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技術(shù)原理改良而成的。細(xì)胞的著色過程是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程,此過程既有物理吸附作用,又有化學(xué)親和作用。各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同,
            • 2016

              04-21

              嘌呤霉素篩選細(xì)胞的原理

              嘌呤霉素(puromycin;PM)是一種蛋白質(zhì)合成抑制劑,它具有與tRNA分子末端類似的結(jié)構(gòu),能夠同氨基酸結(jié)合,代替氨?;膖RNA同核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合,并摻入到生長(zhǎng)的肽鏈中。用嘌呤霉素篩選細(xì)胞方法如下:嘌呤霉素篩選細(xì)胞轉(zhuǎn)染(24孔板進(jìn)行)或電轉(zhuǎn)后培養(yǎng)24小時(shí),按10%密度傳代(傳36mm平皿),繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí),待細(xì)胞密度增20%-25%回合時(shí);去掉培養(yǎng)液,PBS洗一次,加入按照佳嘌呤霉素篩選細(xì)胞的濃度(殺傷曲線試驗(yàn)確定)配制好的嘌呤霉素篩選細(xì)胞培養(yǎng)基2-3ml。根據(jù)培養(yǎng)基的顏色和細(xì)胞的存活
            • 2016

              04-21

              嘌呤霉素的作用有哪些

              嘌呤霉素(puromycin;PM)是一種抗生素,廣泛用作蛋白質(zhì)合成的抑制劑。其結(jié)構(gòu)與氨酰tRNA3′端上的AMP結(jié)構(gòu)相似,肽酰轉(zhuǎn)移酶能促使氨基酸與嘌呤霉素結(jié)合形成肽酰嘌呤霉素,從核糖體上脫落,從而使蛋白質(zhì)合成反應(yīng)中斷。嘌呤霉素的作用如下:嘌呤霉素的作用:嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomycesalboniger)發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,嘌呤霉素Puromycin通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽(yáng)性菌,各種動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞。嘌呤霉素Puromycin某種特殊
            • 2016

              04-20

              簡(jiǎn)述bradford法測(cè)蛋白濃度實(shí)驗(yàn)過程

              Bradford法測(cè)蛋白濃度是利用蛋白質(zhì)-染料結(jié)合的原理,定量地測(cè)定微量蛋白質(zhì)濃度的快速靈敏的方法。Bradford法測(cè)蛋白濃度原理考馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)—色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該法試劑配制簡(jiǎn)單,操作
            • 2016

              04-20

              bradford法定量蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)原理

              Bradford法又稱考馬斯亮藍(lán)法,是Bradford于1976年建立起來(lái)的一種蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定方法。bradford法定量蛋白質(zhì)的原理是馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;以下是bradford法定量蛋白質(zhì)的原理及含量測(cè)定流程bradford法定量蛋白質(zhì)的原理考馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)—色素結(jié)合物在595nm波
            • 2016

              04-19

              胎牛血清怎么選擇才不于買到假貨

              血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質(zhì)高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。胎牛血清的主要作用1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等
            • 2016

              04-19

              幾種TBS緩沖液配制方法介紹

              TBS緩沖液是Tris-HCl緩沖鹽溶液,為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗免疫染色的組織或Western?Blot?中的蛋白印跡膜等,是常用分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,可用于免疫金銀染色中清洗組織,亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。Tris緩沖鹽水(TBS):10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1調(diào)pH7.4;操作步驟(僅供參考):1、石蠟切片脫蠟水。2、胰蛋白酶消或3
            • 2016

              04-19

              PDA培養(yǎng)基作用

              PDA培養(yǎng)基作用:PDA(PotatoDextroseAgar(Medium))培養(yǎng)基又稱馬鈴薯葡萄糖瓊脂,是一種半合成培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。PDA培養(yǎng)基的配制:(僅供參考)(1)稱量和熬煮按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小
            • 2016

              04-18

              果膠酶的使用及提取方法

              果膠酶是一種天然的復(fù)合多糖類高分子化學(xué)物,通常包括原果膠酶、果膠甲酯水解酶、果膠酸酶,通過它們的聯(lián)合作用使果膠質(zhì)得以*分解。由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而成,適用于果汁榨取、濃縮過濾、果汁澄清、膜組織分離。在食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)行業(yè)具有廣泛的用途。果膠酶的作用果膠酶由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而得。外觀呈淺黃色粉末狀。果膠酶主要用于果蔬汁飲料及果酒的榨汁及澄清,對(duì)分解果膠具有良好的作用。天然的果膠質(zhì)在原果膠酶作用下,轉(zhuǎn)化成水可溶性的果膠;果膠被果膠甲酯水解酶催化去掉甲酯基團(tuán),生成果膠酸;果膠酸經(jīng)果膠酸水解酶類和果膠
            • 2016

              04-16

              木瓜蛋白酶的提取方法

              木瓜蛋白酶(Papain)簡(jiǎn)稱木瓜酶,又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Caricapapaya)果實(shí)中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革和紡織等行業(yè);以未成熟的番木瓜乳液為原料,經(jīng)過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。木瓜蛋白酶的提取方法:(僅供參考)由木瓜的未成熟果實(shí),經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜
            • 2016

              04-16

              木瓜蛋白酶活性測(cè)定

              木瓜蛋白酶(Papain)是一種蛋白水解酶,又稱木瓜酶。是利用未成熟的番木瓜(Caricapapaya)果實(shí)中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。下面來(lái)詳細(xì)介紹一下木瓜蛋白酶活性測(cè)定的方法。木瓜蛋白酶活性測(cè)定:(僅供參考)木瓜蛋白酶活性測(cè)定原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而釋出N-苯甲酰-L-精氨酸,其釋出量可用氫氧化鈉液滴定,以此確定酶活力。酶活單位在25℃下,每分鐘內(nèi)能催化分解1umol底物的酶量,稱為1單位。試液制備1、底物溶液:準(zhǔn)確稱取N-苯甲酰-L
            • 2016

              04-14

              DAB顯色試劑盒(20×)說明書

              DAB顯色試劑盒(20×)說明書貨號(hào):DA1010規(guī)格:DA1010-3DA1010-10溶液A3ml10ml溶液B3ml10ml保存:-20℃避光密閉保存,一年有效,避免反復(fù)凍融;短期可2-8℃保存。產(chǎn)品簡(jiǎn)介:二氨基聯(lián)苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過氧化物酶(POD)的顯色底物,DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法,適用于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng),于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物,免疫印記可直接在膜上顯示條帶;免疫組化標(biāo)本顯色時(shí)間
            • 2016

              04-13

              考馬斯亮藍(lán)測(cè)蛋白質(zhì)方法

              蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的方法有很多,考馬斯亮藍(lán)測(cè)定蛋白質(zhì)是實(shí)驗(yàn)室常見的一種方式,它利用比色法和色素法混合方法、操作簡(jiǎn)便,考馬斯亮藍(lán)測(cè)蛋白質(zhì)原理:考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie?brilliant?blue?G-250)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。該染料在游離狀態(tài)下呈紅色,在稀酸溶液中當(dāng)它與蛋白質(zhì)的疏水區(qū)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,前者大光吸收?65nm,后者在595nm在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)(1-1000μg),蛋白質(zhì)與色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下的吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比,故可用于蛋白質(zhì)的定量
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