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漲知識 | 克隆專題二：不同分子克隆方法介紹（下）2023/10/20

漲知識|克隆專題二：不同分子克隆方法介紹（下）克隆是英文“clone”或“cloning”的音譯，而英文“clone”則起源于希臘文“Klone”，原意是指以幼苗或嫩枝插條。1963年J.B.S.Haldane在題為“人類種族在未來二萬年的生物可能性”的演講上采用“克隆（Clone）”的術(shù)語，把“克隆技術(shù)”帶到了人們的視野中?？寺〖夹g(shù)又稱為“生物放大技術(shù)”，目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”，又稱重組DNA技術(shù)，即通過重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計定向連接起來，在特定的受體細(xì)胞中與載體同時復(fù)

DNA-蛋白質(zhì)互作研究解決方案（下）2023/10/20

DNA-蛋白質(zhì)互作研究解決方案（下）DNA-蛋白質(zhì)互作研究解決方案（上）介紹了一些表觀組學(xué)技術(shù)研究DNA-蛋白質(zhì)互作，但是有了組學(xué)數(shù)據(jù)，通常還需要一些驗證實驗。這次，我們來介紹DNA與蛋白質(zhì)互作研究的驗證實驗。01雙熒光素酶報告檢測實驗熒光素酶報告基因是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(biolumi

上新 | 抽提效率突破90%！升級版血漿游離DNA提取試劑盒，實力登場！2023/10/20

上新|抽提效率突破90%！升級版血漿游離DNA提取試劑盒，實力登場！什么是游離DNA？cfDNA（CirculatingfreeDNA）簡稱循環(huán)游離DNA，是指循環(huán)血中游離于細(xì)胞外的部分降解了的機(jī)體內(nèi)源性DNA。正常生理情況下，cfDNA主要來源于衰老凋亡細(xì)胞基因組DNA的降解，當(dāng)機(jī)體發(fā)生疾病時，如惡性腫瘤、外傷、排異、組織器官衰竭和感染重大疾病等，異常壞死細(xì)胞會釋放大量DNA進(jìn)入血液循環(huán)。圖1.cfDNA的來源游離DNA的特點游離核酸（cfDNA）是一類高度片段化的DNA分子，片段分析則呈現(xiàn)1

蛋白酶-切除蛋白標(biāo)簽的有力工具2023/10/19

蛋白酶-切除蛋白標(biāo)簽的有力工具隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，重組蛋白的使用在近年來大大增加，為了提高重組蛋白的產(chǎn)量或賦予重組蛋白新的特性（這些特性可以用來對重組蛋白進(jìn)行純化或檢測），可以在克隆過程中添加額外的標(biāo)簽到目標(biāo)蛋白的N端或者C端，標(biāo)簽可根據(jù)功能分為兩類，純化標(biāo)簽和可溶性標(biāo)簽，純化標(biāo)簽可用于親和層析，快速純化蛋白；可溶性標(biāo)簽用于促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊，增加可溶性。常見的標(biāo)簽有6*His、GST、MBP、Strep(Ⅱ)、Flag、SUMO和組合式雙標(biāo)簽或多標(biāo)簽。GST、MBP、SUMO等蛋白

滿滿知識點！類器官技術(shù)大揭秘~2023/10/17

滿滿知識點！類器官技術(shù)大揭秘~類器官（organoids），是指利用干細(xì)胞、祖細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。作為疾病模型，相比于傳統(tǒng)2D疾病模型，類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機(jī)理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近，在多領(lǐng)域?qū)l(fā)揮重要作用，諸如細(xì)胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領(lǐng)域。為進(jìn)一步推動干細(xì)胞、細(xì)胞治療、類器官、抗體藥物、基因等技術(shù)研究與應(yīng)用轉(zhuǎn)化，助力提升科研工作者的基礎(chǔ)技能水平，山東大學(xué)齊魯醫(yī)院（第一臨床學(xué)院）學(xué)生黨總支研究生第九黨

漲知識 | 克隆專題一：不同分子克隆方法介紹（上）2023/10/13

漲知識|克隆專題一：不同分子克隆方法介紹（上）克隆是英文“clone”或“cloning”的音譯，而英文“clone”則起源于希臘文“Klone”，原意是指以幼苗或嫩枝插條。1963年J.B.S.Haldane在題為“人類種族在未來二萬年的生物可能性”的演講上采用“克隆（Clone）”的術(shù)語，把“克隆技術(shù)”帶到了人們的視野中?？寺〖夹g(shù)又稱為“生物放大技術(shù)”，目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”，又稱重組DNA技術(shù)，即通過重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計定向連接起來，在特定的受體細(xì)胞中與載體同時復(fù)

類器官研究遇難題？一線導(dǎo)師來解憂！2023/10/13

類器官研究遇難題？一線導(dǎo)師來解憂！《類器官思想薈》第18期類器官導(dǎo)師談01直播時間10月16日19:00主講人介紹#湯睿智#助理研究員，博士演講主題19:00-19:40公立醫(yī)院類器官樣本庫建設(shè)湯睿智，法國蒙彼利埃大學(xué)博士，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士后?，F(xiàn)任華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院科研科科員，負(fù)責(zé)醫(yī)院生物樣本庫的日常運營工作。廣東省精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)應(yīng)用學(xué)會類器官和器官芯片分會委員，2021年華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院優(yōu)秀博士引進(jìn)人才，2021年“武漢英才”優(yōu)秀青年人才。湯睿智博

配膠還在稱糖？大家都用上瓊脂糖片劑啦！2023/10/13

配膠還在稱糖？大家都用上瓊脂糖片劑啦！瓊脂糖（Agarose）是純化的線性半乳聚糖親水膠體，提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻，結(jié)構(gòu)上是一種線性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構(gòu)成。作為一種凝膠試劑，常用于凝膠電泳或者印跡法（如Northern或Southern）進(jìn)行日常核酸分析，也適用于蛋白分析應(yīng)用，如輻射狀免疫擴(kuò)散（RID）實驗。各位小伙伴們都知道，在日常的核酸實驗過程中，瓊脂糖凝膠電泳是一天或幾天實驗結(jié)果的呈現(xiàn)，最為簡單又最為重要。跑出一份且漂亮的膠是勞動

新品 | 5min連接任意PCR產(chǎn)物，新TOPO克?。。▋?nèi)含福利）2023/10/13

新品|5min連接任意PCR產(chǎn)物，新TOPO克隆?。▋?nèi)含福利）您還在為無法連接任意PCR產(chǎn)物和線性載體而煩惱嗎？還在為不同末端的目的片段連接載體而苦苦尋找連接方法嗎？翌圣新品零背景通用型TOPO克隆試劑盒，僅需5min就能解決您的煩惱。它利用新一代拓?fù)洚悩?gòu)酶(Topoisomerase)的原理，搭配高效的平末端化因子，能夠快速克隆連接平末端產(chǎn)物和粘性末端產(chǎn)物。不同于傳統(tǒng)的TA克隆，該試劑盒僅需5min就能保證150bp-5kb的PCR產(chǎn)物快速完成插入片段和載體的連接反應(yīng)，操作簡單，連接效率高，克

高活性Wnt3a，經(jīng)多種類器官培養(yǎng)驗證2023/10/11

高活性Wnt3a，經(jīng)多種類器官培養(yǎng)驗證類器官是在體外建立的與體內(nèi)組織或器官高度相似的一種三維模型，在疾病建模、器官再生和個性化治療領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。類器官的培養(yǎng)需要多種細(xì)胞因子的維持，其中Wnt3a是的因子之一，在大多數(shù)組織來源的類器官培養(yǎng)中起關(guān)鍵作用。PART1什么是Wnt-3a？Wnt家族是一個巨大的分泌蛋白家族，該家族包含19種人類蛋白質(zhì)，包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b（Wnt13）、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、

DNA-蛋白質(zhì)互作研究解決方案（上）2023/10/10

DNA-蛋白質(zhì)互作研究解決方案（上）基因的表達(dá)調(diào)控影響生物體的功能變化。其分為轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控、翻譯水平調(diào)控以及翻譯后水平調(diào)控。而基因的表達(dá)調(diào)控受多方面的影響，其中一種就是DNA-蛋白質(zhì)互作的影響?？茖W(xué)家們發(fā)現(xiàn)，DNA不僅可以編碼蛋白質(zhì)，還可以和蛋白質(zhì)結(jié)合，調(diào)節(jié)基因活性，同時通過影響RNA轉(zhuǎn)錄來影響基因的表達(dá)；此外，DNA還可以作為各種化學(xué)修飾物的底物，對基因的沉默發(fā)揮一定的作用。蛋白質(zhì)-DNA互作參與了很多體內(nèi)的生物學(xué)過程，弄清DNA-蛋白質(zhì)相互作用的機(jī)制，對于我們了解DNA轉(zhuǎn)錄調(diào)

滿滿的外泌體干貨知識，戳這里！2023/10/10

滿滿的外泌體干貨知識，戳這里！外泌體（exosome）是由細(xì)胞內(nèi)多泡體(multivesicularbody，MVB)與細(xì)胞膜融合后，釋放到細(xì)胞外基質(zhì)中的膜性囊泡。外泌體天然存在于體液（如血液、唾液、尿液和母乳）中，直徑約為30-150nm，膜內(nèi)包含了多種蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等生物大分子。外泌體能作為細(xì)胞間通訊的載體將這些分子從一個細(xì)胞傳遞到另一個細(xì)胞，從而實現(xiàn)細(xì)胞間的信息交流和功能調(diào)控。當(dāng)外泌體釋放到體液中，可以通過循環(huán)系統(tǒng)傳播到其他細(xì)胞和組織，從而產(chǎn)生遠(yuǎn)程調(diào)控作用，如參與免疫應(yīng)答、組織修復(fù)、疾

“咻”的一下！5分鐘拿到想要的cDNA！2023/10/10

“咻”的一下！5分鐘拿到想要的cDNA！常見的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前，加入gDNA消化去除組分后，需在特定溫度下反應(yīng)一段時間，反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，步驟多且耗時通常在半小時左右。小翌今天給大家?guī)硪豢羁焖俜崔D(zhuǎn)錄預(yù)混液，gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成，且只要5分鐘，“咻”的一下，就可拿到想要的cDNA啦！在檢測基因表達(dá)水平時，RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個潛在的風(fēng)險。gDNA可能會與目的RNA共同擴(kuò)增，從而產(chǎn)生假陽性的現(xiàn)象，例如Ct值偏小、C

漲知識 | qPCR專場七：認(rèn)識不同熒光定量PCR方法2023/10/08

漲知識|qPCR專場七：認(rèn)識不同熒光定量PCR方法熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生呢？熒光定量PC

叮~您有一份來自酶改造的約會邀請待查收！2023/10/08

叮~您有一份來自酶改造的約會邀請待查收！線上訓(xùn)練營酶的定向改造酶是生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)分子，它們在生物化學(xué)反應(yīng)中充當(dāng)催化劑。酶的定向改造是生物化學(xué)和生物工程領(lǐng)域中一項引人矚目的技術(shù)，它革命性地改變了我們對酶的理解和應(yīng)用。通過定向改造，科學(xué)家們能夠精確地修改酶的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，以滿足各種工業(yè)、醫(yī)療和環(huán)境應(yīng)用的需求。10月13日、11月3日19:00-21:00，佰傲谷聯(lián)合翌圣生物酶進(jìn)化研發(fā)中心總監(jiān)劉想老師開設(shè)“酶的定向改造”線上訓(xùn)練營課程。本次課程將從四個模塊介紹“酶的定向改造”，歡迎酶改造從業(yè)人員積極參

名單公布！翌圣生物成功入選上海知識產(chǎn)權(quán)工作試點示范單位2023/10/07

名單公布！翌圣生物成功入選上海知識產(chǎn)權(quán)工作試點示范單位近日，上海市知識產(chǎn)權(quán)局正式公布了2023年度上海市企事業(yè)工作試點示范單位名單，其中翌圣生物科技（上海）有限公司（以下簡稱“翌圣生物”）成功入選。作為一家扎根上海的生物科技企業(yè)，翌圣生物一直致力于創(chuàng)新研發(fā)，并以客戶價值為導(dǎo)向，不斷推動生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料的發(fā)展。憑借的創(chuàng)新能力和規(guī)?；a(chǎn)能力，翌圣生物成為國內(nèi)生物試劑領(lǐng)域的企業(yè)之一。翌圣生物已建設(shè)上海、武漢等多個研發(fā)中心、超潔凈分子酶工廠等生產(chǎn)基地，建立起先進(jìn)、高效的核心技術(shù)體系，涵蓋Zy

排名揭曉 | 23年最美曲線大賽開始啦！2023/10/07

排名揭曉|23年最美曲線大賽開始啦！翌圣qPCR最美曲線活動于今年8月正式發(fā)布啟動，活動期間小伙伴們踴躍報名參賽！經(jīng)過點贊和專業(yè)評選，最終排名已于今日出爐。在此非常感謝各位小伙伴對翌圣熒光定量PCR試劑的信任！現(xiàn)在一起來圍觀“最美曲線”吧！部分參賽作品展示中國科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與腫瘤研究所-11185ES數(shù)據(jù)點評：提交數(shù)據(jù)100%詳實，板面設(shè)置清楚且明確直觀?；驍?shù)量和重復(fù)組等設(shè)置均在三組及以上。數(shù)據(jù)重復(fù)性結(jié)果顯示Std介于0.02-0.3之間。引物設(shè)計和引物驗證上相對嚴(yán)謹(jǐn)。點贊得分：20+3。華中

漲知識|qPCR專場八：細(xì)節(jié)-認(rèn)真的態(tài)度和科學(xué)的精神2023/10/07

漲知識|qPCR專場八：細(xì)節(jié)-認(rèn)真的態(tài)度和科學(xué)的精神熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗需要用心對待，各種細(xì)小的偏差都會導(dǎo)致實驗出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確或難以理解的現(xiàn)象。小事成就大事，細(xì)節(jié)成就。接下來小翌給大家來介紹一下熒光定量PCR中需要注意的小細(xì)節(jié)。RNA保證可用RNA的完整度在很大程度上

精品推薦|miRNA的定量分析，這里有方案！2023/09/26

精品推薦|miRNA的定量分析，這里有方案！MicroRNAs（miRNAs）是一種大小約21-28個堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成。miRNA主要與靶基因mRNA3‘端非編碼區(qū)域特異性結(jié)合，調(diào)控轉(zhuǎn)錄后靶基因mRNA的翻譯過程，從而阻斷mRNA翻譯和促進(jìn)mRNA降解導(dǎo)致蛋白質(zhì)表達(dá)降低。miRNA的作用涉及個體發(fā)育、組織分化、細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。圖.miRNA體內(nèi)合成示意miRNA研究的關(guān)鍵是如何

想快速區(qū)分不同胰蛋白酶？這三點是關(guān)鍵！2023/09/26

想快速區(qū)分不同胰蛋白酶？這三點是關(guān)鍵！胰蛋白酶大致可以分為兩種，一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，普遍發(fā)現(xiàn)于脊椎動物消化系統(tǒng)，直接提取自牛或豬的胰腺組織；另一種則是非動物源性胰蛋白酶，即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。01應(yīng)用區(qū)別胰蛋白酶理化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，通過多重結(jié)晶方式純化，并進(jìn)一步采取層析及超濾技術(shù)制備而得。該酶易溶于水，不溶于、乙醇、等有機(jī)溶劑。在pH1.8時，酶短時間煮沸幾乎不失活，在堿溶液中加熱則會變性沉淀。Ca2+對酶有保護(hù)和激活作用，胰蛋白酶的等電點為