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怎樣正確選擇細胞培養(yǎng)試劑？2022/05/05

細胞培養(yǎng)是生命科學實驗的基礎實驗，做過細胞培養(yǎng)的小伙伴都知道培養(yǎng)過程中的常用到的生物試劑的作用嗎？小編大概歸納了一下在細胞培養(yǎng)過程中常見試劑的作用，以便更好地了解細胞培養(yǎng)實驗。一、了解培養(yǎng)基雖然細胞系培養(yǎng)沒有固定的培養(yǎng)基，但針對不同特性的細胞所選擇的培養(yǎng)基也會有所不相同，比如貼壁培養(yǎng)選擇MEM培養(yǎng)基會具有較好的貼壁效果；懸浮細胞一般采用RPMI-1640培養(yǎng)基生長狀態(tài)旺盛；無血清培養(yǎng)的細胞一般會選擇AIMV（12005）或SFM培養(yǎng)基。根據(jù)細胞特性在培養(yǎng)基生產(chǎn)過程中常會添加一些特殊成分：1.L-

實例應用：MDCK細胞的生物反應器微載體培養(yǎng)方法2022/05/05

MDCK細胞屬于動物細胞一般采用Cytodex作為微載體Cytodex主要有兩個系列即：Cytodex和Cytopore，其中Cytodex1適合大多數(shù)的貼壁細胞。采用Cytodex微載體的優(yōu)勢主要有以下幾點：1.Cytodex微載體的表面比較適宜細胞的粘附和延展。2.優(yōu)化后的大小和密度對于細胞懸浮較為有利，適宜細胞的生長和高產(chǎn)。3.這類細胞的細胞基質具有一定的生物惰性，可以減少攪拌培養(yǎng)過程中的剪切力損害。4.Cytodex微載體具有較好的可放大性。試驗證明，良好的培養(yǎng)環(huán)境下采用搏旅懸浮細胞培養(yǎng)

熒光定量PCR出現(xiàn)CT值異常怎么辦？2022/05/05

熒光定量PCR是生物醫(yī)學中常用的檢測核酸病毒的方法之一，由此，這幾年PCR儀也成了近幾年臨床檢測和分子生物學研究的重要實驗室設備。我們知道CT值是PCR擴增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴增存在什么關系？為什么有的時候基因擴增實驗中會出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴增實驗中，當擴增產(chǎn)物的熒光信號（Fluorescencesignal）達到設定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時的所對應的擴增循環(huán)數(shù)（CycleThresho

梅特勒ME204天平校準方法2022/05/05

梅特勒天平ME204系列是實驗室電子天平中常用的型號，天平使用時間久后，需要經(jīng)常進行校準和維護操作，除了定期檢定外，平時我們也可以自己進行校準，下面就自行校準操作方法做以說明。電子天平校準步驟由于梅特勒ME204系列電子天平無自校準功能需要進行人工校準調試，在校準前需要確保周圍環(huán)境穩(wěn)定，比如空氣流通速度，室溫、環(huán)境濕度等等，都會對天平校準準確度產(chǎn)生影響。在校準過程中應充分的考慮環(huán)境因素和人為操作因素。校準時，在開機后直接按”CAL”鍵，Z這時天平上會自動顯示對應的砝碼標值。根據(jù)提示放入對應的砝碼

生物發(fā)酵罐取樣時的注意事項2022/05/05

生物發(fā)酵罐在微生物發(fā)酵、細胞培養(yǎng)、生物制藥等領域應用廣泛。發(fā)酵罐內的樣品取樣，培養(yǎng)基補料、移液接種等操作也是生產(chǎn)試驗過程中的重要環(huán)節(jié)。生物發(fā)酵罐的取樣方法：一、生物培養(yǎng)過程為什么要進行取樣操作？利用生物培養(yǎng)過程是個復雜的反應過程，需要定時取樣監(jiān)測反應器內部內容的狀態(tài)及指標。比如細胞濃度，CO2通氣度，細胞液粘度，產(chǎn)物濃度等都要取樣分析，以調整培養(yǎng)參數(shù)。通過實驗樣品的取樣檢測可以提前測試培養(yǎng)物對下游工程的影響，比如酵母菌的分離與提純。通過定時取樣不僅可以制作對比樣品可用來驗證實驗結果，還有利于產(chǎn)物

細胞生物反應器中影響細胞培養(yǎng)的參數(shù)有哪些2022/04/26

小規(guī)模的動物細胞的培養(yǎng)實驗一般是在培養(yǎng)瓶中進行，如需大規(guī)模培養(yǎng)則需要通過生物反應器逐級放大。動物細胞的培養(yǎng)方式主要有兩種即：貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)，動物活體體細胞當離體置于體外培養(yǎng)時多數(shù)是以貼壁方式進行生長，比如：纖維細胞，骨細胞，肌肉細胞，肝臟細胞，膠質細胞，淋巴細胞和腫瘤細胞等。也有少數(shù)體細胞在體外的生長方式是懸浮生長的，比如：血紅細胞，白細胞，脾臟細胞，骨髓干細胞，癌腫細胞等。動物細胞放大培養(yǎng)所選擇的反應器參數(shù)對細胞培養(yǎng)來說很重要，下面以搏旅發(fā)酵罐BioCoreQC系列臺式生物反應器為例，從設

細胞培養(yǎng)工藝中生物反應器攪拌槳的選擇2022/04/26

細胞生物反應器種類繁多，功用不一，但實驗室里目前使用較多的還是攪拌式生物反應器，大容量的生物反應器多數(shù)采用不銹鋼材質，這類反應器主要應用于中量試樣或大規(guī)模細胞培養(yǎng)。10L以下的則一般采用硅硼玻璃材質。主要用于實驗室少量樣品處理或種子細胞制備；攪拌式生物反應器針對不同的培養(yǎng)細胞所搭配的攪拌槳也有所不同，攪拌叫主要可以分為以下四種：提升式攪拌槳，斜葉式攪拌槳，螺旋攪拌槳等。懸浮細胞、動物細胞、低密度微載體培養(yǎng)所用的攪拌槳由于具有較低的剪切力，所以多數(shù)采用提升式或斜葉式攪拌槳，對于高密度微載體的培養(yǎng)需

實驗室管理和實驗室設備的維護2022/04/26

實驗室儀器和實驗室設備的維護與保養(yǎng)是實驗室管理的重要環(huán)節(jié)，實驗室管理主要做好以下幾點：1、做好每天儀器設備的點檢工作；2、儀器設備適應性專人管理，做好責任到人。3、做好儀器設備的日常清潔保養(yǎng)工作；4.對于精密儀器需要進行應定期進行校準和測試、驗證；5.出借歸還儀器需要按嚴格流程執(zhí)行，未經(jīng)責任人許可不準外借。6.經(jīng)常巡視儀器使用、應存環(huán)境，應放在陰涼通風的實驗室中，避免受潮。實驗室設備的維護和實驗室儀器的保養(yǎng)實驗室設備的維護與保養(yǎng)是延長儀器使用壽命的重要方法。據(jù)調查發(fā)現(xiàn)，長期缺乏維護的設備使用壽命

遇到實驗室儀器設備期間核查怎么辦2022/04/19

檢測機構一般會配備很多類型實驗室儀器設備，這些實驗設備可以有效地幫助他們完成檢測檢定。所以這些儀器設備的實驗室儀器的期間核查是為了保證儀器實驗結果的準確，國家實驗室與計量認證機構會采用的期間核查的方式來驗證儀器的可靠性的質量管理方式之一。小編帶你了解一下實驗室儀器設備期間核查有哪些內容？一、期間核查會包含哪些儀器設備？實驗室設備的期間核查的原則制藥針對可能出現(xiàn)問題的儀器或會帶來質量問題的儀器進行溯源核實，而后根據(jù)試劑情況進行合理性的核查。期間核查主要考慮以下幾點：1、實驗室儀器設備的穩(wěn)定性：對易

高速離心機使用時的注意事項有哪些2022/04/19

高速離心機在很多實驗室中都有配備，最近離心機傷人事件的新聞頻出，實驗室的安全隱患依然是大家關注的問題，那么高速離心機使用時，需要注意哪些呢？1、高速離心機在預冷的時候，離心機的蓋子必須關閉，離心結束后需要轉頭取出倒置放在實驗臺上，控干里面的水，蓋子同樣也要打開晾干。2、在使用高速離心機進行超速離心時，液體樣品務必要加滿離心管，進行超濾離心時需要抽掉真空，這樣可以有效第避免離心管變形。一定要保證離心管蓋子蓋嚴實，防止液體外漏，影響到感應器的工作。3、預制冷時，離心機轉頭及蓋子可卸下擺在實驗臺上，一

除芯片外，“冷凍電鏡”也被美日“卡脖子”？我們不甘落后！2022/04/19

根據(jù)國家“十四五”規(guī)劃和2035年遠景目標綱要中強調科技創(chuàng)新，自立自強作目前我國健康發(fā)展的戰(zhàn)略支撐。隨著科技的進步，在很多領域我們都有了新的技術突破。自從我國光刻機、芯片制造被國外“卡脖子”后，我們科研人員就在科技術上奮發(fā)圖強，竭力趕超，目前等離子技術，冰刻機研發(fā)方面都有著國外發(fā)達國家不可及的輝煌，但在科研儀器設備制造方面上依然有很多短板比如科研儀器中的冷凍電鏡。根據(jù)數(shù)據(jù)顯示，在2019年所公布的國際TOP20的科學儀器研發(fā)企業(yè)中，美國和日本憑借其科儀研發(fā)領域的技術優(yōu)勢占數(shù)過半，而我國則未列其中

BCA蛋白定量與Bradford蛋白定量的區(qū)別是什么2022/04/19

目前實驗室里常用的蛋白定量的方法通常主要有三種：BCA蛋白定量、Bradford蛋白定量法和紫外分光法。BCA蛋白定量的實驗原理是在堿性條件下，H|NH2----C-COOH|R將Cu2+還原為CU+與BCA結晶為紫色的化合物，再通過測定562nm波長OD值來判定還原劑的含量。下列表分別對兩種實驗方法做以對比：通過上表中的的對比，我們不難看出Bradford實驗法的速度比較快，平常BCA蛋白定量的孵育時間大約30分鐘甚至更長，而采用Bradford蛋白定量法則需要幾分鐘即可完成實驗。雖然其標準曲

PCR儀在IVD體外診斷方面的應用2022/04/14

PCR儀在IVD體外診斷方面的應用：自PCR基因擴增技術發(fā)明后，PCR儀就被廣泛應用于生命科學、醫(yī)學等領域，目前已成為生物、醫(yī)學等領域不可替代的實驗工具。無論是從PCR技術還是從PCR儀的角度來講幾十年來都進行更新了迭代的變化。初代PCR儀所采用的技術是當樣品經(jīng)過PCR擴增后，再經(jīng)過電泳設備進行實驗分析，從而獲得定性結果的過程。上世紀90年代末，隨著生物學領域中熒光技術的突破，開始了以實時熒光定量PCR儀和qPCR技術為主的2代PCR儀為主導，并在IVD體外診斷方面扮演著重要角色。體外診斷檢測方

pcr檢測儀在南美洲對蝦菌毒檢測中的應用2022/04/13

近些年，對蝦飼養(yǎng)中暴發(fā)性、流行性感冒病疫持續(xù)產(chǎn)生，而且病毒性的病疫大部分沒有藥能冶療，導致養(yǎng)殖戶、飼養(yǎng)公司的重大損失，比較嚴重牽制了南美洲白對蝦飼養(yǎng)的身心健康發(fā)展趨勢。由于專業(yè)技能及pcr檢測儀的缺乏，經(jīng)常在病害呈疫情、擴散發(fā)展趨勢后才求助有關組織，這給合理防治病疫疫情時興產(chǎn)生更高的艱難。所以，必須進行系統(tǒng)實施檢測，根據(jù)檢測，掌握和把握當今對蝦的關鍵病源、病發(fā)及時興動態(tài)性、傷害全過程等，便于能盡快發(fā)覺、盡早采取一定的有效措施防治，合理操縱其散播時興，減少損失。一、水產(chǎn)品菌害的介紹水產(chǎn)品小動物的菌

漩渦混合儀的分類2022/04/13

漩渦混合儀又叫漩渦混合器它具有均質混合、混勻迅速*的特點，是實驗室儀器使用頻率較高的小型儀器，廣泛應用在生物化學等領域的實驗室。漩渦混合儀是利用渦旋的原理將試劑充分混勻，包括附著在管壁上的試劑和比較難溶解的粉末固體等。市面上的漩渦混合儀主要有2種類型：即：單管和多管的漩渦混合儀按進口類型來區(qū)分：又可分為進口漩渦混合儀和國產(chǎn)漩渦混合儀。根據(jù)使用類型的不同，一般可分為：普通漩渦混合儀、脈沖式、數(shù)顯式渦混合儀、普通多管式和數(shù)顯式多管漩渦混合儀等。實驗室中常用的漩渦混合儀多為普通單管漩渦混合儀。比如進口

漩渦混合儀的使用方法2022/04/13

漩渦混合儀是實驗室里很常用的一種小型儀器設備，雖然儀器的操作很簡單，但操作時也應當注意以下幾點。一、使用的電源和插座要符合實驗室電源管理規(guī)范，不匹配的電源容易造成電機故障。二、漩渦混合儀要放在平穩(wěn)的實驗臺上，保證平穩(wěn)、平衡。三、儀器運轉前，需要將調速按鈕向左旋到底，保證初始值。四、儀器運轉過程中不要嘗試用手接觸樣品瓶或轉動盤。五、當漩渦混合儀在工作時，盡量有人看管。六、如果需要更換保險絲請將拔掉插頭，斷電后再進行更換。七、當漩渦混合儀出現(xiàn)故障時盡量及時聯(lián)系售后或相關供應商，不要私自拆機。八、多個

全溫振蕩培養(yǎng)箱的使用方法2022/04/13

全溫振蕩培養(yǎng)箱在生物工程，細胞生物學，分子生物學，微生物學，醫(yī)學，植物組織培養(yǎng)等科學領域被廣泛使用。它既具有振蕩功能也具有培養(yǎng)箱的功能。一般還具有加熱和制冷雙向調溫系統(tǒng)，所以溫度也是可以控制的。使用時其主要操作步驟如下：1、在使用設備前，控制開關需要處于關閉狀態(tài)，調速旋鈕應旋置于小的位置上。2、將全溫振蕩培養(yǎng)箱放在平坦的地面上，保持水平，干燥通風，避免陽光直曬。3、插上電源，打開電源開關“ON"的位置，保持指示燈亮。4、選擇培養(yǎng)箱溫度：培養(yǎng)箱溫度的設定請參考附帶的使用說明書。5、打開培養(yǎng)箱上的“

國外干細胞儲存的細胞庫有幾個？ 細胞的來源渠道有哪些呢？2022/04/13

國內的細胞庫可能都比較熟悉，比如上海細胞庫。那么國外干細胞儲存的細胞庫有幾個？細胞的來源渠道有哪些呢？小編來介紹一下：Cellosaurus是來自瑞士日內瓦生物信息學研究所的細胞系匯編，其中列出了96820個人類、21791個小鼠、2444個大鼠細胞系。在開始對特定細胞系進行任何工作之前，一個重要的考慮因素是確保該細胞系是真實的，盡管大多數(shù)研究人員似乎忽略了這個問題。美國國家標準協(xié)會(ANSI)和美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)為使用短串聯(lián)重復序列(STR)的人類細胞系提供了文件標準(ASN-

為什么要優(yōu)化抗體的表達滴度？2022/04/12

標簽：細胞系抗體滴度抗體藥物細胞系的表達滴度與產(chǎn)品的產(chǎn)量與生產(chǎn)成本息息相關，實踐證明提高瞬時轉染HEK293細胞系和CHO細胞系的表達滴度可以提高抗體產(chǎn)量，有效降低生產(chǎn)成本。穩(wěn)定細胞系中的細胞表達滴度穩(wěn)定生產(chǎn)細胞系生產(chǎn)過程中，在可重復性和可放大性等多方面都具有許多優(yōu)勢。細胞的培養(yǎng)參數(shù)對細胞系的培育也具有較大的影響力。比如：溫度、pH、滲透壓、氣體流速、罐內壓力、攪拌罐內的攪拌槳類型、攪拌速度和細胞代謝物水平等。另外，在生物工藝技術中，細胞的密度、細胞活性、線粒體活性、LDH、NADH水平等生物因

臺盼藍染色細胞計數(shù)的實驗步驟和方法2022/04/12

細胞計數(shù)是確定培養(yǎng)中鋪板的細胞濃度、確定細胞活力和評估細胞分離程序結果的一個組成部分。建議在細胞分離之前進行初始細胞計數(shù)；然后可以將該數(shù)字與細胞分離后的細胞計數(shù)進行比較，以計算細胞恢復率。此外，當預期細胞活力可能會降低時，應進行活細胞計數(shù)，例如，在處理冷凍保存的細胞或離體操作的細胞時?？梢允褂门_盼藍或3%乙酸和亞甲藍進行細胞計數(shù).進行總有核細胞計數(shù)時，建議使用3%乙酸和亞-CH3藍。乙酸溶解細胞膜，亞甲藍染色暴露的細胞核。由于成熟的紅細胞缺乏細胞核，因此在計數(shù)時被排除在外。或者，建議使用臺盼藍來