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            蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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            胎牛血清的保存方法2022/04/12
            胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)常用的生物試劑,那么用不完的胎牛血清FBS該如何儲存呢?胎牛血清FBS一般需要冷凍保存,在-5到-20°C之間,并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分(通常為50ml試管)中通常很有用,以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時,一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這是由于缺乏用于開始結(jié)晶(冷凍)的成核中心(顆粒物質(zhì))。如果您只是用手指輕彈管子,它們通常幾乎會立即凝固。解凍后有一些沉淀是很常見的。沉淀物,可能是由于某些血清蛋白的變性,可以通過短暫的離心來清
            胎牛血清選購的冷知識2022/04/12
            胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分,不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細(xì)胞生長至關(guān)重要的營養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。FBS應(yīng)用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中,其濃度高達(dá)20%甚至更高,它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營養(yǎng)素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類細(xì)胞與用FBS培養(yǎng)的
            關(guān)于SDS-PAGE凝膠電泳的常見問答2022/04/08
            電泳是分離蛋白質(zhì)和其他物質(zhì)如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機化合物甚至無機離子的主要技術(shù)。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質(zhì)中的流動相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質(zhì)之一。它是一種多孔凝膠,其孔徑接近蛋白質(zhì)分子的大小,提高了蛋白質(zhì)的分辨率。此外,聚丙烯酰胺凝膠化學(xué)穩(wěn)定性好,重復(fù)性強,對pH和溫度變化穩(wěn)定,顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)在蛋白質(zhì)分子量測定、特異性蛋白質(zhì)檢測、菌種鑒定等方面具有操作簡單、重現(xiàn)性好等特點,因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作原理是什么?聚丙烯酰
            Western Blot實驗步驟2022/03/31
            本文摘要蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(免疫印跡實驗)又稱為WesternBlot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法。WesternBlot主要用于檢測或分析蛋白,應(yīng)用領(lǐng)域集中在基因表達(dá)研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。01蛋白質(zhì)印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準(zhǔn)備:Tanon連續(xù)梯度預(yù)制膠(4-20%10孔/15孔/17孔);(4-12%10孔/15孔/17孔)TanonMops/MES電泳緩沖液(粉劑)Tanon預(yù)染蛋白MarkerTanon4×LDSLoadingBu
            熒光定量PCR實驗中CT值出現(xiàn)異常的原因分析2022/03/30
            熒光定量PCR是生物醫(yī)學(xué)中常用的檢測核酸病毒的方法之一,由此,這幾年P(guān)CR儀也成了近幾年臨床檢測和分子生物學(xué)研究的主要實驗室設(shè)備。我們知道CT值是PCR擴(kuò)增曲線中的重要參數(shù),那么CT值是什么?它與PCR擴(kuò)增存在什么關(guān)系?為什么有的時候基因擴(kuò)增實驗中會出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況?什么是CT值?在熒光定量PCR擴(kuò)增實驗中,當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(Fluorescencesignal)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值(FLUORESCENCEthreshold)時的所對應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(CycleThresho
            細(xì)胞培養(yǎng)中常見的問題解答2022/03/30
            標(biāo)簽:細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)實驗中的基礎(chǔ)實驗,在細(xì)胞生長過程中,很多因素都會造成細(xì)胞生長不良。下面簡單歸納一下細(xì)胞生長不良的原因及對應(yīng)的解決方案。常見問題一:為什么細(xì)胞解凍后缺少活力,活細(xì)胞占比較低?這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導(dǎo)致:1.培養(yǎng)物凍存液等質(zhì)量欠缺。解決方案:a.確保用來制備儲存物(凍存液)的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無微生物污染、處于生長對數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細(xì)胞時需要小心翼翼,避免細(xì)胞損傷。2.儲存物凍存方法不當(dāng)解決方案:a.在液氮冷凍細(xì)胞時,確保細(xì)胞、培
            真空離心濃縮儀的原理和應(yīng)用2022/03/29
            溶劑去除是制藥、化學(xué)和生物技術(shù)行業(yè)廣泛應(yīng)用中的過程。盡管使用了多種樣品形式和溶劑,但沒有一種單一的溶劑去除技術(shù)可以提供通用的解決方案。隨著冷凍干燥和離心濃縮技術(shù)的不斷成熟,結(jié)合真空泵、冷阱和加熱蒸發(fā)設(shè)備,所開發(fā)的新一代高功率冷阱、真空離心濃縮儀等儀器,既提高了蒸發(fā)性能又改善了樣品完整度,這類儀器還進(jìn)一步地提升了溶劑回收率,從而減少了蒸發(fā)-濃縮過程對環(huán)境的影響。只有充分了解離心濃縮儀的基本原理與應(yīng)用才能更好地在實驗中發(fā)揮它的作用。溶劑去除的原理在溶劑去除過程中,以熱量的形式施加能量,使液體蒸發(fā)成氣
            細(xì)胞周期檢查點及其調(diào)節(jié)機制2022/03/25
            細(xì)胞周期檢查點:§細(xì)胞通常在體積翻倍時進(jìn)行分裂,但實際上細(xì)胞分裂過程的控制非常復(fù)雜且精確。細(xì)胞分裂的所有過程或步驟都是按順序發(fā)生的,并且細(xì)胞知道何時進(jìn)行以及何時等待和停止細(xì)胞分裂。稱為細(xì)胞周期。§在DNA復(fù)制完成之前或當(dāng)染色體或紡錘體纖維受損時,連續(xù)的細(xì)胞分裂會給細(xì)胞甚至有機體帶來災(zāi)難性的后果。因此,在進(jìn)行細(xì)胞分裂之前,細(xì)胞的各個方面都要通過其內(nèi)部機制進(jìn)行檢查?!鞕z查點是真核細(xì)胞周期中的幾個點之一,在這些點上,可以停止細(xì)胞向細(xì)胞周期下一階段的進(jìn)程,直到條件有利?!煸谘h(huán)期間會發(fā)生許多停止,以評估
            Southern Blot原理和實驗步驟2022/03/25
            SouthernBlot印跡定義:涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到載體膜上以進(jìn)行檢測或鑒定的分析技術(shù)稱為印跡。變性片段從凝膠中轉(zhuǎn)移到載體膜上的過程使其易于使用探針或抗體進(jìn)行分析。根據(jù)要分離的物質(zhì),印跡技術(shù)可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡,它們分別分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)。SouthernBlot是一種用于分子生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子方法的分析技術(shù),用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測或鑒定感興趣的DNA。該技術(shù)由
            實驗室細(xì)胞培養(yǎng)的儀器和實驗室耗材有哪些?2022/03/25
            用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的實驗室儀器設(shè)備和實驗室耗材有很多種,進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本設(shè)備如下:設(shè)備有益設(shè)備有用的附加設(shè)備振蕩培養(yǎng)箱生物安全柜低溫冷凍柜顯微鏡細(xì)胞計數(shù)儀玻璃器皿清洗機滅菌器真空泵菌落柜臺清洗儀器二氧化碳培養(yǎng)箱共聚焦顯微鏡殺菌干燥箱制備和質(zhì)量控制熒光激活細(xì)胞分選儀離心機溫度記錄純水機細(xì)胞生物反應(yīng)器液氮罐移液器和自動移液器水浴鍋動物細(xì)胞培養(yǎng)實驗室所需基本設(shè)備清單:1.無菌工作區(qū)/細(xì)胞培養(yǎng)罩(即層流罩或生物安全柜)2.培養(yǎng)箱(推薦使用潮濕的二氧化碳培養(yǎng)箱)3.水浴4.離心機5.冰箱和冰柜(–
            關(guān)于蛋白電泳中的SDS聚丙烯酰胺凝膠2022/03/24
            蛋白電泳是研究蛋白質(zhì)性質(zhì)的一種相對簡單、快速和高靈敏度的工具。它是分析化學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)的主要工具。通過電泳分離蛋白質(zhì)是基于這樣一個事實,即帶電分子將在施加電場時通過基質(zhì)遷移。蛋白質(zhì)電泳分離的基質(zhì)是聚丙烯酰胺。用于形成聚丙烯酰胺的化學(xué)試劑是單體丙烯酰胺和N,N'-雙丙烯酰胺(雙-丙烯酰胺)。聚合丙烯酰胺和雙丙烯酰的方法是使用TEMED(四*基乙二胺)和過硫酸銨。聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)部的聚合形成了一個交聯(lián)的微孔網(wǎng)絡(luò)。這種孔隙網(wǎng)絡(luò)允許小蛋白質(zhì)分子快速通過,同時減緩較大蛋白質(zhì)的遷移。這導(dǎo)致基于其分
            紫外光譜的原理及其應(yīng)用2022/03/23
            紫外光譜是紫外分光光度計等分析化學(xué)中的重要工具。UV(紫外線)光譜的另一個名稱是電子光譜,因為它涉及將電子從基態(tài)提升到更高的能量或激發(fā)態(tài)。在本文中,我將解釋紫外光譜的基本原理、工作原理和所有應(yīng)用。一、紫外光譜簡介紫外光譜是一種吸收光譜,其中紫外線區(qū)域(200-400nm)的光被分子吸收。紫外輻射的吸收導(dǎo)致電子從基態(tài)激發(fā)到更高能態(tài)。被吸收的紫外線輻射的能量等于基態(tài)和高能態(tài)之間的能量差(deltaE=hf)。通常,有利的躍遷是從MAX占據(jù)分子軌道(HOMO)到LOW未占據(jù)分子軌道(LUMO)。對于大
            ISS原位測序原理和方法應(yīng)用2022/03/23
            原位測序(ISS)是一種新方法,通過該方法直接在固定組織或細(xì)胞樣品的切片中對mRNA進(jìn)行測序。原位測序原理關(guān)鍵是測序信息與其位置之間的聯(lián)系—在一些情況下,是亞細(xì)胞位置。這與傳統(tǒng)測序不同,后者在將樣本從內(nèi)源環(huán)境中移除后分析樣本,從而丟失位置信息。ISS由斯德哥爾摩大學(xué)開發(fā),可同時量化數(shù)百個mRNA轉(zhuǎn)錄本,并以單細(xì)胞分辨率在空間上解析它們。該方法使用四種熒光染料來指示核酸堿基、RNA掛鎖探針和催化在掛鎖探針位置形成環(huán)化DNA的酶,這種機制稱為滾環(huán)擴(kuò)增。使用成像技術(shù)讀取產(chǎn)生的熒光DNA??臻g檢測技術(shù)斯
            什么是生物安全柜?2022/03/17
            生物安全柜是一種通風(fēng)的外殼,可保護(hù)用戶、產(chǎn)品和環(huán)境免受因處理潛在危險微生物而產(chǎn)生的氣溶膠的影響。連續(xù)氣流通過HEPA過濾器排放到大氣中。三種保護(hù)狀態(tài)對柜內(nèi)有害物質(zhì)的個人防護(hù)避免樣品污染的產(chǎn)品保護(hù)。環(huán)境保護(hù),防止機柜內(nèi)的污染物。生物安全柜在處理生物制劑時根據(jù)其容納能力分為三類。1級機柜提供個人和環(huán)境保護(hù)。用于處理低到中等風(fēng)險的生物制劑。生物安全等級:1、2和3類2機柜提供人員、環(huán)境和產(chǎn)品保護(hù)。用于處理低到中等風(fēng)險的生物制劑。生物安全等級:1、2和3級3級機柜一個高度專業(yè)化的實驗室“手套箱”。3級機
            RFID標(biāo)簽在實驗室中的應(yīng)用2022/03/15
            對于依賴速度和準(zhǔn)確性來掃描大量庫存的實驗室來說,RFID標(biāo)簽代表了對大多數(shù)傳統(tǒng)標(biāo)簽方法的巨大改進(jìn)。RFID技術(shù)最初是在二戰(zhàn)期間構(gòu)思的,已被用于各種行業(yè),從防盜檢測和可掃描房間鑰匙到核對材料的跟蹤。實驗室中的RFID標(biāo)簽在實驗室中,RFID標(biāo)簽具有許多優(yōu)勢,包括能夠從遠(yuǎn)處同時跟蹤樣品,而無需直接視線。這項技術(shù)通過使用無源RFID嵌體來實現(xiàn),該嵌體由嵌入在標(biāo)簽中的集成電路(芯片)和天線組成,標(biāo)簽發(fā)出無線電信號以響應(yīng)讀取器,然后讀取器處理所有樣品的相關(guān)信息。從而可以輕松地通過這些標(biāo)簽來節(jié)省時間并提高跟
            實驗室移液器使用10種技巧2022/03/15
            毫無疑問,移液器是生物學(xué)研究的重要的工具之一。它們有多種設(shè)計,用于無數(shù)研究領(lǐng)域。雖然許多液體處理指南都強調(diào)移液器維護(hù)的重要性,但移液器技巧同樣重要。下面,我們分享一些移液器的使用方法,移液操作的10種技巧,以改進(jìn)您的移液技術(shù)。1.選擇合適的移液槍和吸頭:移液槍與移液器吸頭的匹配度是移液準(zhǔn)確度的關(guān)鍵。如果吸頭和移液槍不匹配,或使用質(zhì)量差的吸頭,可能會影響到吸頭和移液槍之間的密封性能。良好的移液器吸頭可確保適當(dāng)?shù)拿芊?,從而最大限度地減少因泄漏引起的樣品損失。2.根據(jù)液體密度適當(dāng)校準(zhǔn)移液器:如果液體的
            二代測序降低實驗成本方案2022/03/15
            隨著成本穩(wěn)步下降,二代測序NGS變逐漸增多,但如果經(jīng)常使用,它仍然是一種成本昂貴的工具。其實在實驗室中,掌控好以下幾個環(huán)節(jié)也是可以節(jié)省NGS的總體成本的。這里提供一些關(guān)于降低二代測序-NGS成本的方法可供參考。1.樣品質(zhì)量控制樣本的質(zhì)量直接關(guān)乎到二代測成本,質(zhì)量較差的樣本,會間接增加測序步驟和處理時間。所以,降低成本的簡單方法之一就是從樣品提取開始,通過部署于樣品類型和目標(biāo)核酸的樣品純化方法,來確保用于下游分析的核酸純度和產(chǎn)量。NGS文庫制備過程中發(fā)生的酶促反應(yīng)對所用樣品的數(shù)量和質(zhì)量較敏感。因此
            生物反應(yīng)器培養(yǎng)中支原體污染對細(xì)胞有什么影響?2022/03/14
            支原體抗體又稱Mollicutes,它是一種微小的并可以自我復(fù)制的細(xì)菌(直徑0.1–0.3µm),一般在生物反應(yīng)器哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)物中很難進(jìn)行檢測和去除。支原體由于缺乏細(xì)胞壁,使它們可以輕易穿過0.1µm–0.22µm的除菌過濾器或濾膜。由于支原體具有較小的基因組,難以進(jìn)行選擇復(fù)制和代謝,所以,通常需要宿主細(xì)胞才能生存。某些支原體物種已引起細(xì)胞培養(yǎng)物的隱匿性污染,尤其是在基礎(chǔ)研究環(huán)境中,對細(xì)胞健康或細(xì)胞培養(yǎng)性能的可見變化很小。然而,支原體抗體可以通過幾種潛在機制以更微妙的方式改變培養(yǎng)性能和產(chǎn)品質(zhì)
            如何選擇基因測序方法2022/03/14
            當(dāng)今的主要技術(shù)基因測序技術(shù)相對成熟,DNA測序的主要方法有Sanger測序、下一代測序(NGS)和長讀長測序。如何選擇基因測序方法。以下是對這些方法、優(yōu)缺點和重要標(biāo)準(zhǔn)的簡要回顧,可幫助您權(quán)衡下一個測序選擇。選擇測序方法的標(biāo)準(zhǔn)選擇測序方法的標(biāo)準(zhǔn)很多,取決于研究人員及其項目的性質(zhì)。正在研究的生物學(xué)問題是關(guān)鍵。PacificBiosciences副總裁JonasKorlach說:“研究的背景決定了使用哪種類型的測序,因為不同的測序方法具有不同的特征來推動選擇?!背R姷臉?biāo)準(zhǔn)包括測序時間、通量、成本和準(zhǔn)確
            吞噬細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的區(qū)別與功能2022/03/10
            吞噬細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的區(qū)別與功能免疫細(xì)胞是生物體內(nèi)所存在的一種重要細(xì)胞,它們的主要作用是參與對抗異物或清除死細(xì)胞。常見的免疫細(xì)胞可以分為以下幾種:吞噬細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞三大類。它們的區(qū)別與功能分別是什么?吞噬細(xì)胞和吞噬作用當(dāng)身體被傳染性病原體(例如某些微生物)破壞時,它們會遇到免疫系統(tǒng)的各個部分。一般來說,吞噬細(xì)胞是一個廣義的術(shù)語,指的是任何可進(jìn)行吞噬作用的細(xì)胞。吞噬作用。在吞噬作用中,吞噬細(xì)胞吞噬大的原核細(xì)胞,如細(xì)菌,或真核細(xì)胞,如酵母細(xì)胞或死細(xì)胞
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