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蛋白質(zhì)翻譯后修飾2024/08/09

項目背景：蛋白質(zhì)翻譯后修飾（Post-TranslationalModification,PTM）是指在翻譯后，蛋白質(zhì)在其氨基酸鏈上經(jīng)歷的化學(xué)修飾，這些修飾可以影響蛋白質(zhì)的功能、活性、穩(wěn)定性和細胞定位。PTM是細胞調(diào)控的重要機制，分別通過添加、去除或更換不同的化學(xué)基團來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)。常見的PTM包括：磷酸化、糖基化、甲基化、乙?；⒎核鼗?。其中磷酸化在細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)節(jié)、細胞周期控制等生物過程起著關(guān)鍵作用。案例展示：人體內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化存在組織特異性

小鼠腹腔巨噬細胞的分離方法2024/08/02

1.C57BL/6小鼠脫頸處死。2.腹部剃毛，75%酒精消毒。3.用注射器吸取10mL冷的生理鹽水，提起小鼠腹中部的皮膚和腹膜，讓針頭從提取處穿刺進入小鼠腹腔，緩緩?fù)谱⑸睇}水。4.輕揉小鼠腹部數(shù)次，靜置3min，使液體在腹腔內(nèi)充分流動。5.用鑷子提起下腹皮膚，使與腹膜分開，在鑷子提取處將皮膚剪開一個小口，再撕開整個腹部皮膚，使腹膜暴露。6.將注射器針頭插入縫隙處抽取腹腔液。7.將腹腔液在250g下離心5分鐘。8.將細胞重懸在含有10%FBS的RPMI1640培養(yǎng)基中，并在37°C、5%CO2的

小動物核磁共振成像技術(shù)2024/07/23

一、小動物核磁共振成像原理核磁共振成像（NuclearMagneticResonanceImaging，簡稱NMRI），也稱磁共振成像（MagneticResonanceImaging，簡稱MRI），依據(jù)所釋放的能量在物質(zhì)內(nèi)部不同結(jié)構(gòu)環(huán)境中不同的衰減，通過外加梯度磁場檢測所發(fā)射出的電磁波，即可得知構(gòu)成這一物體原子核的位置和種類，據(jù)此可以繪制成物體內(nèi)部的結(jié)構(gòu)圖像。二、小動物核磁共振成像特點1.無電離輻射性（放射線）損害；2.無骨性偽影；3.多方向（橫斷、冠狀、矢狀切面等）、多參數(shù)快速成像；4.高度

小鼠睪丸網(wǎng)注射方法2024/07/19

小鼠睪丸網(wǎng)注射方法1.麻醉C57BL/J小鼠。2.術(shù)野備用，碘伏消毒。3.在恥骨聯(lián)合上方做1.5cm的切口，拉出一側(cè)睪丸和附睪。4.在體視顯微鏡下，將抽好轉(zhuǎn)染液的胰島素針度的角度插進睪丸網(wǎng)與輸出管連接的凸起處，緩慢將轉(zhuǎn)染液注入睪丸生精小管中。5.每側(cè)睪丸網(wǎng)注射50ul轉(zhuǎn)染液，使得睪丸表面大部分生精小管變藍。6.注射后，停針2min。實驗服務(wù):1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq3.蛋白

10-12周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養(yǎng)2024/07/08

1.10-12周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺激素（PregnantMareSerumGonadotropin，PMSG）60IU，48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡，釋放顆粒細胞。6.

3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養(yǎng)2024/06/28

1.3-4周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺激素（PregnantMareSerumGonadotropin，PMSG）60IU，48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡，釋放顆粒細胞。6.將懸

小鼠脾臟CD8+T細胞的磁珠分選2024/06/20

一、制備脾臟單細胞懸液8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血，無菌分離脾臟，于70um濾網(wǎng)上研磨收集脾細胞，過濾、離心，再以RPMI-1640wan全培養(yǎng)液重懸。二、磁珠標記1.細胞計數(shù)為8×107/mL。2.400×g離心4分鐘，去除上清。3.每107個細胞總量使用40μL緩沖液重懸。4.每107個細胞總量添加10μLCD8+T細胞生物素抗體混合物。5.混勻，4℃孵育5分鐘。6.每107個細胞加入2mL緩沖液洗滌細胞，400×g離心4分鐘，去上清。7.每107個細胞添加80μL緩沖液。8.每107

整體課題實驗的意義2024/06/18

一、整體課題實驗的意義在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，每一次的突破都離不開深入的實驗研究。而整體課題實驗，作為一種綜合性、系統(tǒng)性的研究方法，正日益受到科研人員的青睞。它不僅能夠深入剖析疾病的發(fā)病機制，還能為藥物的研發(fā)提供有力支持，為醫(yī)學(xué)事業(yè)的進步注入新的活力。整體課題實驗，顧名思義，是一種將多個相關(guān)課題整合在一起，進行系統(tǒng)性研究的實驗方法。它突破了傳統(tǒng)單一課題研究的局限性，通過整合不同領(lǐng)域的知識和技術(shù)，形成一個更為完整、全面的研究體系。這種方法的出現(xiàn)，不僅提高了研究效率，也為科研人員提供了更廣闊的思路和視角。在整體

什么是醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)？2024/06/18

一、醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的意義醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)是生命科學(xué)研究中的一環(huán)。無論是新藥研發(fā)、疾病診斷，還是基因測序、細胞培養(yǎng)，都離不開醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的支持。這些服務(wù)提供了專業(yè)的實驗技術(shù)、設(shè)備和人員，為科研人員提供了強大的后盾，使得他們能夠更專注于探索生命科學(xué)的奧秘。醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的優(yōu)勢在于其專業(yè)性和高效性。專業(yè)的實驗團隊具備豐富的經(jīng)驗和技能，能夠確保實驗的準確性和可靠性。他們熟悉各種實驗方法和技巧，能夠根據(jù)研究需求制定合適的實驗方案。同時，醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)還具備高效性，能夠快速響應(yīng)科學(xué)家的需求，提供及時的技術(shù)支持和數(shù)據(jù)分

MPTP誘導(dǎo)的帕金森氏模型2024/06/17

藥品：1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine（MPTP）是一種廣泛使用的化學(xué)物質(zhì)，用于在動物體內(nèi)誘導(dǎo)類似于PD的狀態(tài)，注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動物：成年雌性Balb/c小鼠，10周齡。造模：成年雌性Balb/c小鼠，連續(xù)7天給予MPTP（15mg/kg/天），腹腔注射。模型的評價：1.曠場活動測試（Openfieldlocomotionactivitytest）：曠場（45cm×45cm×25cm）準備好，將小鼠放入盒子中，熟悉

大鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/06/17

模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內(nèi)動脈，用無菌縫合線結(jié)扎，血管夾夾住頸內(nèi)動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標準：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分，48小時內(nèi)沒有死亡，就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。優(yōu)點：無需開顱，創(chuàng)傷較小；缺血部位相對固定，可控性好；可實現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。動物選擇：目前多選用SD大鼠。考慮大鼠雌激素水平對腦缺血損傷

小鼠脾臟單細胞懸液的制備方法2024/06/14

1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中，浸泡5min。3.無菌狀態(tài)下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿，放入無菌的70um濾網(wǎng)，將脾臟置于濾網(wǎng)上，加入2ml培養(yǎng)基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細胞狀態(tài)，直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。6.研磨時動作應(yīng)輕柔，用力過大可導(dǎo)致細胞死亡。7.棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織，收集平皿內(nèi)的細胞懸液，400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀，就可以進行后續(xù)實驗。

大鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.大鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)1cm處。2.左手固定大鼠，使腹部向上，讓大鼠頭處于低位。3.注射位置消毒4.右手持連有5號針頭的注射器。5.將注射器沿45°角斜向穿過腹肌進入腹腔，此時有落空感，回抽無回血或尿液，即可注入藥液。6.緩慢抽出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，大鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

小鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)0.5cm處。2.首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔，回抽針栓，如無回血或液體即可注入藥物。5.注射后，緩慢拔出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，小鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

大鼠尾靜脈注射方法2024/04/26

1.用固定裝置固定大鼠，將尾巴露出。2.使用酒精棉球擦拭消毒大鼠尾巴，擴張血管。3.用1ml注射器。4.用左手拇指和食指固定住尾巴，在尾巴的下1/4處進針，針頭與尾巴平行，進針時，針頭斜面朝上。5.回抽看血液是否回流，以確保針頭在血管內(nèi)。6.注射完成后，用干棉球按壓注射部位1-2分鐘以止血。注意事項：1.固定大鼠也要固定尾巴。2.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現(xiàn)，則意味著針頭未刺入血管，此時應(yīng)更換位置。3.多次注射，要從尾巴遠端開始注射。

小鼠尾靜脈注射方法2024/04/19

1.用專用固定裝置固定小鼠，前部有氣孔保障小鼠呼吸，后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條，使用酒精棉球擦拭消毒尾巴，擴張血管。3.用1ml注射器，4號針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器，針尖斜面朝上，沿與靜脈平行方向進針。6.輕推針栓，如無阻力，即可注射藥物。7.拔出針頭前，先用干棉球按壓止血。注意事項：1.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現(xiàn)，則意味著針頭未刺入血管，此時應(yīng)更換位置。2.多次注射，要從尾巴遠端開始注射，漸進向尾根方向移動。

來自結(jié)直腸癌的病人類器官原代培養(yǎng)2024/04/19

一、操作步驟1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。2.消毒取樣的15ml管，取出組織，放到10ml大皿中。3.用含4抗的PBS溶液浸泡，清洗組織。4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。5.將組織剪成1mm3大小的組織塊，轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。6.在37℃水浴鍋中，消化15min。7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細胞和較少的細胞簇后，終止消化。8.用100μm篩過濾，然后300g4℃離心5min，移去上清。9.重懸沉淀，轉(zhuǎn)移到2ml離心管中，300g4℃離心5min，移去上清。10.估算沉淀的細胞

小鼠灌胃操作2024/03/26

一、左手固定小鼠，確保其身體成一直線，頭部固定，避免活動。二、灌胃針從小鼠左側(cè)嘴角進入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進，進入食管后會有一個刺空感。三、在灌注藥液時需注意小鼠是否有強烈掙扎現(xiàn)象。四、一般灌胃針插入深度：小鼠2-3cm。五、一次灌胃量：0.1-0.2ml/10g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心，主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ)，專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新，建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)、生物

大鼠灌胃操作2024/03/26

一、用左手固定大鼠的頭部，使其頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側(cè)嘴角插入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進，進入食管后會有一個刺空感。三、在灌胃針插入過程中，應(yīng)緊貼咽后壁進針，避免損傷食道。若灌胃針進入氣管，大鼠會劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應(yīng)，如無過度掙扎，可嘗試推注藥物。如阻力過大或動物反應(yīng)劇烈，可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度：大鼠4-6cm。六、一次灌胃量：大鼠1-2ml/100g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1

成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞原代培養(yǎng)2024/03/19

1.C57小鼠，8-10周，通過頸椎脫位處死，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子，使髖關(guān)節(jié)脫臼，保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽，將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍，將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片，加入3ml預(yù)熱的CollagenaseD（1.5mg/ml）。6.放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化，時間2h。7.第一次消化結(jié)束后，加入含血清的培養(yǎng)