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						上海佰利萊生物科技有限公司
            初級(jí)會(huì)員 | 第4年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            小鼠衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal） ELISA試劑盒 使用說明書2024/07/31
            
					
            
				本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷小鼠（Mouse）衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）kàng體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)kàng體，經(jīng)過溫育并chà底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）呈
					
            
				
            
								
            
					
            植物甘氨酸甜菜堿（GB） ELISA試劑盒 使用說明書2024/07/25
            
					
            
				本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷植物（Plant）甘氨酸甜菜堿（GB）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙kàng體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被甘氨酸甜菜堿（GB）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并chè底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甘氨酸甜菜堿（GB）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣
					
            
				
            
								
            
					
            PCR 引物設(shè)計(jì)的十個(gè)基本原則2024/07/03
            
					
            
				PCR引物設(shè)計(jì)的十個(gè)基本原則：1、引物zuì好在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)：DNA序列的保守區(qū)是通過物種間相似序列的比較確定的。搜索不同物種的同一基因，通過序列分析軟件比對(duì)，各基因相同的序列就是該基因的保守區(qū)。2、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間：引物長(zhǎng)度(primerlength)常用的是18-27bp，但不應(yīng)大于38，因?yàn)檫^長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)。3、引物GC含量在40%~60%之間，Tm值z(mì)uì好接近72℃：上下游引物的Tm值是寡核苷酸的解鏈溫度。有
					
            
				
            
								
            
					
            PCR反應(yīng)過程中的循環(huán)參數(shù)了解一下2024/06/27
            
					
            
				循環(huán)次數(shù)：一般為25a～30次。循環(huán)數(shù)決定PCR擴(kuò)增的產(chǎn)量。模板初始濃度低，可增加循環(huán)數(shù)以便達(dá)到有效的擴(kuò)增量。但循環(huán)數(shù)并不是可以無限增加的。一般循環(huán)數(shù)為30個(gè)左右，循環(huán)數(shù)超過30個(gè)以后，DNA聚合酶活性逐漸達(dá)到飽和，產(chǎn)物的量不再隨循環(huán)數(shù)的增加而增加，出現(xiàn)了所謂的“平臺(tái)期"。循環(huán)參數(shù)如下:1.預(yù)變性模板DNA*變性與PCR酶的*激活對(duì)PCR能否成功至關(guān)重要，建議加熱時(shí)間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活時(shí)間為兩分鐘。2.變性步驟循環(huán)中一般95℃，30秒足以使各種靶DNA序列*變性，可能的情況
					
            
				
            
								
            
					
            熒光定量PCR試劑盒使用方法2024/06/26
            
					
            
				樣品采集：1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）使用方法：1.注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試驗(yàn)結(jié)果空白背景高造成原因2024/06/24
            
					
            
				試驗(yàn)結(jié)果空白背景高，這是什么原因造成的?試驗(yàn)結(jié)果空白背景高，常見原因如下：a)可能原因：洗板不干凈;解決方法：充分洗滌，che底拍干;洗板要防止交叉污染;濃縮洗液準(zhǔn)確配制;吸嘴盡可能一次性使用;加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染。b)可能原因：顯色液變質(zhì)或者試劑過期;解決方法：檢查試劑盒有效期。c)可能原因：試劑稀釋有誤，如加酶的濃度過高;解決方法：請(qǐng)按說明書所示稀釋倍數(shù)配制;d)可能原因：蒸餾水受酶等污染;解決方法：使用新鮮蒸餾水;e)可能原因：試劑混用;
					
            
				
            
								
            
					
            關(guān)于ELISA試劑盒的種類2024/06/21
            
					
            
				ELISA試劑盒的五大種類:一、生物原裝ELISA試劑盒以及各類國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，趨化因子，細(xì)胞因子受體，粘附分子，生長(zhǎng)因子，凋亡因子等。二、食品安全檢驗(yàn)ELISA試劑盒指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒，以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品。包括植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒，以及動(dòng)植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測(cè)試劑盒。三、傳
					
            
				
            
								
            
					
            人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件2024/06/20
            
					
            
				人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件：1、合適的小鼠源細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營(yíng)養(yǎng)成分。3、無菌無毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對(duì)微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染，或者自身代謝
					
            
				
            
								
            
					
            PCR反應(yīng)詳細(xì)基本步驟2024/06/20
            
					
            
				聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（Polymerasechainraction,PCR）是一種在體外擴(kuò)增特定DNA片段的方法，具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)，可用很短時(shí)間使目的基因或某一片段擴(kuò)增十萬乃至幾百萬倍。PCR反應(yīng)基本步驟：1、變性：根據(jù)DNA高溫變性的原理，將反應(yīng)體系溫度升至變性溫度（高于模板熔點(diǎn)，約95℃），使目的DNA雙鏈裂解成PCR模板（單鏈）。[95℃，30s]2、退火：將反應(yīng)體系溫度驟降至退火溫度（低于引物熔點(diǎn)約55℃），是PCR引物與PCR模板3’端雜交，
					
            
				
            
								
            
					
            影響抗原抗體反應(yīng)因素2024/06/20
            
					
            
				影響抗原抗體反應(yīng)的兩個(gè)因素：1、反應(yīng)物自身的因素抗體：不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗(yàn)的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價(jià)帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.2、反應(yīng)環(huán)境條件酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行.蛋白質(zhì)具有兩性電離
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染源2024/06/14
            
					
            
				在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，難免培養(yǎng)的細(xì)胞被污染了，得不到想要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，那么你知道細(xì)胞培養(yǎng)的污染來源有哪些嗎？細(xì)胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：一、不潔的動(dòng)物組織標(biāo)本很多動(dòng)物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外)，但由于取材時(shí)不小心也會(huì)有污染的機(jī)會(huì)。組織本身含有細(xì)菌，如取材時(shí)不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡，也會(huì)帶菌，造成細(xì)胞污染。二、空氣空氣中含有大量的微生物，如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下，很容易造成污染。另外，凈化工作臺(tái)使用過久，濾板未定期更換或長(zhǎng)久不更換，
					
            
				
            
								
            
					
            抗體保存溫度和條件2024/06/14
            
					
            
				抗體保存溫度和條件抗體的保存方法一般會(huì)直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下，大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年，一般情況需嚴(yán)格按照抗體說明書來進(jìn)行保存?？贵w保存溫度和條件:1、抗體收到后，需在12000rpm離心1~5分鐘，再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存，如果抗體體積不足50ul，可延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘，從而確?？贵w全部離心下來。2、對(duì)于多數(shù)抗體而言，分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zuijia選擇。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存，因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長(zhǎng)期在置于4℃條件會(huì)導(dǎo)致
					
            
				
            
								
            
					
            Elisa酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)方法優(yōu)缺點(diǎn)2024/06/14
            
					
            
				ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級(jí)檢測(cè)抗體（primarydetectionAb），形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標(biāo)記了，即可用來直接測(cè)定抗原的量，若無，則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系，依此原理計(jì)算出樣本中的抗原總量或濃度。1.直接法（
					
            
				
            
								
            
					
            佰利萊生物為您講解PCR反應(yīng)效率低值解析2024/06/14
            
					
            
				佰利萊生物為您講解PCR反應(yīng)效率低值解析反應(yīng)效率視為實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析設(shè)計(jì)和優(yōu)化的關(guān)鍵因素。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(通過對(duì)目標(biāo)模板進(jìn)行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應(yīng)的“健康”標(biāo)志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩種情形的步驟則相差甚遠(yuǎn)。理想的反應(yīng)效率為100%，但反應(yīng)效率在90–110%范圍內(nèi)都是可以接受的。確定某個(gè)特定的分析效率是否低下的方法是稀釋模板生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(模板稀釋的范圍應(yīng)涵蓋所有未知樣本)，然后查看該范圍內(nèi)的效率。它應(yīng)盡可能接近100%。熔解曲線出現(xiàn)多個(gè)峰
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)溫育解讀2024/06/14
            
					
            
				ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加酶結(jié)合物和顯色劑后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育。溫育的時(shí)間選擇:溫育這一步是ELISA測(cè)定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃30分鐘-1小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時(shí)才能有較wan全的結(jié)合，低于1小時(shí)，可能會(huì)影響測(cè)定下限。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒結(jié)果應(yīng)該如何判斷2024/05/30
            
					
            
				ELISA試劑盒結(jié)果判定：1、結(jié)果的判定嚴(yán)格依據(jù)試劑盒提供的陽性判定值（CO）進(jìn)行結(jié)果判定。廠商提供試劑的同時(shí)，說明書上列出的CO值是建立在一系列科學(xué)試驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)研究的基礎(chǔ)上，不應(yīng)隨意更改。定量測(cè)定需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算結(jié)果。2、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下ELISA結(jié)果報(bào)告方式為“陰性"或“陽性"，在二者之間有一條明確的分界線，也就是所謂的陽性判定值即CO值，對(duì)于樣本的吸光度值（A）高于CO值就判斷為陽性，相反則判斷為陰性，然而在實(shí)際工作中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)樣本A值位于CO值附近的人群，即ELISA
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧總括2024/05/20
            
					
            
				細(xì)胞是生命的基本單位。（除了病毒外。）細(xì)胞由細(xì)胞核組成和細(xì)胞膜還有線粒體等組成。（除個(gè)別生物）小到細(xì)菌大至鯨魚。都由細(xì)胞組成。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧總括:1.買細(xì)胞要去正規(guī)的地方購買，一般產(chǎn)品資料上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的詳細(xì)介紹，這樣在培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。2.不管是買的細(xì)胞，還是他人惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手需要趕緊做的兩件事：一檢測(cè)是否有支原體污染;二迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。3.發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污
					
            
				
            
								
            
					
            化學(xué)氣體滅菌法有哪些2024/05/17
            
					
            
				化學(xué)滅菌法系指利用化學(xué)藥品的氣體或產(chǎn)生的蒸汽進(jìn)行殺滅微生物的方法。同一種化學(xué)藥品的低濃度時(shí)呈現(xiàn)抑菌作用，而在高濃度時(shí)則能起殺菌作用。其殺菌機(jī)理可能是：能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡，或與酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝，或改變膜壁通透性使微生物死亡等?；瘜W(xué)氣體滅菌法可分為三種：臭氧消毒法、甲醛等蒸汽熏蒸法、環(huán)氧乙烷滅菌法。下面詳解三種化學(xué)氣體滅菌法：1.臭氧消毒法臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化
					
            
				
            
								
            
					
            抗體制備三個(gè)階段具體是什么2024/05/15
            
					
            
				抗體是什么：抗體是哺乳動(dòng)物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)對(duì)抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識(shí)別并結(jié)合特異的病原體抗原，隨后通過介導(dǎo)中和作用、調(diào)理作用、效應(yīng)T細(xì)胞殺傷等來清除病原體。隨著抗體制備與改造技術(shù)的飛速發(fā)展，抗體已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，包括科學(xué)研究、診斷、治療等?？贵w的制備歷史和工藝決定了抗體的質(zhì)量和類型。抗體制備工藝可分為三個(gè)階段：傳統(tǒng)方法免疫動(dòng)物獲得抗體、應(yīng)用雜交瘤技術(shù)制備抗體和基因工程技術(shù)制備抗體。具體如下：1、傳統(tǒng)方法免疫動(dòng)物制備抗體：將
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死有哪些區(qū)別呢？2024/05/08
            
					
            
				細(xì)胞凋亡（apoptosis）指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程，而是主動(dòng)過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并不是病理?xiàng)l件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過程。壞死（necrosis）：壞死是細(xì)胞受到強(qiáng)烈理化或生物因素作用引起細(xì)胞無序變化的死亡過程。表現(xiàn)為細(xì)胞脹大，胞膜破裂，細(xì)胞內(nèi)容物外溢，核變化較慢，DNA降解不充分，引起局部嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別在于，雖
					
            
				
            
							
				
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