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透析袋的用處2023/02/10

透析袋是用半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液"，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液"或“透析液"。新透析袋可用沸水煮五至十分鐘，再用蒸餾水洗凈，即可使用。透析膜可用動物膜和玻璃紙等，但用的多的還是用纖維素制成的透析膜，截留分子量MWCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量）。截留分子量越大也就是說透過性

ELISA試劑盒中常用的方法類型2023/02/09

ELISA試劑盒中常用的方法類型!ELISA是EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay的簡稱，即酶聯(lián)免疫吸附測定，是研究蛋白抗體的重要方法。它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶進行直接或間接結(jié)合，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應，進行定性和定量分析。我們一起聊聊常見的商業(yè)化ELISA試劑盒的方法種類以及它們各自的優(yōu)勢和用途：ELISA大致分為五種類型：直接法、間接法、競爭法、夾心法、捕獲包被法。在商品化試劑盒中用得比較多的是雙抗體夾心法、競爭法和間接法。雙抗體夾心法是夾心法中的

緩沖液的原理2023/02/09

由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H+離子基本上被A-離子消耗：所以溶液的pH值幾乎不變；當加入一定量強堿時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc

細胞樣操作步驟注意事項2023/02/09

一、操作步驟：1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上，用培育基培育，時間通過預試驗確定；2、細胞長好后，用洗刷液洗2分鐘×3次，室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min，蒸餾水洗刷；3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞，（干燥后-20℃冰凍保存2周以上）4、雜交前將固定的細胞進行如下處理；順次在70%，90%，100%的乙醇中浸泡，脫水每次5min，用二jia苯洗刷，除掉殘留脂質(zhì)順次在100%，90%，70%乙醇中浸泡，進行再水化，每次5min，后浸泡于洗刷液中；5、在37℃用

細胞凍存液配制方法2023/02/08

細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分重要

實驗室常用細胞耗材及其用途2023/02/08

細胞耗材是細胞培養(yǎng)過程中的實驗工具，經(jīng)常用到的耗材包括培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板三種，那么他們各自都有什么用途呢?1、培養(yǎng)皿：培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細胞培養(yǎng)的實驗室器皿，由一個平面圓盤狀的底和一個蓋組成，一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚yixi材料的，有一次性的和多次使用的，適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。2、培養(yǎng)板：細胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平

瓊脂糖凝膠的作用2023/02/08

瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學修飾后熔點降低的低熔點瓊脂糖，瓊脂糖的熔點在62?65°C之間，融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時，30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內(nèi)進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離?；窘Y(jié)構(gòu)瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下，它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的，可以在許多條件下使用（如水，pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液）。瓊脂糖凝膠在40℃

實驗室中針式過濾器使用方法2023/02/08

針式過濾器是在實驗室中HPLC及IC分析時進行樣品前處理的重要耗材，可以過濾樣本溶液，去顆粒污染物，保護儀器。作為實驗室常規(guī)使用的方便可靠的過濾工具，針式過濾器有利于實驗操作步驟的簡化，可以大幅提高工作效率。掌握針式過濾器的使用方法核注意事項十分重要。針式過濾器有不同的膜材質(zhì)，不同材質(zhì)的膜應用不同，應該根據(jù)實驗需要選取適合樣本過濾的膜，將針式過濾器連接到注射器上，要輕輕擰緊以保證密封良好，針式過濾器分滅菌和非無菌兩種類型，滅菌型針式過濾器使用前需進行預處理，過濾器安裝完成后用清水對過濾系統(tǒng)進行沖

超氧化物岐化酶2023/02/08

超氧化物歧化酶（SuperoxideDismutase，SOD）是生物體內(nèi)存在的一種抗氧化金屬酶，它能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用，與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分。分類按照SOD中金屬輔基的不同,大致可將SOD分為三大類，分別為Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD。①Cu/Zn-SOD：呈藍綠色,主要存在于真核細胞的細胞質(zhì)內(nèi)，被認為存在于比較原始的生物類群中且分布較多的一種。②Mn-SOD：呈粉紅色,主要存在于原核生物和真核生物

犬流感病毒抗體（FLU-Ab） ELISA檢測試劑盒 使用說明書2023/02/06

檢測原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被流感病毒抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并全部洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的流感病毒抗體（FLU-Ab）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血

細胞凋亡概念與解釋2023/02/03

細胞凋亡與程序性死亡其實從嚴格的詞學意義上來說，細胞程序性死亡（PCD）與細胞凋亡是有很大區(qū)別的。細胞程序性死亡的概念是1956年提出的，PCD是個功能性概念，描述在一個多細胞生物體中某些細胞死亡是個體發(fā)育中的一個預定的，并受到嚴格程序控制的正常組成部分。例如蝌蚪變成青蛙，其biantai過程中尾部的消失伴隨大量細胞死亡，高等哺乳類動物指間蹼的消失、顎融合、視網(wǎng)膜發(fā)育以及免疫系統(tǒng)的正常發(fā)育都必須有細胞死亡的參與。這些形形色色的在機體發(fā)育過程中出現(xiàn)的細胞死亡有一個共同特征：即散在的、逐個地從正常組

脫氧核糖核酸與蛋白質(zhì)的作用2023/02/03

所有DNA功能都取決于其與特定蛋白質(zhì)的相互作用。這些相互作用可以是非特異性的，也可以是極其特異性的。還有許多可以結(jié)合DNA的酶，其中，在DNA轉(zhuǎn)錄和復制中復制DNA序列的聚合酶特別重要。DNA與組織蛋白的交互作用，這種蛋白質(zhì)中的堿性氨基酸，可與DNA上的酸性磷酸基團結(jié)合。結(jié)合DNA的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白可與DNA結(jié)合，是非專一性DNA-蛋白質(zhì)交互作用的常見例子。染色體中的結(jié)構(gòu)蛋白與DNA組合成復合物，使DNA組織成緊密結(jié)實的染色質(zhì)構(gòu)造。對真核生物來說，染色質(zhì)是由脫DNA與一種稱為組織蛋白的小型堿性蛋白

緩沖液原理2023/02/03

由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H+離子基本上被A-離子消耗：所以溶液的pH值幾乎不變；當加入一定量強堿時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc

細胞凍存液原理及配制方法2023/02/03

細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分重要

冷凍包埋的流程2023/02/03

1.將放在蔗糖溶液中的組織塊取出，放入20gL-1蔗糖與OCT包埋劑1：1體積比例混合液中，室溫浸泡2h2.移入OCT包埋劑中室溫浸泡4h，更換新的OCT包埋劑，室溫浸泡6h.3.將標本置于托物臺，用恒冷箱切片機切片（一般-22℃），片厚10μm，貼于預處理的載玻片上，-20℃冰箱保存。OCT冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已廣泛用于免疫組化實驗室中，其用途是在冰凍切片時支撐組織，以增加組織的連續(xù)性，減少皺折及碎裂。又因OCT混合物為水溶性，故在漂片時可溶于水，所以在以

胎牛血清與其它牛血清有什么區(qū)別？2023/02/02

根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為：?胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后，發(fā)育未wanquan的胎牛心臟密閉穿刺采血后，通過一系列工藝處理最終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子，一旦胚胎發(fā)育wanquan這些因子會自動消失。?新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）：出生14小時內(nèi)未進食的新生牛，通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。?小牛血清（CalfSerum）：出生后3天至6月齡小牛動脈采血分離血

細胞培養(yǎng)環(huán)境及條件2023/02/02

1．無菌環(huán)境無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。細胞在活體內(nèi)，解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵，但細胞在體外培養(yǎng)的過程中，缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質(zhì)的解毒能力。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖，必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性，可與細胞長期共存，對細胞有潛在影響，但體積小，不易鑒別，可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進行檢測。細菌增殖快，在短時

胎牛血清的區(qū)別與作用2023/02/02

一、什么是胎牛血清？胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血，經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體，后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1µm終端微濾方法處理后，常用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗。二、胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別？根據(jù)牛出生時間和血清采集分離方法分為：?胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后，發(fā)育未wanquan的胎牛心臟密閉穿刺采血后，通過一系列工藝處理最終獲得。

冰凍切片的原理及方法介紹2023/02/02

實驗方法原理：冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑，將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學藥品處理或加熱過程，大大縮短了制片時間。同時，由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟，因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學的制片，并作為快速切片的方法應用在臨床診斷。實驗材料：新鮮組織試劑、試劑盒：H2O2酒精丙酮PBSDAPI工作液中性樹膠儀器、耗材：OCT速凍架恒冷箱切片機烘箱熒光顯微鏡實驗步驟：一取材應盡可能快地采取新鮮的材料，防止組織發(fā)生

離心管如何選擇？2023/02/02

離心管是離心機中最重要的配件之一，它主要是用來承裝實驗樣品的，我們使用離心機時，首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。那么，了解過離心管的作用之后，你知道離心管應該如何選擇嗎？想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì)，離心管的材質(zhì)一般分為三種，第一種是塑料離心管，第二種是玻璃離心管，第三種是鋼制離心管。一般來說，我們zuichangyong的離心管就是塑料離心管，塑料離心管的優(yōu)缺點也很明顯，優(yōu)點是它的硬度較小，可以利用穿刺法來得到我們需要的物質(zhì)。但這也正是它的缺點，因為硬度小，所以它