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2021
08-31

堿性固綠染色液的使用步驟
不同的氨基酸帶有不同化學(xué)性質(zhì)的側(cè)鏈基團(tuán)，有的帶有堿性側(cè)鏈，有的帶有酸性側(cè)鏈，由此組成的蛋白質(zhì)具有不同數(shù)目的堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)，這些基團(tuán)會使蛋白質(zhì)在不同的pH溶液中帶有不同的凈電荷，整個蛋白質(zhì)分子帶正電荷多，即為堿性蛋白。堿性固綠染色液是利用堿性蛋白質(zhì)與帶有負(fù)電荷的堿性染料固綠結(jié)合進(jìn)行染色，細(xì)胞中含量最為豐富的堿性蛋白為組蛋白，主要存在于細(xì)胞核中，因此染色后細(xì)胞核大部分被染成綠色。使用步驟：1.取新鮮血液1滴滴于載玻片一端，推片，室溫晾干。2.涂片浸入70%乙醇中固定5min，室溫晾干。3.涂片浸
2021
08-27

草酸銨結(jié)晶紫染色液的介紹
草酸銨結(jié)晶紫染色液是革蘭氏染色法中的一種成分,主要由草酸銨、結(jié)晶紫、乙醇等組成。革蘭陽性菌染色中,細(xì)胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理，形成不溶性復(fù)合物，該復(fù)合物不能通過細(xì)胞壁,不易被脫色,所以保持紫色。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,而用以分類鑒定。草酸銨結(jié)晶紫染色液是一種組織或細(xì)胞染色時常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。用于革蘭氏染色。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，可以與細(xì)胞核中的核酸結(jié)合把核染成藍(lán)色。無論活細(xì)胞還
2021
08-27

在使用熒光蛋白上樣緩沖液需要關(guān)注哪些細(xì)節(jié)？
熒光蛋白上樣緩沖液在電泳前的樣品處理階段對SDS-PAGE的蛋白樣品進(jìn)行預(yù)染，標(biāo)記上熒光。實驗完成以后，凝膠中或轉(zhuǎn)膜后的蛋白條可直接通過紫外燈、LED燈或其他數(shù)字成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察和分析，無需染色脫色。熒光蛋白上樣緩沖液靈敏度高比銀染高。穩(wěn)定性強(qiáng)，背景低?？蓪λ械鞍走M(jìn)行染色，不影響蛋白的遷移率與電泳圖譜。電泳過程中，游離的染料分子與溴酚藍(lán)的遷移速率一致，跑膠結(jié)束時移至凝膠末端，背景干凈。熒光蛋白上樣緩沖液非常適合用于追蹤蛋白表達(dá)純化以及Westernblot的SDS-PAGE。熒光蛋白上樣緩沖液
2021
08-27

那些年對于ELISA試劑盒檢測數(shù)據(jù)的疑惑
“隔壁的實驗室又發(fā)了3篇SCI文章，我們還在處理數(shù)據(jù)，這幾家的試劑盒檢測數(shù)據(jù)怎么都不一樣？”小編每當(dāng)聽到這句話，每次感受都不同。對那些努力鉆研數(shù)據(jù)的學(xué)者、那些把青春獻(xiàn)給實驗室的研究生們表示深深的同情。那么，造成試劑盒檢測數(shù)據(jù)不一樣的原因，除了一些實驗操作、實驗環(huán)境等客觀因素外，還有試劑盒質(zhì)量參數(shù)，如重復(fù)率、板內(nèi)差、板間差、線性稀釋、回收率等。但是，最重要的影響因素可能是作為檢測標(biāo)尺的標(biāo)準(zhǔn)品。所以，下面我們就揭曉影響不同ELISA試劑盒檢測數(shù)據(jù)的差異和關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)品的幾個疑惑。不同的ELISA試劑盒如
2021
08-19

全蛋白提取試劑盒的優(yōu)勢及使用注意要點
全蛋白提取試劑盒可用于從哺乳動物組織和細(xì)胞中提取全蛋白，用含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液勻漿裂解組織或細(xì)胞，提取過程簡便高效。獲得的全蛋白可用于WesternBlot、IP等后續(xù)研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究。全蛋白提取試劑盒具有哪些優(yōu)勢？1.提取的蛋白質(zhì)包括膜、核、核基質(zhì)和胞質(zhì)蛋白，而且更大限度保持蛋白質(zhì)活性。2.可以用于培養(yǎng)細(xì)胞，有可以用于動物組織蛋白質(zhì)的提取。3.避免蛋白酶和磷酸酶對蛋白質(zhì)的降解，保持蛋白質(zhì)的完整性和天然活性。4.不需要超速度離心，可以同時處理多個樣品。5.
2021
08-09

鈣鹽染色液的使用說明
鈣在人體內(nèi)大量存在,構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。許多染料可以于鈣形成螯合物，包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物,是茜素磺酸鈉鹽，它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法,Leagene鈣鹽染色液采用VonKossa硝酸銀法，其原理在于該法是一種金屬置換法,硝酸銀溶液作用于含有不溶性鈣鹽的切片時，鈣被銀所置換，銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀，適用于大量樣本的鈣鹽組織染色?？捎?
2021
08-06

ATP酶活性檢測試劑盒的測定原理
ATP酶又稱為三磷酸腺苷酶，是一類能將三磷酸腺苷（ATP）催化水解為二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根離子的酶，這是一個釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下，能量可以通過傳遞而被用于驅(qū)動另一個需要能量的化學(xué)反應(yīng)。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。ATP作為最重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變，會影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會下降；而高葡萄糖刺激等可上調(diào)某些細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降
2021
07-30

紅細(xì)胞稀釋液怎么使用？
紅細(xì)胞稀釋液主要用于紅細(xì)胞體外診斷試劑的稀釋，該產(chǎn)品加入了抑菌物質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、緩沖物質(zhì)等。能使紅細(xì)胞膜保持完整，并保持紅細(xì)胞抗原的穩(wěn)定性。對樣本的要求:1．用于稀釋的紅細(xì)胞必須是新鮮的無脂血、無溶血、無凝集顆粒。2．洗滌紅細(xì)胞過程中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象不能使用。操作步驟:1、取小號試管，加RBCdilution2.0ml.2、用清潔干燥微量吸管取末梢血或抗凝血10u1，擦去管外余血后加至RBCdilution底部，輕輕將血放出，再輕吸上層清液清洗吸管2~3次，立即混勻。3、混勻后，用干凈微量吸管將紅細(xì)胞
2021
07-28

鹽酸恩諾沙星的藥理作用及用途
鹽酸恩諾沙星的藥理作用:主治廣譜抗菌素，禽的呼吸道、消化道、泌尿道、生殖系統(tǒng)及全身感染。對革蘭氏陰性菌有很強(qiáng)的殺滅作用，對革蘭氏陽性菌和支原體也有良好的抗菌作用，能顯著降低死亡率，病畜復(fù)原快，生長迅速。鹽酸恩諾沙星能阻斷細(xì)菌DNA的復(fù)制而呈快速殺菌作用，且本品采用分散體工藝技術(shù)，以高分子優(yōu)質(zhì)材料載體，使不溶水的恩諾沙星以分子態(tài)在水中均勻分散，克服了恩諾沙星的不溶水性，增加了其它機(jī)體組織的親和力和分布面。使其生物利用度提高4倍。鹽酸恩諾沙星用于雞支原體?。院粑兰膊。?、禽大腸桿菌病、雞白痢、禽
2021
07-26

四環(huán)素類抗生素的鑒定方法有哪些？
四環(huán)素類抗生素是主要抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成的廣譜抗生素，高濃度具有殺菌作用。其抗菌譜廣，對革蘭氏陰性需氧菌和厭氧菌、立克次體、螺旋體、支原體、衣原體及某些原蟲等有抗菌作用。四環(huán)素類抗生素具有共同的基本母核（氫化駢四苯），僅取代基有所不同。它們是兩性物質(zhì)，可與堿或酸結(jié)合成鹽，在堿性水溶液中易降解，在酸性水溶液中則較穩(wěn)定，故臨床一般用其鹽酸鹽。四環(huán)素類抗生素的測定方法主要包括微生物抑制法、酶聯(lián)免疫法、分光光度法、毛細(xì)管電泳色譜法、薄層色譜法、高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等。樣品經(jīng)過提取和凈化后，四環(huán)
2021
07-22

在制備瓊脂糖的過程中應(yīng)注意什么？
瓊脂糖是線性多糖，是由半乳糖和內(nèi)醚半乳糖這兩種單糖交替連接構(gòu)成的。瓊脂糖為白色或微黃色的粉末，無臭。溶于熱水及二甲基亞砜及甲酷胺溶液中。瓊脂糖具有溶膠礙熱可逆特性。瓊脂糖具有親水性，并幾乎*不存在帶電基團(tuán)，對敏感的生物大分子極少引起變性和吸附，是理想的惰性載體。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠，這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高，凝膠性能越好。質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在1200克/cm2以上(1%膠
2021
07-13

葡萄糖氧化酶測試盒樣品的制備與測定
葡萄糖氧化酶廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。葡萄糖氧化酶測試盒具有質(zhì)量可靠、*、效果精定、靈教度高、操作簡單、易保存等特點。試劑的組成配制：提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體19.2mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存；試劑三：液體1mL×1支，4℃保存；樣品測定的準(zhǔn)備：組織處理：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)
2021
07-08

丙酮酸脫氫酶活性檢測試劑盒的檢測步驟
丙酮酸脫氫酶是一種催化丙酮酸脫羧反應(yīng)的多酶復(fù)合體，有三種酶和六種輔助因子參與化學(xué)反應(yīng)。分別是丙酮酸脫氫酶，二氫硫辛酰胺轉(zhuǎn)乙酰酶，二氫硫辛酸脫氫酶。丙酮酸脫氫酶(PDH)是一種線粒體酶,可以催化丙酮酸鹽向乙酰輔酶A和CO2的轉(zhuǎn)化,同時還是聯(lián)系三羧酸(TCA)和糖酵解的媒介。該酶受到磷酸化作用的抑制,可在脫磷酸作用下激活。PDH的突變還與丙酮酸脫氫酶的效率（產(chǎn)生乳酸和神經(jīng)機(jī)能障礙）和亞急性壞死性腦脊髓病有關(guān)。通過酶促分析,可以測定丙酮酸脫氫酶的活性,該反應(yīng)會產(chǎn)生與所含的酶活性成正比的比色(450nm
2021
06-11

避免失活，生物試劑存放運輸過程中的注意事項
生物試劑是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機(jī)化合物，以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。主要包括：電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑、組織化學(xué)試劑、透變劑和致癌物質(zhì)等等。試劑的存放一直是被忽略的一個問題，由于生物制品由蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核酸組成，在保存過程中必須防止失活。生物試劑的存放與運輸注意事項：1、干冰是固體二氧化碳，溫度為零下78℃，濕冰就是冰的溫度，一般為冷凍條件的溫度，如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對于一些酶類等蛋白產(chǎn)品，需要干冰運輸，其他大多數(shù)生化試劑采用
2021
06-03

關(guān)于WB實驗中蛋白樣品制備的常見問題分析
WB實驗又稱免疫印跡實驗，是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。對于一直都在做蛋白研究的你，在樣品制備中的小細(xì)節(jié)你都了解嗎？這里為大家整理了蛋白樣品制備中大大小小的常見問題，一起來學(xué)習(xí)吧！1、所有WB實驗都用總蛋白就可以完成嗎？當(dāng)然不是，要根據(jù)WB的實驗?zāi)康膩泶_定提取哪類蛋白，如需驗證某些低豐度蛋白，或蛋白定位
2021
05-13

關(guān)于核酸變性預(yù)制膠的操作步驟，你了解多少？
核酸變性預(yù)制膠在分離片段DNA分子時效果很好，分辨率很高，甚至相差1bp的DNA的片段都能分開，一個標(biāo)準(zhǔn)點樣孔中可以容納相對大量的DNA。所以常被用于蛋白印跡實驗、遺傳圖譜構(gòu)建、數(shù)量形狀基因定位、標(biāo)記輔助選擇等生物多樣性研究等。核酸變性預(yù)制膠的操作步驟：一、非變性預(yù)制膠：1、準(zhǔn)備樣品：將樣品和loadingbuffer（5×）按照4：1混合均勻。2、準(zhǔn)備1×runningbuffer：取200ml的5×TBEbuffer，加入去離子水至1L，制備成1×TBEbuffer。3、將預(yù)制膠裝入兼容的電
2021
05-11

教你成為平淡無奇的WB小能手-結(jié)尾篇
大家好，小編又又又來了。今天是WB最后一步了，抗體孵育到顯影過程。01一抗孵育◆封閉結(jié)束前20min準(zhǔn)備和所需一抗數(shù)量相等的孵育盒，在孵育盒上用記號筆標(biāo)注出抗體編號及所需稀釋比。按照規(guī)定的稀釋比例進(jìn)行抗體稀釋。稀釋比例建議預(yù)實驗提前摸索或者根據(jù)抗體說明書上建議?！舴忾]時間結(jié)束之后，倒掉封閉液，將稀釋好的抗體加入到槽內(nèi)，將搖床放入4℃展示柜孵育過夜。◆第二天將搖床搬出，平衡室溫?fù)u15min，倒掉一抗工作液，加入5mLTBST潤洗膜一次，倒掉，加新的TBST洗膜5min，倒掉TBST，重復(fù)5次，此過
2021
05-07

Elisa檢測試劑盒的顯色液A和B有什么作用？
Elisa檢測試劑盒具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測定,為輔助臨床診斷與生物科研起到了積的作用。Elisa檢測試劑盒檢測中顯色液A和B有什么作用？酶聯(lián)免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A（含過氧化氫）為供氫體（DH2）,底物B就是顯色劑B（含TMB）,用于顯色。另外，常用的底物還有：AP的底物，常用的為對-硝基苯磷酸脂（PNP），其反應(yīng)物為黃色的對硝基酚，測讀波長為405nm2）GOD的底物，為葡萄糖，供氫體為對硝基藍(lán)四氮唑，反應(yīng)產(chǎn)物為不溶性的藍(lán)色沉淀。什么是
2021
03-26

土壤中性磷酸酶測試盒的測定意義是什么？
土壤中性磷酸酶測試盒實驗效果好，具有靈敏度高，快速、準(zhǔn)確、操作簡單、易于保存等優(yōu)點。測定意義：土壤磷酸酶是催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的影響，根據(jù)最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒測定原理:中性環(huán)境中，S-NP催化磷酸苯一鈉水解牛成和磷酸氫一鈉，誦討測定酚的牛成量即可計算出NP活性。注意事項：
2021
03-25

赫斯特?zé)晒馊玖蠟榧?xì)胞多色成像提功有效方法
赫斯特?zé)晒馊玖鲜怯H脂性熒光染料家族成員之一，它可以用來標(biāo)記細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)熒光染料與細(xì)胞膜結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。隨著生命科學(xué)的發(fā)展及熒光影像技術(shù)的不斷突破，基于熒光染料的分析手段在生物分子標(biāo)記領(lǐng)域、藥物篩選、外科手術(shù)指導(dǎo)甚至癌癥的診斷及治療等領(lǐng)域也發(fā)揮著越來越重要的作用。熒光染料的兩個18-碳鏈插入到細(xì)胞膜，從而進(jìn)行特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色，幾乎不會發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。赫斯特?zé)晒馊玖蠠晒馊玖虾推渌?xì)胞膜熒光染料如橙色熒光，綠色熒光紅色熒光配合使用，為多色成像和流式細(xì)胞分析提供

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