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2015
05-18

ELISA體外診斷試劑技術(shù)指導(dǎo)原則
ELISA試劑盒各組分的診斷試劑盒主要組分的包括包被反應(yīng)板、標(biāo)記物制備、各種溶液的配置、凍干、分包裝等步驟；并通過(guò)產(chǎn)品的半成品檢驗(yàn)和成品檢驗(yàn)兩個(gè)質(zhì)控過(guò)程來(lái)完成。(一)固相載體的制備（因不同產(chǎn)品使用的包被載體有很大區(qū)別，在此以標(biāo)準(zhǔn)96孔微孔反應(yīng)板為例進(jìn)行描述）1．包被板的準(zhǔn)備準(zhǔn)備經(jīng)檢驗(yàn)合格的包被板，記錄批號(hào)、數(shù)目、狀態(tài)標(biāo)識(shí)。質(zhì)控項(xiàng)目：尺寸，外觀，包裝。2．包被液的配制配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原到工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用。質(zhì)控項(xiàng)目：包被緩沖液
2015
05-15

血清/血漿樣本用于microRNA研究的挑戰(zhàn)
ELISA試劑盒大量研究表明，血液循環(huán)中的microRNA表達(dá)變化指征著疾病的發(fā)生和發(fā)展階段。同時(shí)，血液樣品在臨床易于獲取，且穩(wěn)定不易降解，因此對(duì)于microRNA標(biāo)記物篩選具有廣闊研究前景。血清/血漿樣本用于microRNA研究的挑戰(zhàn)?血清血漿中不包含細(xì)胞，且microRNA含量低?microRNA高度同源，例如hsa-let-7家族各成員?紅細(xì)胞破裂發(fā)生溶血后，會(huì)釋放抑制RT和PCR反應(yīng)的物質(zhì)?常規(guī)內(nèi)參（如U6等）在血清血漿中含量不穩(wěn)定，不適合作為內(nèi)參對(duì)照基因111643-200301香葉醇
2015
05-14

抗原修復(fù)技術(shù)
盡管固定對(duì)于組織形態(tài)的保留是*的，但這一過(guò)程對(duì)IHC/ICC檢測(cè)也有不良影響。固定可能會(huì)改變蛋白的生化特性，如目的表位被掩蓋，或不再與一抗結(jié)合。表位的掩蓋可能是由氨基酸與表位的交聯(lián)、表位附近無(wú)關(guān)肽段的交聯(lián)、表位構(gòu)象的改變或抗原靜電荷的改變引起的?？乖迯?fù)指的是逆轉(zhuǎn)表位掩蓋和恢復(fù)表位-抗體結(jié)合的技術(shù)。抗原修復(fù)技術(shù)抗原修復(fù)的需要取決于多個(gè)變量，包括但不限于，目的抗原、所使用的抗體、組織類型，以及固定方法和持續(xù)時(shí)間。多克隆抗體能識(shí)別多個(gè)表位，因此即使不進(jìn)行抗原修復(fù)，它們也比單克隆抗體更有可能檢測(cè)到特定
2015
05-13

酶聯(lián)免疫使用試劑盒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中值得關(guān)注的問(wèn)題
1、儀器質(zhì)控為使儀器保持*工作狀態(tài)，應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍）、溫箱、洗板機(jī)和酶標(biāo)儀?！蛞埔浩鳎篍LISA試劑盒加樣量小（20-200μl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱重法檢查：低、中、高三個(gè)刻度分別吸取指示量的水，萬(wàn)分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±5%以內(nèi)；◎恒溫箱：經(jīng)常檢查恒溫箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測(cè)溫度是否一致，允許有±1℃的誤差；◎洗板機(jī)：每個(gè)設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定，一般不超過(guò)2μl；人工扣板
2015
05-12

人巨細(xì)胞病毒基因組測(cè)序
人巨細(xì)胞病毒是一種很常見(jiàn)的皰疹病毒，感染約50-100％的成人，ELISA試劑盒但通常沒(méi)有不良影響，并且它可以保持潛伏多年。人巨細(xì)胞病毒感染是比較常見(jiàn)的，發(fā)展中國(guó)家感染人數(shù)比發(fā)達(dá)國(guó)家人數(shù)多。該病毒可導(dǎo)致出新生兒生缺陷和免疫系統(tǒng)受損，可能會(huì)導(dǎo)致致命疾病。該病毒也與癌癥發(fā)展有關(guān)聯(lián)。這項(xiàng)新的研究分析了病毒的蛋白質(zhì)組，并描述了所有表達(dá)的蛋白質(zhì)。研究人員認(rèn)為，以往研究潛在編碼蛋白質(zhì)的基因組很大程度上是計(jì)算機(jī)模型上的，這是不完整的。二十多年來(lái)，16個(gè)病毒株人巨細(xì)胞病毒基因組已被測(cè)序。這是一個(gè)特別大的病毒基因
2015
05-11

ELISA試劑盒注意的細(xì)節(jié)要點(diǎn)
ELISA試劑盒注意的細(xì)節(jié)要點(diǎn)：1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。73590-58-6奧美拉唑標(biāo)準(zhǔn)品Omeprazole200mgELISA試劑盒8
2015
05-08

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)
使用注意事項(xiàng)：1、ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔OD值的)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui
2015
05-07

ELISA試劑盒的標(biāo)本復(fù)查
ELISA試劑盒標(biāo)本復(fù)查手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法，比如對(duì)HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽(yáng)性標(biāo)本及少見(jiàn)模式的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。elisa試劑盒可測(cè)液體標(biāo)本需保證不含沉淀，要求：1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè)，
2015
05-06

ELISA試劑樣本的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
前期準(zhǔn)備利用ELISA試劑盒進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本，ELISA試劑盒及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1.
2015
05-05

乳糖肉湯培養(yǎng)基的保存條件
乳糖肉湯培養(yǎng)基的保存條件：培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，現(xiàn)在均改制成粉末。乳糖肉湯培養(yǎng)基50mg青蒿琥酯含量測(cè)定常溫，避光100200-200202100mg氫溴酸右美沙芬含量測(cè)定常溫，避光100201--201003100mg舒必利UV法含量測(cè)定常溫，避光1
2015
05-04

常用ELISA試劑盒的種類
ELISA試劑盒的種類：1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒：2、肝纖維化檢測(cè)ELISA試劑盒：3、心肌梗塞檢測(cè)ELISA試劑盒：4、內(nèi)分泌檢測(cè)ELISA試劑盒5、傳染病檢測(cè)ELISA試劑盒6、自身免疫檢測(cè)ELISA試劑盒：7、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)ELISA試劑盒：8、特種蛋白檢測(cè)ELISA試劑盒20mg湖貝甲素TLC掃描法含量測(cè)定110859-20030120mg異鼠李素含量測(cè)定110860-20060820mg山柰酚（山柰素）含量測(cè)定110861-20080820mg銀杏內(nèi)酯A含量測(cè)定110862-200608
2015
04-30

進(jìn)口Elisa試劑盒的六大*性
（一）靈敏度高雖然酶活性調(diào)節(jié)Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大Elisa試劑盒中，檢測(cè)的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測(cè)所檢測(cè)的待測(cè)物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子，那么理論推測(cè)酶活性放大Elisa方法的zui低檢測(cè)限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達(dá)不到這個(gè)水平（大于104個(gè)分子），但表明Elisa在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是
2015
04-29

ELISA試劑盒染色體上的著絲粒分離
日前紐約大學(xué)的生物學(xué)家揭開(kāi)了關(guān)鍵蛋白被裝入著絲粒的詳細(xì)機(jī)制，有助于人們進(jìn)一步了解基因組復(fù)制并分析染色體數(shù)異常背后的潛在因素。這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)發(fā)表在zui近一期的美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊PNAS雜志上。著絲粒負(fù)責(zé)介導(dǎo)染色體分離以確保子細(xì)胞獲得基因組的完整拷貝，ELISA試劑盒這一過(guò)程遭到破壞可能導(dǎo)致染色體數(shù)異常，而這種異常在90%的癌癥中都明顯存在。研究人員利用裂殖酵母著重對(duì)著絲粒的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行了研究。由于裂殖酵母的染色體復(fù)制和著絲粒調(diào)控與人類相似，這種酵母是細(xì)胞生物學(xué)中常用的模式生物。在人類和裂殖酵母中都存
2015
04-28

大鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)原理
實(shí)驗(yàn)方法原理水合氯醛腹腔麻醉，采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島，并分離、培養(yǎng)胰島單細(xì)胞。1.用無(wú)菌D-Hanks’液將組織塊清洗2~3次，加入新鮮酶液繼續(xù)消化，重復(fù)上述步驟，此時(shí)組織塊邊緣模糊。2.將組織塊浸入消化酶液中，38℃±1℃消化10分鐘，將消化酶液與組織塊分開(kāi)，組織塊重新加入新鮮消化酶液進(jìn)行消化；而原消化酶液1500rpm離心10分鐘，取沉淀即為消化下的細(xì)胞，重新用無(wú)菌D-Hanks’懸浮，離心，重復(fù)1~2次，再用培養(yǎng)基洗2~3次，用
2015
04-27

ELISA試劑盒的制備要點(diǎn)
隨著人們對(duì)病原體感染與機(jī)體免疫應(yīng)答的逐步認(rèn)識(shí)，以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的，更為快速簡(jiǎn)便的免疫檢驗(yàn)方法就應(yīng)運(yùn)而生了。試驗(yàn)中各個(gè)操作步驟常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助：這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測(cè)的病原體感染診斷治療的要求，迫使人們必須去尋找其他的檢測(cè)途徑，直接的或是間接的。ELISA試劑盒的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè)，并可在特定的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測(cè)，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化
2015
04-24

ELISA試劑盒樣本的檢測(cè)方法
血清是zui常用的ELISA試劑盒標(biāo)本之一，ELISA檢測(cè)中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本中干擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后結(jié)果偏高或偏低的主要原因，干擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類；外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色
2015
04-21

豬胰高血糖素樣肽2（GLP2）ELISA試劑盒
豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)ELISA試劑盒操作步驟本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T3μg/L-120μg/L使用目的：豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)ELISA試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)皮素（ET）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠內(nèi)皮素（ET）水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素（ET）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素（ET），再與HRP標(biāo)記的內(nèi)皮素（ET）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。T
2015
04-16

大鼠胰島素受體α（ISR-α）試劑盒技術(shù)分析
大鼠胰島素受體α（ISR-α）試劑盒技術(shù)分析實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠胰島素受體ISR-α水平。用純化的大鼠胰島素受體α（ISR-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素受體α（ISR-α），再與HRP標(biāo)記的胰島素受體α（ISR-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素受體α（ISR-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm

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