狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

      

        

            
		
            
		
            
			
			
            
				
            
				
            
					
				
            
				搜全站
				
            
			
            
		
            
	
            
	
            
		
            
			
            
			
																					
               聯(lián)系電話
               021-69985169
            
																		
            
						
						
            上海一研生物科技有限公司
            
			
            
				11
			
            
		
            
	
            
	
	

            
		
            
			
			
            
				ARTICLE
					
            當(dāng)前位置：上海一研生物科技有限公司>>技術(shù)文章展示
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
            
				
              
										
            • 
						
              
							
              2015
              08-10
              
							
              
								
              切片清洗（浸洗、沖洗和漂洗）
              
								抗體稀釋液其實許多實驗室抗體稀釋液就用一般PBS即可，但的抗體稀釋液中除PBS成份外，還加了*防腐劑、BSA穩(wěn)定劑等組份，對抗體的多次回收利用較好。正因為這種原因，我一直用國產(chǎn)的抗體稀釋液，一段時間在更換新抗體稀釋液時實驗結(jié)果出現(xiàn)了陰性結(jié)果（提示可能一抗沒有結(jié)合），zui后從抗體濃度和孵育時間、封閉時間等原因排除后，發(fā)現(xiàn)是新抗體稀釋液的PH值偏酸，而使抗原抗體反應(yīng)不佳，終而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。切片清洗（浸洗、沖洗和漂洗）為了防止一抗、二抗等試劑殘留而引起非特異性染色，所以適當(dāng)?shù)丶訌娗逑矗ㄑ娱L時間和增 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              08-07
              
							
              
								
              植物免疫系統(tǒng)的分子機制
              
								“我們識別出植物細胞內(nèi)的一個關(guān)鍵分子通路?！毖芯康闹饕髡?、麻薩諸塞州綜合醫(yī)院（MassachusettsGeneralHospital，MGH)分子生物學(xué)部的JenSheen博士說道?！拔覀儼l(fā)現(xiàn)如果激活葉子中的這個通路，葉子抗細菌和真菌等病原體的能力就會大大增加?！盨heen表示，植物有著而復(fù)雜的免疫系統(tǒng)。作用類似人體肌膚的厚厚的表皮細胞壁就是它們的*道防線。如果病原體能夠穿越這道天然屏障，如通過傷口侵入細胞，病原體通常也會被植物細胞表面或內(nèi)部的受體識別出來。富含亮氨酸重復(fù)單位（Leucine 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              08-05
              
							
              
								
              斑點免疫金銀染色法
              
								1984年，Moeremans等將斑點酶聯(lián)免疫吸附法（dot-ELISA）與免疫金銀染色法相結(jié)合，建立了固相載體上的斑點免疫金銀染色法（dot-IGS/IGSS）。抗體基本原理蛋白質(zhì)抗原通過直接點樣或轉(zhuǎn)移電泳吸附在硝酸纖維素膜（NC膜）上，與特異性抗體反應(yīng)后，在滴加（或浸入）膠體金標記的第二抗體，結(jié)果在抗原抗體發(fā)生金顆粒聚集，形成肉眼可見的粉紅色斑點，稱為斑點免疫金染色（dot-IGS）。此反應(yīng)可再提高銀顯色液增強，即斑點免疫金銀染色法（dot-IGS/IGSS）。試劑及材料1.NC膜2.20m 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-31
              
							
              
								
              PBS的清洗方式選擇
              
								PBS的清洗方式選擇.次數(shù)和時間的選擇？（1）單獨沖洗，防止交叉反應(yīng)造成污染。臨床上每天檢測的病例很多，所用的抗體種類及項目也多，如果在加入一抗孵育完后，將它們在一個缸內(nèi)洗，這樣就會造成交叉污染，影響zui后的結(jié)果。正確的做法是單獨地進行沖洗，沖洗的PBS為一次性，保證切片沒有相互交叉污染的機會。（2）溫柔沖洗，防止切片的脫落。沖洗切片，取出切片，將PBS從上輕輕地沖洗，讓PBS自上而下流下來，不要拿起切片將PBS對準切片沖洗，這樣由于沖出的PBS有一定的沖擊力，很容易使切片周邊引起松動，導(dǎo)致切 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-29
              
							
              
								
              SABC法與其他免疫組織化學(xué)染色方法
              
								EnvisionTMSVStemS該法是近幾年在國內(nèi)推廣使用的一種方法，它的原理是將多個抗鼠和抗兔IgG分子與辣根過氧化物酶結(jié)合形成聚合物。以代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法的二抗和三抗，直接與特異性*抗體結(jié)合，從而放大了抗原抗體結(jié)合的信號，使檢測變得簡單而且敏感性增加。經(jīng)DAB顯色即可完成染色，其他染色步驟與SABC法相同。Maxvision法該法是根據(jù)聚合物技術(shù)把過氧化物酶與抗鼠和(或)抗兔IgG分子結(jié)合在多聚肽上形成多聚物分子，可以避免由于生物素引起的非特異性背景顯色，其他染色步驟與SABC法相同。故適合于生 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-27
              
							
              
								
              免疫熒光組織化學(xué)基本原理
              
								免疫熒光組織化學(xué)(immunofluorescencehistochemistry)或免疫熒光細胞化學(xué)(immunofluorescencecytochemistry)是將熒光作為標記物的免疫組織化學(xué)技術(shù)。1942年，Coons等報道用異硫氰酸熒光素(FITC)標記抗體，檢查小鼠組織切片中的可溶性肺炎球菌多糖抗原，從此開創(chuàng)了免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)的先河。隨著熒光標記技術(shù)和單克隆抗體技術(shù)的不斷發(fā)展和激光掃描共聚焦顯微鏡的應(yīng)用，使免疫熒光組織化學(xué)的特異性、快速性和在細胞、分子水平定位的敏感性與準確性大 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-24
              
							
              
								
              免疫熒光組織化學(xué)雙重染色的應(yīng)用
              
								由于大腦中膽堿能神經(jīng)元直接參與人類運動、學(xué)習(xí)和記憶．它的胚胎發(fā)生和發(fā)生機制一直是神經(jīng)科學(xué)的熱點，因為這一問題的解決可能會找到治療膽堿能系統(tǒng)退行性疾病的有效途徑，也將闡明神經(jīng)元如何發(fā)生這個神經(jīng)科學(xué)的基本問題。要實現(xiàn)這一目標，首先要確定胚胎發(fā)生過程中膽堿能神經(jīng)元的時空定位、胚胎來源以及如何獲得膽堿能表型的過程。關(guān)于膽堿能神經(jīng)元在端腦的時空定位．20世紀80年代末美國幾個實驗室報道了幾乎一致的研究成果。而對于后兩個問題始終*莫展。有一天，在翻閱文獻時我發(fā)現(xiàn)了一個奇怪現(xiàn)象，U.E．Schambra(19 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-22
              
							
              
								
              非放射性標記探針的檢測
              
								雜交體檢測又稱雜交體顯示，是指通過一定方法使雜交反應(yīng)形成的雜交體(雜交信號)成為在顯微鏡下可識別的產(chǎn)物。對原位雜交反應(yīng)信號進行顯示的方法因探針標記物不同而異。根據(jù)標記物的不同，非放射性標記探針原位雜交信號的顯示方法也不同，如果用熒光素標記探針，雜交信號可直接在熒光顯微鏡下觀察，如果用辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標記探針，原位雜交信號可用相應(yīng)底物的酶促反應(yīng)來顯示。目前．常用非放射性標記物多為半抗原，以半抗原標記探針的原位雜交信號可通過免疫酶組織化學(xué)或親和組織化學(xué)技術(shù)顯示。如用生物素標記探針進行原位雜 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-20
              
							
              
								
              PNA寡聚體的特性
              
								PNA寡聚體具有*的特性：1．由于PNA的電中性骨架，其分子中不含磷酸基團，因此PNA鏈更容易和帶有負電荷的互補序列的DNA或RNA鏈結(jié)合，而且形成的復(fù)合物分子較DNA／DNA雙鏈或DNA／RNA雜交鏈更為穩(wěn)定。2。PNA與核酸雜交不僅具有很高的親和性，還有很高的特異性。PNA對互補DNA的錯配容忍程度比相應(yīng)的DNA／DNA更低，一個15mer的PNA／DNA分子在其中間段出現(xiàn)一個錯配堿基，其Tm值下降8～20℃，兩個堿基錯配則*不能雜交。3．PNA不被目前已知的任何核酸酶或蛋白酶所降解。如在合 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-17
              
							
              
								
              常用測量參數(shù)的基本術(shù)語
              
								長度對于形狀不規(guī)則的線形組織結(jié)構(gòu)，一般方法很難計算出長度，如組織中的毛細血管和神經(jīng)纖維，細胞超微結(jié)構(gòu)中的各種膜性結(jié)構(gòu)等，以往常用排列稀疏或密集等詞描述，圖像分析儀則可測出各種圖像周界線的長度。例如：在活檢組織的子宮頸上皮細胞電子顯微鏡照片上，測出一定范圍內(nèi)的細胞膜長度為8128像素，橋粒長度為1229像素，計算出橋粒長度占細胞膜總長度的15％，用此方法觀察到癌細胞的橋粒值遠小于正常細胞，因此，則可以提出癌細胞轉(zhuǎn)移的原因之一可能與癌細胞之間的細胞連接減少有關(guān)。面積在光鏡或電鏡免疫組織化學(xué)標本觀察中 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-15
              
							
              
								
              冰凍切片
              
								?冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接切片。?在切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程。–縮短了制片時間–抗原性不受損失?對穩(wěn)定性差的抗原，如淋巴細胞表面抗原尤其適合。?組織凍結(jié)過程中，細胞內(nèi)、外的水分會形成冰晶，凍結(jié)的速度愈慢，冰晶顆粒愈大，可嚴重影響組織、細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。因此制備凍塊時要求低溫、速凍。1、冰凍組織塊的常用方法?液氮中冰凍：組織投入液氮中(一196?C)中10～20sec；?干冰中加入丙酮(或異戊烷)，液體立即氣化起泡，溫度降至一70?C，將組織投入，若在干冰丙酮中置一盛有異 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-13
              
							
              
								
              激光掃描共聚焦顯微鏡的光信號接收和成像方式
              
								激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM)是80年代發(fā)展起來的一項具有劃時代意義的新產(chǎn)品。實現(xiàn)了對細胞內(nèi)部非侵入式光學(xué)斷層掃描成像，從而對被檢物體樣品從停留到表面單層，靜態(tài)平面的觀察進行到立體，斷層掃描、動態(tài)全面的觀察，在生命科學(xué)研究中得到迅速應(yīng)用。儀器構(gòu)成(1)計算機系統(tǒng)：控制著機械，光學(xué)、聲學(xué)系統(tǒng)及各種外圍設(shè)備。(2)激光照射系統(tǒng)：氬離子激光器和聲光調(diào)節(jié)器。光信號接收和成像方式(1)光信號接收生物樣品發(fā)出的熒光通常有二種接收方式：①由光電 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-10
              
							
              
								
              免疫學(xué)抗體實驗室方法
              
								抗體作為實驗試劑已有很多年了。可以發(fā)展專門針對想要抗原的特殊抗體。另外，抗體試劑與抗原相互作用的結(jié)合通常具高親和力，這就使得檢測很少量靶抗原成為可能。典型的靶蛋白是：高度純化的蛋白質(zhì)、糖蛋白、或這些分子復(fù)雜異質(zhì)的混合物（如豚草屬花粉）。由于抗原結(jié)合區(qū)與效應(yīng)分子的功能決定區(qū)在不同的區(qū)域，所以，免疫球蛋白（Igs）在基因和分子水平實際上是組合結(jié)構(gòu)。例如，把編碼某一特定恒定區(qū)的基因和許多編碼可變區(qū)的基因中的任何一個相連，這一特定恒定區(qū)介導(dǎo)補體結(jié)合的能力能夠得以維持同時仍能被地定為靶目標。因此，無論是由 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-08
              
							
              
								
              免疫組化非特異性染色的因素
              
								非特異性染色的主要因素組織的非特異性染色的機理很復(fù)雜，其產(chǎn)生的原因主要可分為以下幾點：（1）一部分熒光素未與蛋白質(zhì)結(jié)合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白，可與組織成分結(jié)合。（3）除去檢查的抗原以外，組織中還可能存在類屬抗原（如Forssman氏抗原），可與組織中特異性抗原以外之之相應(yīng)抗體結(jié)合。（4）從組織中難于提純抗原性物質(zhì)，所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體，以致容易混淆。（5）抗體分子上標記的熒光素分子太多，這種過 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-03
              
							
              
								
              單細胞凝膠電泳的實驗原理
              
								實驗原理在細胞核中，DNA是環(huán)狀附著在核基質(zhì)上，細胞裂解過程中，核基質(zhì)被溶解、抽提，DNA的結(jié)構(gòu)則未發(fā)生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環(huán)向外展，同時由于暴露了陰電荷，在電場力的作用下，松動的DNA環(huán)向陽極遷移，但是由于這種松動的DNA環(huán)一端仍附著于核DNA，其遷移距離受到限制，因此尾長并不總是真實反映鏈缺口的多少。實際應(yīng)當(dāng)依靠尾長與尾部的熒光強度同時來進行分析。鏡檢和分析：1)在熒光顯微鏡下觀察，綠光激發(fā)吸收濾片590nm。必要時照相記錄。2)記數(shù)觀察的細胞，記錄 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              07-01
              
							
              
								
              SP法雙重染色步驟
              
								SP法雙重染色步驟1～6步驟與SABC法相同，但無需使用生物素阻斷劑：7．切片加入A特異性抗體（如兔抗A抗體），4=C孵育后，PBS沖洗3次，每次5分鐘8.滴加生物素化二抗（如抗兔二抗），室溫孵育切片10分鐘，繼而PBS沖洗3次，每次5分鐘；9.滴加鏈霉菌抗生物素蛋白—堿性磷酸酶，室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘10．堿性磷酸酶顯色液（BCIP／NBT）顯色（紫藍色）．PBS沖洗3次，每次5分鐘；11．滴加0．05％鹽酸，室溫10分鐘（可避免已顯色的抗原褪色）；12．滴加抗小鼠二抗同 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              06-29
              
							
              
								
              種子蛋白質(zhì)系統(tǒng)分析的實驗步驟
              
								儀器、試劑和材料1．儀器(1）日本MRK公司產(chǎn)VS-KT-P自動定氮儀(2）樣品磨(3）玻璃層析柱2．試劑(1)50％異丙醇（V/V）或70％乙醇(2)3％硼酸(3)0.5mol/LNaCI(4)0.lmol/LNaOH操作步驟1．制樣谷物籽粒風(fēng)干，用樣品磨粉碎，放干燥器中備用。2．裝柱在玻璃層析柱底部過濾篩板上置一層濾紙。稱取酸洗并經(jīng)540℃高溫處理的石英砂60g，樣品2g裝入三角瓶中混勻，每個樣品重復(fù)3次，設(shè)空白對照。另稱取石英砂20g，其中10g置于層析柱底部，將三角瓶中混合物裝入柱內(nèi)，再 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              06-26
              
							
              
								
              上皮細胞及腫瘤標記物的意義
              
								細胞組織標記物意義鱗狀細胞癌ZM-0313CK5/6胞漿陽性鱗狀細胞癌、皮膚基底細胞癌、鼻咽和其他部位的“淋巴上皮癌”及子宮頸部的乳頭狀“鱗狀移行”癌均陽性表達，為鱗狀細胞標記的。ZM-0406P63胞核陽性表達于乳腺和其他部位肌上皮細胞、前列腺基底細胞和鱗狀細胞及其來源的腫瘤。腺癌ZM-0315CK8/18胞漿陽性是腺上皮來源腫瘤的標記物的，在鱗狀上皮無交叉反應(yīng)。甲狀腺癌ZM-0250TTF-1胞核陽性表達于甲狀腺腺上皮、甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺濾泡癌、甲狀腺髓樣癌均陽性表達，注意必須pH8.0 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              06-24
              
							
              
								
              病理技術(shù)測定不過關(guān)的原因
              
								醫(yī)生與技術(shù)的關(guān)系：1、很多人會說，技術(shù)員工作做的不好，和醫(yī)生沒什么關(guān)系，其實不然。zui簡單的如取材，如果醫(yī)生取材厚薄不均，組織就處理不好，HE切片和免疫組化質(zhì)量都會有影響。技術(shù)員片子做的不好，醫(yī)生可以退片，要求重切，這是我們技術(shù)員應(yīng)該做的；但是，如果醫(yī)生取材不好，技術(shù)員要退組織，大多數(shù)醫(yī)生是不會同意的。這里就存在一個不合理的現(xiàn)象。還有的醫(yī)生提出取材不好，技術(shù)員可以自己去修一下，我不同意這樣的做法，一是技術(shù)員有可能修去你需要的病變，這個責(zé)任誰負，這是一種醫(yī)療故是對病人的不負責(zé)；二是作為醫(yī)生你應(yīng)該 
							
              
						
              
					
              • 
										
            • 
						
              
							
              2015
              06-19
              
							
              
								
              尿液蛋白分析和檢測
              
								尿蛋白成份分析對腎病的診斷治療以及愈后觀察都具有重要意義，這些指標包括：（1）尿微量白蛋白檢測：a.腎小球損傷時，尿中白蛋白排出量明顯升高，其升高程度與腎小球損傷的程度相關(guān)；b.可對糖尿病性腎病，重金屬及藥物中毒等腎病早期發(fā)現(xiàn)、診斷和療效觀察提供參考依據(jù)；控制不良的糖尿病，常發(fā)生腎臟損害，尿中白蛋白排出量增加是zui早出現(xiàn)的指標之一，還可能通過檢測尿白蛋白濃度對糖尿病性腎病分期及愈后作出判斷。（2）尿中免疫球蛋白濃度測定及尿中游離輕鏈分析。尿中游離輕鏈（本周氏蛋白）的檢測對診斷輕鏈病是*的步驟， 
							
              
						
              
					
              • 
									
            
				
            424344454647共47頁938條記錄