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						上海研生實(shí)業(yè)有限公司
            初級(jí)會(huì)員 | 第8年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            小鼠雜交瘤細(xì)胞株；ss-lgm注意事項(xiàng)2022/09/28
            
					
            
				小鼠雜交瘤細(xì)胞株；ss-lgm注意事項(xiàng)：（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。（4）離心后加入凍存
					
            
				
            
								
            
					
            人芳香烴受體（AhR）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作步驟2022/09/20
            
					
            
				人芳香烴受體（AhR）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，
					
            
				
            
								
            
					
            IGF- elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試劑配制2022/09/06
            
					
            
				IGF-elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試劑配制：1、標(biāo)準(zhǔn)品(1)從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品，于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解，并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5次以助溶解，充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7，放置備用。(2)取7個(gè)1.5ml離心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標(biāo)準(zhǔn)品S7到*個(gè)離心管中(S6)，輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個(gè)EP管中(S5)，輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。2、洗液工作液濃洗滌液
					
            
				
            
								
            
					
            人不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)elisa試劑盒樣本處理及要求2022/09/01
            
					
            
				人不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)elisa試劑盒樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
					
            
				
            
								
            
					
            磷酸化蛋白富集試劑盒?使用方法2022/08/23
            
					
            
				磷酸化蛋白富集試劑盒使用方法:準(zhǔn)備：第一次使用本試劑盒時(shí)需要將所有DNaseI干粉倒入溶液B中，輕柔顛倒使DNase干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存，最好在一個(gè)月內(nèi)完，否則DNase將逐漸失去活性。此外，最好在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將溶液B冰浴預(yù)冷。用法一：小量制備（主要用于上樣量比較小的SDS-PAGE電泳等實(shí)驗(yàn)）1、收集20-40mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌飽和培養(yǎng)液（OD420在1.5左右即可），2500g室溫離心10分鐘后棄上清。2、加入2mL溶液A，輕柔吹打，將細(xì)菌重懸于溶液A中。3、2500g室
					
            
				
            
								
            
					
            人單胺氧化酶ELISA試劑盒?操作流程2022/08/18
            
					
            
				人單胺氧化酶ELISA試劑盒操作流程：（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AI
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠乳酸脫氫酶（LDH）檢測(cè)ELISA試劑盒使用方法2022/08/04
            
					
            
				小鼠乳酸脫氫酶（LDH）檢測(cè)ELISA試劑盒使用方法:測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。24μg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12μg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6μg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3μ
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠兒茶酚胺（CA）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒?操作步驟2022/08/02
            
					
            
				小鼠兒茶酚胺（CA）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再
					
            
				
            
								
            
					
            HLAMP-2溶酶體相關(guān)膜蛋白2酶聯(lián)免疫試劑盒?注意事項(xiàng)2022/07/27
            
					
            
				HLAMP-2溶酶體相關(guān)膜蛋白2酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）檢測(cè)試劑盒試劑配制方法2022/07/19
            
					
            
				小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）檢測(cè)試劑盒試劑配制方法：1、標(biāo)準(zhǔn)品(1)從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品，于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解，并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5次以助溶解，充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7，放置備用。(2)取7個(gè)1.5ml離心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標(biāo)準(zhǔn)品S7到*個(gè)離心管中(S6)，輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個(gè)EP管中(S5)，輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。
					
            
				
            
								
            
					
            人蛋白ATP1B4ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)2022/07/14
            
					
            
				人蛋白ATP1B4ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下：1.正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被
					
            
				
            
								
            
					
            人晶體上皮細(xì)胞系培養(yǎng)方法2022/07/07
            
					
            
				人晶體上皮細(xì)胞系培養(yǎng)方法:收到人橫紋肌肉;TE671SublineNo.2說(shuō)明書后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況:如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:a,棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。b,向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),吸取胰蛋白酶,加含有6ml含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)
					
            
				
            
								
            
					
            NUP155 155kDa核孔蛋白elisa基本步驟2022/07/05
            
					
            
				NUP155155kDa核孔蛋白elisa基本步驟:1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本40μL(即樣本5倍)；空白對(duì)照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩
					
            
				
            
								
            
					
            大鼠類固醇5α還原酶1酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存方法2022/06/28
            
					
            
				大鼠類固醇5α還原酶1酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70
					
            
				
            
								
            
					
            人ADAM15 elisa試劑盒注意事項(xiàng)2022/06/23
            
					
            
				人ADAM15elisa試劑盒注意事項(xiàng)：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔diyi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后
					
            
				
            
								
            
					
            雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒樣本收集及儲(chǔ)存2022/06/21
            
					
            
				雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測(cè)試劑盒樣本收集及儲(chǔ)存:1.細(xì)胞培養(yǎng)上清:將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。2.血清樣本:室溫血液自然凝固20min后,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。3.血漿樣本:將全血收集到含抗血凝劑的管中,
					
            
				
            
								
            
					
            鼠抗人Bcl-6單克隆抗體規(guī)律2022/06/14
            
					
            
				鼠抗人Bcl-6單克隆抗體規(guī)律:（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原第一次進(jìn)入機(jī)體時(shí)，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時(shí)間也較短。（2）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開(kāi)始時(shí)，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低。隨后，抗體效價(jià)迅速大量增加，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時(shí)間亦較長(zhǎng)。（3）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后可逐漸消失。此時(shí)若再次接觸抗原，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺
					
            
				
            
								
            
					
            蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測(cè)程序2022/06/08
            
					
            
				蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測(cè)程序：1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果
					
            
				
            
								
            
					
            土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）操作流程2022/05/30
            
					
            
				土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）操作流程：1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠雜交瘤細(xì)胞；2D6C1C2C5培養(yǎng)操作規(guī)程2022/05/26
            
					
            
				小鼠雜交瘤細(xì)胞；2D6C1C2C5培養(yǎng)操作規(guī)程：一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1）抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。二．細(xì)胞處理：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于
					
            
				
            
							
				
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