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						上海莼試生物技術(shù)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第6年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIB11?培養(yǎng)操作規(guī)程2022/05/26
            
					
            
				小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIB11培養(yǎng)操作規(guī)程：一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1）培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。二．細(xì)胞處理：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠抗雙鏈DNA抗體elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2022/05/24
            
					
            
				小鼠抗雙鏈DNA抗體elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍
					
            
				
            
								
            
					
            內(nèi)酰胺酶大腸桿菌（大腸埃希氏菌）LAMP試劑盒使用方法2022/05/18
            
					
            
				RT-超廣譜RT-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌（大腸埃希氏菌）LAMP試劑盒使用方法:一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。1.標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。3.在7號(hào)管中加入5μL陽(yáng)性對(duì)照（濃度為1×10E8拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL
					
            
				
            
								
            
					
            牛的牛小腸堿性磷酸酶elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2022/05/11
            
					
            
				牛的牛小腸堿性磷酸酶elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣
					
            
				
            
								
            
					
            黑色素瘤相關(guān)抗原5抗體操作步驟2022/05/05
            
					
            
				黑色素瘤相關(guān)抗原5抗體操作步驟如下：1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2）加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3）加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。che底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過(guò)比色，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中，此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg
					
            
				
            
								
            
					
            巴布亞旋毛蟲(chóng)探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒樣品RNA的抽提2022/04/26
            
					
            
				巴布亞旋毛蟲(chóng)探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒樣品RNA的抽提：①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的
					
            
				
            
								
            
					
            小菌核屬菌種的保存方法2022/04/21
            
					
            
				小菌核屬菌種的保存方法：傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣[3]。液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。懸液保存法：①蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。②糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphB3細(xì)胞的凍存2022/04/13
            
					
            
				小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphB3細(xì)胞的凍存：1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。注意事項(xiàng)：1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久
					
            
				
            
								
            
					
            深紅紅螺菌操作步驟2022/04/07
            
					
            
				深紅紅螺菌操作步驟：菌株復(fù)蘇：（按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇）1)所有菌株，顯色培養(yǎng)基分4區(qū)，每區(qū)一株，標(biāo)明菌株號(hào)、菌種名常用縮寫如下：cal:白念珠菌cgl：光滑念珠菌cpa:近平滑念珠菌ctr:熱帶念珠菌ckr:克柔念珠菌cne:新型隱球菌，其他菌種標(biāo)記全名。2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外，另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h菌種鑒定：（48h后觀察結(jié)果）。低溫保存法：1.簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4
					
            
				
            
								
            
					
            封閉毛細(xì)線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒注意事項(xiàng)2022/03/31
            
					
            
				封閉毛細(xì)線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒注意事項(xiàng)：１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性
					
            
				
            
								
            
					
            捻轉(zhuǎn)毛細(xì)線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒操作流程2022/03/29
            
					
            
				捻轉(zhuǎn)毛細(xì)線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒操作流程:1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下
					
            
				
            
								
            
					
            軍團(tuán)菌IgM抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2022/03/24
            
					
            
				軍團(tuán)菌IgM抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。2、自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中
					
            
				
            
								
            
					
            葡萄芽假絲酵母菌種培養(yǎng)及打管說(shuō)明2022/03/22
            
					
            
				葡萄芽假絲酵母菌種培養(yǎng)及打管說(shuō)明：1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生
					
            
				
            
								
            
					
            狐貍源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒?通用原則2022/03/17
            
					
            
				狐貍源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒通用原則:1,先選擇好探針,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針。2,擴(kuò)增子的長(zhǎng)度應(yīng)不超過(guò)400bp,理想的*能在100-150bp內(nèi),擴(kuò)增片斷約短,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性3,保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,及在SG分析中非特異信號(hào)。4,為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)5,將引物和探針互相進(jìn)行配對(duì)檢測(cè),以避免二聚體和發(fā)
					
            
				
            
								
            
					
            人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒檢測(cè)步驟2022/03/15
            
					
            
				人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒檢測(cè)步驟：實(shí)驗(yàn)前30min拿出試劑盒，恢復(fù)至室溫，加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本前，請(qǐng)洗板3次并甩干加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品及檢測(cè)樣本到反應(yīng)孔中，封板后于37℃孵箱孵育90min↓加入100ul生物素化抗體工作液至反應(yīng)孔中，封板后于37℃孵箱孵育60min↓加入100ul酶結(jié)合物工作液至反應(yīng)孔中，封板后于37℃孵箱孵育30min↓加入100ul顯色底物至反應(yīng)孔中，封板后于37℃孵箱孵育15min↓加入50ul終止液，即刻用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)下測(cè)量OD值（5分鐘內(nèi)）1.回
					
            
				
            
								
            
					
            大鼠血小板因子3免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存2022/03/14
            
					
            
				大鼠血小板因子3免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存：1.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。2.細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后，以1
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠半乳糖凝集素-3ELISA試劑盒樣本處理及要求2022/03/07
            
					
            
				小鼠半乳糖凝集素-3ELISA試劑盒樣本處理及要求：1.血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響
					
            
				
            
								
            
					
            大鼠肌動(dòng)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2022/03/03
            
					
            
				大鼠肌動(dòng)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品，洗滌
					
            
				
            
								
            
					
            禽類脂肪成纖維抑制劑?細(xì)胞處理2022/03/01
            
					
            
				禽類脂肪成纖維抑制劑細(xì)胞處理：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2.
					
            
				
            
								
            
					
            人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)elisa試劑盒操作步驟2022/02/22
            
					
            
				人卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)elisa試劑盒操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干
					
            
				
            
							
				
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