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海藻及海洋細菌的DNA制備方法2021/11/02

眾suo周知，海藻由于富含多糖，DNA提取是一大難題，以下是在試驗過程中收集的海藻DNA制備方法，經(jīng)試驗驗證可行，現(xiàn)在貼出來，以觴眾戰(zhàn)友。一、可大量培養(yǎng)的海洋細菌1、取1ml目的菌菌液至1.5ml的EP管中，5000r/m離心5分鐘棄上清，菌體加入500μl水洗滌一次，5000r/m離心5分鐘，棄上清，向菌體中加入200μl懸浮緩沖液。2、在200μl懸浮緩沖液中加人55℃Tirs飽和酚200μl和10%的SDS45μl混勻，在微型蝸旋混和儀上混勻，55℃溫浴15分鐘，并且不斷振蕩混勻。3、12

生物技術(shù)常用實驗操作簡單介紹2021/11/01

一、總RNA的提取（Trizol法提?。┰谑占缴锊牧现螅詈媚芗纯踢M行RNA制備工作。若需暫時儲存，則應(yīng)以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase的作用。1.提取組織RNA時，每50～100mg組織用1mlTrizol試劑對組織進行裂解；提取細胞RNA時，先離心沉淀細胞，每5-10╳106個細胞加1mlTrizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞；2.將上述組織或細胞的T

pcr產(chǎn)物的純化與回收實驗報告2021/11/01

PCR產(chǎn)物的直接純化：一、原理PCR產(chǎn)物一般都含有過量的引物、TaqDNA酶及dNTP，這些成分的存在將直接影響到后續(xù)的酶切、雙脫氧PCR測序反應(yīng)等過程,因此有必要除去。目前核酸純化的方法有很多,商用化試劑盒的出現(xiàn)使得DNA的純化過程變得更加簡便快捷。本實驗中,BufferPCR-A促使大于100bp的DNA片斷選擇性地吸附到silica膜上。經(jīng)BufferW.BufferW2洗滌去除殘留在sica膜上的小于50-mer的引物、酶蛋白、單核苷酸、熒光染料或放射性同位素標(biāo)記的單核苷酸后,吸附到si

瓊脂糖凝膠電泳回收PCR產(chǎn)物2021/11/01

一．原理DNA--pian斷的分離與回收是基因工程操作中的一項重要技術(shù)，例如可收集特定酶切片斷用于克隆或制備探針，回收PCR產(chǎn)物用于再次鑒定等?；厥諏嶒炛袃蓚€最重要的技術(shù)指標(biāo)是純度和回收率：前者未達標(biāo)時會嚴重影響以后的酶切、連接、標(biāo)記等酶參與的反應(yīng)；后者不理想時往往會大大增加前期的工作量。本實驗采用的是V-GENE公司的DNA凝膠回收試劑盒，其原理是：在凝膠融化液（BufferDE-A）中凝膠塊被迅速融化并釋放出DNA。加入高離液序列溶液（BufferDE-B）后DNA--pian斷被選擇性吸附

PCR產(chǎn)物的檢測方法你知道幾種？2021/11/01

PCR產(chǎn)物的檢測方法：瓊脂糖凝膠電泳這是實驗室最chang用的方法，簡便易行，只需少量DNA即可進行實驗。其原理是不同大小的DNA分子通過瓊脂糖凝膠時，由于泳動速度不同而被分離，經(jīng)溴化乙錠（EB）染色，在紫外光照射下DNA分子發(fā)出熒光而判定其分子的大小。用于電泳檢測PCR產(chǎn)物的瓊脂糖濃度常為1%—2%，應(yīng)該使用純度高的電泳純級瓊脂糖，這種瓊脂糖已除去了熒光抑制劑及核酸酶等雜質(zhì)。（1）制膠瓊脂糖凝膠厚度約為3~5mm。過薄則加樣孔樣品會溢出來，過厚觀察時熒光穿透不強以至有些小片段DNA帶型不易分辨

為了做實驗而做實驗？不會分析，你是這樣的嗎2021/10/28

一個實驗項目整個過程，包括實驗原理、實驗步驟、注意事項、儀器數(shù)據(jù)分析、儀器故障排查等這些你都懂了嗎，你是不是也是忙的為了做實驗而做實驗?zāi)?？下面小編就從四個不同的方面跟大家一起探討一下你是哪個階層呢？一、小白（實驗室新人）剛來實驗室新人內(nèi)心OS：這是什么高大上的儀器，這個怎么用呢？我不會，誰教教我啊，好想學(xué)。過了一個月新人內(nèi)心OS：這個粉碎樣品的工作什么時候是個頭，我想學(xué)前處理，這個粉碎樣品的工作臺枯燥了！幾個月以后領(lǐng)導(dǎo)責(zé)問新人：樣品粉碎的標(biāo)準要求你還沒弄明白嗎？制樣粉碎工作都做不好嗎？出現(xiàn)異常結(jié)

無菌室的使用和管理你造嗎~2021/10/28

潔凈室（無菌室）的使用管理要做到以下工作：1、潔凈室（無菌室）要符合規(guī)范要求：無菌室應(yīng)采光良好、避免潮濕、遠離廁所及污染區(qū)。面積一般不超過10m2，不小于5m2；高度不超過2.4m。由1—2個緩沖間、操作間組成（操作間和緩沖間的門不應(yīng)直對），操作間和緩沖間之間應(yīng)具備滅菌功能的樣品傳遞箱。在緩沖間內(nèi)應(yīng)有洗手盆、毛巾、無菌衣褲放置架及掛鉤、拖鞋等，不應(yīng)放置培養(yǎng)箱和其他雜物；無菌室內(nèi)應(yīng)六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形，無縫隙，不留死角。操作間內(nèi)不應(yīng)安裝下水道。無菌操作室

實驗室試劑、器皿使用管理制度2021/10/28

試劑、器皿使用管理制度1.試劑、器皿應(yīng)有專人保管，分類存放，并定期檢查使用及保管情況。領(lǐng)用時需填寫記錄，過期或失效試劑要經(jīng)審核后作報廢處理。2.實驗室內(nèi)保存的少量易燃易爆試劑要放在遠離加熱操作臺的陰涼通風(fēng)處保管。3.劇毒、危害及易制du品試劑應(yīng)存放在倉庫的專柜內(nèi)，由兩人以上人員保管，領(lǐng)用時要填寫相關(guān)記錄。4.稱取化學(xué)試劑的器皿應(yīng)洗滌干凈，分開使用。固體試劑的取用遵循“只出不進，量用為出”的原則；液體試劑的取用遵循“只準傾出，不準吸出”的原則。5.揮發(fā)性強的試劑必須在通風(fēng)櫥內(nèi)取用。使用揮發(fā)性強的有

安全無小事，實驗室安全準則！2021/10/28

1）進入實驗室的學(xué)生必須接受安全教育，自覺服從管理，嚴格遵守實驗室的各項規(guī)章制度和規(guī)定，嚴格遵守儀器設(shè)備的操作規(guī)程。2）實驗前要認真閱讀教材，實驗參考書和有關(guān)參考資料，做好實驗預(yù)習(xí)報告，并按照任課教師的要求做好實驗前各項準備工作。部分實驗室需要穿著必要的規(guī)范服裝。3）進入實驗室后，要嚴格服從實驗教師的指導(dǎo)，按照zhi定座次就位，簽名，遵守安全規(guī)則，嚴禁穿背心、吊帶裝、拖鞋、高跟鞋等進實驗室；嚴禁吸煙、吐痰、亂扔紙屑，不在實驗室進食，飲水。4）開始任何實驗操作前，需了解所有物理、化學(xué)、生物方面的潛

實驗室知識分享：實驗室物品的驗收與處理！2021/10/27

實驗室物品都是要求比較高的，一般情況下，做實驗室耗材或者實驗室用品的公司都是比較嚴謹?shù)?，也是質(zhì)量控制比較嚴格，很多自己都是有實驗室的，做一些物品開發(fā)和一些應(yīng)用方案，這樣自己做過的應(yīng)用方案會更加保證自己的耗材或者試劑適合標(biāo)準方法。實驗室作為實驗室物品最終使用者，一般是實驗室的兼職驗收者，由于實驗室物品品類較多，一般我們是給予供應(yīng)商分級的，一級供應(yīng)商，一般是免檢，只檢查數(shù)量，一般是長期合作供應(yīng)商，一直貨品都有保證；二級供應(yīng)商，一般是專業(yè)性的，比如標(biāo)準物質(zhì)公司，比如計量器具公司等，一年可能采購數(shù)量和總

實驗室測試樣品管理的重要性2021/10/27

測試樣品是從整批商品中抽取出來作為產(chǎn)品質(zhì)量檢測所需，它的作用是，依據(jù)判定標(biāo)準和測試結(jié)果并將生產(chǎn)出的產(chǎn)品作為買賣交易中商品的交付標(biāo)準而做一判定。因此，任何一個檢測實驗室必須對測試樣品進行規(guī)范管理。如何做好樣品的管理，筆者認為，須從以下幾個方面做好樣品管理工作。測試樣品的獲取測試樣品的獲取一般有這么幾個渠道，一是顧客送樣，二是實驗室接受委托，到采樣現(xiàn)場進行樣品的采集，將采集的樣品做為實驗室測試樣品。這個環(huán)節(jié)是基礎(chǔ)，無論是客戶送樣還是實驗室自己采集樣品，都要認真對待。特別是客戶委托對產(chǎn)品進行判定的情況

科研人必看：實驗室固、液樣品取樣原則2021/10/27

在實驗過程中取用固體樣品和液體樣品是我們常做的事，所以掌握藥品及試劑的取用、稱量和溶解就是非常必要的。固體藥品的取用原則1．“三不”原則，即“不聞、不摸、不嘗”；具體說就是：不要去聞藥品的氣味，不能用手觸摸藥品，不能嘗試藥品的味道。2．節(jié)約原則，即嚴格按照實驗規(guī)定的用量取用藥品；如果沒有說明用量，一般按最少量（1～2mL)取用液體，固體只需蓋滿試管底部即可。最大量，液體不超過容器容積的1／3，固體不超過1／2。3．“三不一要”原則，即實驗用剩的藥品不能因為要“節(jié)約”而放回原試劑瓶，這樣做會污染試

只會檢測那怎么行？看看采樣、留樣相關(guān)知識吧！2021/10/27

對于實驗室檢測來說，采樣、留樣（包括成品留樣和物料留樣），樣品采集應(yīng)該按照何種原則來，留樣應(yīng)該如何管理？這些問題你是否考慮過？今天一起來看看檢測室采樣、留樣及樣品管理制度吧。1、目的為了保證分析數(shù)據(jù)、樣品的準確性和具有可追溯性，便于抽查、復(fù)查、滿足監(jiān)督管理要求，分清質(zhì)量責(zé)任，特制訂本管理制度。2、依據(jù)標(biāo)準本管理制度在安全采樣方面依據(jù)：GB3727《工業(yè)化學(xué)產(chǎn)品采樣安全通則》；GB4756《石油液體手工取樣法》；GB6678《化工產(chǎn)品采樣總則》；GB6679《固體化工產(chǎn)品采樣通則》；GB6680《

實驗動物選取的四大要素2021/10/26

為了取得有效的試驗結(jié)果，有必要依據(jù)試驗意圖挑選合適的查詢政策，在挑選動物時，需考慮四大要素（種屬、性別、周齡或體重、狀況）：種屬的挑選不同種屬的動物對同一疾病病因影響的反響程度會有很大的差異。在挑選試驗動物時，盡可能挑選對影響要素較為活絡(luò)且與人類靠近的種屬。例如在進行發(fā)熱試驗時，宜家兔：在進行過敏反響和失常反響試驗時，宜豚鼠；小鼠則宜用于半數(shù)致死量等方面的查詢。性別的挑選因為成年雌性動物的代謝存在著顯著的性周期的改動，這些改動會影響受試動物對某些試驗要素的反響狀況。因此在挑選試驗動物時，一般多用

血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響2021/10/26

血液標(biāo)本放置時間對檢驗結(jié)果的影響1、對血清電介質(zhì)濃度測定的影響，試驗結(jié)果表明血清鉀放置1h后與即刻比較明顯升高，差異有顯著意義（P2、對乳酸濃度的影響，血樣在室溫下放置15min，乳酸濃度明顯升高，高差異有顯著意義（P3、對血糖測定結(jié)果的影響，血清葡萄糖因血細胞的糖酵解每小時會降低7%，故采血后應(yīng)立即檢測，如無條件，應(yīng)及時分離血清。4、對心肌酶譜的影響，試驗結(jié)果顯示肌酸激酶的活性隨時間的延長而不斷下降，乳酸脫氫酶由于紅細胞的通透性改變，血清中酶活性不斷上升，羥丁酸脫氫酶活性也在放置過程中不斷上升

牛血清實驗中常見的問題解析！2021/10/26

胎牛血清通常在細胞培養(yǎng)中作為基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基的添加劑，在細胞培養(yǎng)中，血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白，低分子量營養(yǎng)物，疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時，胎牛血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分，起到保護細胞的作用。在細胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清，主要根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基化學(xué)成分，培養(yǎng)細胞的類型和培養(yǎng)體系而定。今天給大家分享的是牛血清實驗中常見的問題解析！搬起小板凳快來圍觀吧！血清實驗中常見的問題解析：一、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？將血清從冷凍箱取出后，先置于

各種類的動物血清與它們的用途2021/10/26

1、透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進行研究的實驗中。2、碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì)，如某些激素、細胞因子、生長因子等，去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗證激素的作用效果。3、去外泌體血清適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。4、低IgG血清用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細胞表面抗原表位。5、四環(huán)素血清應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)

標(biāo)準品、對照品、校準品、質(zhì)控品及參考品的區(qū)別2021/10/25

1.1標(biāo)準品是指用于鑒別、檢查、含量測定的標(biāo)準物質(zhì)，用于生物測定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標(biāo)準物質(zhì)，按效價單位或（mg）計，以國際標(biāo)準品進行標(biāo)定。（摘自《中國藥典》2010年版）1.2對照品是指用于鑒別、檢查、含量測定的標(biāo)準物質(zhì)，除另有規(guī)定外，均按干燥品（或無水物）進行計算后使用。（摘自《中國藥典》2010年版）1.3校準品即：校準物，具有在校準函數(shù)中用作獨立變量值的參考物質(zhì)；應(yīng)具有定值和已知的測量不確定度，其目的應(yīng)是校準某一測量系統(tǒng)，從而建立此系統(tǒng)測量結(jié)果的計量學(xué)溯源性。（摘自GB/

植物樣品的采取、處理與保存2021/10/25

生物化學(xué)分析的準確性，除取決于分析方法的選擇是否合適以及全部分析工作是否嚴格按照要求進行外，在很大程度上還取決于樣品的采取是否有最佳的代表性。如果不遵循科學(xué)方法采樣，樣品缺乏代表性，即使分析工作嚴謹無誤，也得不到正確的結(jié)論。因此，必須對樣品的采取、處理和保存給予足夠的重視。從大田或?qū)嶒炋锊苫氐臉悠罚话銛?shù)量較大，稱為“原始樣品”。再按原始樣品的種類（如根、莖、葉、花、果實等）分別選出“平均樣品”。再根據(jù)分析任務(wù)的要求和樣品的特征，從平均樣品中選出供分析用的“分析樣品”。由此可見，分析樣品的獲得須

實驗室存在的安全問題及解決方案2021/10/25

近年來實驗室事故頻發(fā)，往事歷歷在目。吸取教訓(xùn)、總結(jié)經(jīng)驗，是預(yù)防事故發(fā)生的最好辦法。目前，大部分實驗室都存在著哪些安全問題?應(yīng)對這些問題的解決方案又有哪些?實驗室安全面臨的問題技術(shù)方面存在的問題1.規(guī)劃設(shè)計考慮不周，造成安全隱患由于規(guī)劃設(shè)計人員對各類實驗室的功能要求缺乏一定程度的了解，尤其是對一些特殊實驗室的特殊要求知之甚少，因此在實驗室建設(shè)的規(guī)劃設(shè)計中對設(shè)施和裝備的安全要求考慮不周，工程設(shè)計上存在漏洞，包括人與機械、作業(yè)環(huán)境之間匹配不當(dāng)?shù)?，造成了安全隱患。2.安裝防護門窗，堵塞安全通道近年來，實