狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

介紹酶解聚方法獲得純化的原代細胞2024/02/05

原代細胞分離的方法有多種，常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法，下面我們就介紹酶解聚方法獲得純化的原代細胞。1、胰蛋白酶純化法●在去除不需要的組織后，使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4mm小片，通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀，去除上清液。重復清洗2到3次。●將盛有組織碎片的容器置于冰上，去除殘留的上清液。加入0.25%溶解在無鈣鎂的平衡鹽溶液中的胰蛋白酶（100mg組織加入1ml胰蛋白酶）?！裨?℃孵育6到18小時，使幾乎沒有胰蛋白酶活

實驗室推選：標準物質的特點與制備2024/01/29

標準物質是為了保證分析測試結果具有一定的準確度，并具有可比性和一致性，常常需要一種用來校準儀器、標定溶液濃度和評價分析方法的物質。標準物質要求材質均勻，性能穩(wěn)定，批量生產(chǎn)，準確定值，有標準物質證書。標準物質已經(jīng)確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質或材料，作為分析測量行業(yè)中的“量具"，在校準測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質或材料特性值和考核分析人員的操作技術水平，以及在生產(chǎn)過程中產(chǎn)品的質量控制等領域起著重要的作用。根據(jù)定義標準物質具有三個顯著特點：1.具有特性量值的準確性、均勻性、

皂素測定試劑盒說明書2024/01/22

皂素測定試劑盒說明書試劑盒特點:1、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復性和可靠性;3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。試劑盒性能：1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中血清素/血清胺(ST)水平。用純化

資訊推送：細胞凍存實驗必看2024/01/15

細胞凍存的必要性：首先，細胞培養(yǎng)過程中，考慮到細胞株傳代次數(shù)逐漸增加后，細胞變異的可能性將增大，繼續(xù)培養(yǎng)的話細胞株可能會出現(xiàn)老化、狀態(tài)下降、丟失一些該細胞的特性的現(xiàn)象，對后續(xù)實驗造成影響；此外，如果該細胞株特別珍貴，屬于實驗室重要資源，對細胞進行大規(guī)模的保存，能有效降低課題項目執(zhí)行的風險;最后，就是常見的風險規(guī)避問題，正所謂人有失手、馬有失蹄，再熟練的實驗操作者、再厲害的實驗設備也是有出問題的可能，一旦出問題，意味著細胞資源的損失?；谝陨蠋c，細胞凍存對于一個實驗室或個人來說，是非常必要的操作

原代細胞培養(yǎng)具體方法步驟敘述2024/01/08

一、準備工作準備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經(jīng)過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首ci培養(yǎng)稱為原代

無血清細胞培養(yǎng)基中添加哪些組分起作用探討2024/01/02

無血清細胞培養(yǎng)基（serumfreemedium，SFM）是一種特殊的細胞培養(yǎng)基，其中不含胎牛血清或其他血清成分。相對于傳統(tǒng)的含有血清的培養(yǎng)基，無血清培養(yǎng)基具有更高的質量控制、更穩(wěn)定的性能、更好的可重復性以及更好的細胞增殖和生長能力。因此，無血清培養(yǎng)基已經(jīng)成為細胞培養(yǎng)和生物技術領域中的一種重要工具和技術，但并不是所有細胞都適合在無血清培養(yǎng)基中生長（例如原代細胞和一些非癌細胞系，通常需要更加特殊的培養(yǎng)條件才能在無血清培養(yǎng)基中生長和繁殖。這些條件可以包括添加特殊的生長因子、細胞外基質和其他補充物，以

培養(yǎng)基種類及選擇介紹2023/12/26

培養(yǎng)基是指由人工方法配制而成，供微生物培養(yǎng)、分離、鑒別、研究和保存用的混合營養(yǎng)物制品，英文為culturemedium或medium。微生物的生長繁殖，需要一定的營養(yǎng)物質和適宜的環(huán)境條件。一、下面具體介紹培養(yǎng)基種類：1、按組成成分分類：純化學培養(yǎng)基：僅含有已知分子結構和純度的化學成分的培養(yǎng)基。未定義和部分定義的化學培養(yǎng)基：全部或部分由天然物質，加工過的物質或其他不純的化學物質構成的培養(yǎng)基。2、按狀態(tài)分類：液體培養(yǎng)基：一種或多種成分組成的水溶液（如：蛋白胨水，營養(yǎng)肉湯）。固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基：

PCR反應 模板核酸的提取辦法匯總2023/12/18

PCR反應的關鍵因素主要有引物的選擇與設計，酶的質量。模板的制備，在前二者都穩(wěn)定可行的情況下，PCR模板的制備尤為重要。模板處理方法的選擇及操作人員的基本技能，決定分離模板核酸(DNA或RNA)的質和量及PCR的成敗。而提高模板核酸質量的關鍵是除去雜質(蛋白質、酶、脂肪等)。除去抑制TaqDNA聚合酶活性抑制因子，提高模板核酸的產(chǎn)量。傳統(tǒng)的核酸模板提取方法是采用去垢劑如SDS等來破壞細胞組份，溶解細胞膜，使蛋白質變性，再用蛋白酶K來消化去除蛋白質，尤其是與DNA結合的蛋白質，再用酚:抽提，然后用

各種常見的血清不同點比較2023/12/11

血清是血漿凝固后分離出來的液體。當血漿在離心過程中凝固后，血漿中的凝血因子會被消耗掉，形成透明液體的血清。因此，血清中不含凝血因子，但含有血漿中其他的成分，如蛋白質、電解質、營養(yǎng)物質等。常見的血清有胎牛血清、新生牛血清與小牛血清等，下面分它們的不同點：1.血清類別牛血清類別胎齡胎牛血清（FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個月)新生牛血清(NCS)出生10日內小牛血清（BCS）16-22周供體血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清：母牛懷孕3-8個月時，采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血

各種常見種類PCR概述介紹2023/12/04

PCR是聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction）的簡稱，是一種體外擴增特定DNA片段的分子生物學技術。PCR的常見種類分述如下：1、普通PCR普通PCR即一代PCR，使用普通PCR擴增儀擴增靶基因，并通過瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行定性分析。2、實時熒光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR,qPCR）實時熒光定量PCR，也叫Real-TimePCR，即二代PCR，是指在PCR擴增反應體系中加入熒光染料或者熒光基團，在整個PCR過程中通過收集熒光信號實時

抗體的科學保存條件分享2023/11/28

抗體的科學保存條件：1、抗體濃度抗體濃度過低（2、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲存在50%的甘油中于-20℃保存，即使沒有凍融，其活性的損失也可以觀察到，盡管其進程仍然非常緩慢。即使沒有甘油，只要你不經(jīng)常凍融，抗體也可以存儲在-20℃幾年甚至幾十年。另一個重要的事情是，該抗體濃度應高于1毫克/毫升，因為稀的抗體容易失去活性而且容易造成物理吸附導致的損失。3、單克隆抗體單克隆抗體可以保存在50％的甘油存放于-20℃。也可以將其保存在飽和硫酸

ELISA實驗檢測方法的優(yōu)缺點2023/11/20

ELISA實驗檢測方法的優(yōu)缺點：1、直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢：操作手續(xù)簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進步。2.間接法（indirectELISA）此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。優(yōu)勢：二抗能夠加強信號，并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號

傳代培養(yǎng)操作步驟及注意事項2023/11/13

原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的最大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。細胞株也是可以購買的。1、操作步驟：（1）、吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。（2）、向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜。（3）、置37

微生物培養(yǎng)基的操作步驟與注意事項2023/11/06

培養(yǎng)基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養(yǎng)基礎。一般基礎培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)物質。微生物培養(yǎng)基應用范圍很廣。例如，無菌試驗培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌，它直接關系到人民用藥安全；在臨床及食品衛(wèi)生檢驗中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細菌的分離與鑒別，需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養(yǎng)基；病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細胞培養(yǎng)液，主要成分為多種氨基

ELISA實驗出現(xiàn)“花板”結果原因與解決辦法2023/10/30

酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)原理是抗原或抗體的固相化及抗原抗體的酶標記。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，由此進行定性或定量分析。該實驗因其靈敏度較高，特異性較好，操作較簡單，可大批量操作而廣泛應用于多種傳染性疾病的篩查工作中。然而，“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會給實驗者判讀結果帶來麻煩。所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內質控孔結果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結果較多。

針對?PCR擴增無目的條帶現(xiàn)象分析2023/10/23

聚合酶鏈反應(PCR)技術是在體外進行的由引物介導的酶促DNA擴增反應。PCR反應的關鍵環(huán)節(jié)：①模板核酸的制備；②引物的質量與特異性；③酶的質量；④PCR條件。尋找原因亦應針對上述環(huán)節(jié)進行分析檢測。1、模板a．模板質量不佳，含有雜蛋白質，特別是染色體中的組蛋白；模板核酸變性不夠；提取制備模板時丟失過多，或吸入酚。建議選擇質量可靠的提取試劑，重新提取高純度基因組模板；若模板為cDNA，需要檢查逆轉錄反應及其所用RNA的純度及完整度。b．模板中含有尿嘧啶抑制高保真酶的活性，或含有Taq酶抑制劑。c．

有關RT-PCR詳細闡述2023/10/16

RT-PCR是指將逆轉錄(ReverseTranscription；RT)反應和PCR(PolymeraseChainReaction)反應組合在一起的方法。1、RT-PCR的原理RT-PCR將以RNA為模板的cDNA合成同PCR結合在一起，提供了一種分析基因表達的快速靈敏的方法。RT-PCR用于對表達信息進行檢測或定量。另外，這項技術還可以用來檢測基因表達差異或不必構建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印跡、RNase保護分析、原位雜交及S1核酸酶分析在內的RNA

抗原抗體反應的主要四特性解析2023/10/08

抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行?？乖贵w反應的過程是經(jīng)過一系列的化學和物理變化，包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個階段，以及由親水膠體轉為疏水膠體的變化?？乖贵w反應的特點主要有四性：即特異性、比例性、可逆性，階段性。一、特異性抗原表位與抗體超變區(qū)結合的特異性，是兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系所決定的。這一特性，是應用于臨床診斷的基礎。但某些天然抗原具有多種抗原表位，與另一物質可能有共同抗原表位，對檢驗結果產(chǎn)生

常用的熒光素特性2023/10/03

熒光素發(fā)光原理：熒光實際上是一種發(fā)光類型，其中光子最初被吸收，導致原子處于激發(fā)狀態(tài)單線態(tài)。當電子回落到基態(tài)時，會發(fā)射出較低能量的光子。常用的熒光素特性：1、異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）為黃色或橙黃色結晶粉，吸收光490~495nm，發(fā)射光520~530nm，明亮的黃綠色熒光。2、四乙基羅丹明（rhodamine，RIB200）為橘紅色粉末，吸收光570nm，發(fā)射光595~600nm，橘紅色熒光。3、四甲基異硫氰酸羅丹明（tetramethylrh

有關抗體和重組蛋白重點解讀2023/09/21

重組蛋白（recombinantprotein）是指應用重組DNA或重組RNA技術而獲得的蛋白質。重組蛋白工程先應用基因克隆或化學合成技術獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達載體，導入到特定的宿主細胞，利用宿主細胞的遺傳系統(tǒng)，表達出有功能的蛋白質分子?？贵w的本質是免疫球蛋白（immunoglobulins），指具有抗體（Ab）活性或化學結構，與抗體分子相似的球蛋白。無論是保存還是運輸，請避免反復凍融。反復凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結構，導致蛋白變性形成